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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5oom | ||||||
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タイトル | Structure of a native assembly intermediate of the human mitochondrial ribosome with unfolded interfacial rRNA | ||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / mitochondria / biogenesis / translation / electron cryomicroscopy | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of mitochondrial translation / mitochondrial large ribosomal subunit assembly / Complex I biogenesis / protein lipoylation / negative regulation of ribosome biogenesis / Mitochondrial Fatty Acid Beta-Oxidation / Protein lipoylation / rRNA import into mitochondrion / mitochondrial [2Fe-2S] assembly complex / Respiratory electron transport ...negative regulation of mitochondrial translation / mitochondrial large ribosomal subunit assembly / Complex I biogenesis / protein lipoylation / negative regulation of ribosome biogenesis / Mitochondrial Fatty Acid Beta-Oxidation / Protein lipoylation / rRNA import into mitochondrion / mitochondrial [2Fe-2S] assembly complex / Respiratory electron transport / mitochondrial translational termination / mitochondrial translational elongation / translation release factor activity, codon nonspecific / positive regulation of mitochondrial translation / microprocessor complex / Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / Mitochondrial translation initiation / iron-sulfur cluster assembly complex / mitochondrial large ribosomal subunit / mitochondrial fission / mitochondrial large ribosomal subunit binding / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ / peptidyl-tRNA hydrolase / mitochondrial ribosome / mitochondrial small ribosomal subunit / mitochondrial translation / aminoacyl-tRNA hydrolase activity / [2Fe-2S] cluster assembly / iron-sulfur cluster assembly / ribosomal large subunit binding / proton motive force-driven mitochondrial ATP synthesis / respiratory chain complex I / : / mitochondrial electron transport, NADH to ubiquinone / mitochondrial respiratory chain complex I assembly / acyl binding / anatomical structure morphogenesis / acyl carrier activity / RNA processing / Mitochondrial protein degradation / aerobic respiration / rescue of stalled ribosome / ribosomal large subunit biogenesis / cellular response to leukemia inhibitory factor / fatty acid binding / mitochondrial membrane / fibrillar center / fatty acid biosynthetic process / double-stranded RNA binding / small ribosomal subunit rRNA binding / cell junction / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / endonuclease activity / mitochondrial inner membrane / negative regulation of translation / nuclear body / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / mitochondrial matrix / ribonucleoprotein complex / translation / protein domain specific binding / mRNA binding / nucleotide binding / calcium ion binding / synapse / nucleolus / apoptotic process / mitochondrion / RNA binding / extracellular space / nucleoplasm / nucleus / plasma membrane / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.03 Å | ||||||
データ登録者 | Brown, A. / Rathore, S. / Kimanius, D. / Aibara, S. / Bai, X.C. / Rorbach, J. / Amunts, A. / Ramakrishnan, V. | ||||||
引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2017 タイトル: Structures of the human mitochondrial ribosome in native states of assembly. 著者: Alan Brown / Sorbhi Rathore / Dari Kimanius / Shintaro Aibara / Xiao-Chen Bai / Joanna Rorbach / Alexey Amunts / V Ramakrishnan / 要旨: Mammalian mitochondrial ribosomes (mitoribosomes) have less rRNA content and 36 additional proteins compared with the evolutionarily related bacterial ribosome. These differences make the assembly of ...Mammalian mitochondrial ribosomes (mitoribosomes) have less rRNA content and 36 additional proteins compared with the evolutionarily related bacterial ribosome. These differences make the assembly of mitoribosomes more complex than the assembly of bacterial ribosomes, but the molecular details of mitoribosomal biogenesis remain elusive. Here, we report the structures of two late-stage assembly intermediates of the human mitoribosomal large subunit (mt-LSU) isolated from a native pool within a human cell line and solved by cryo-EM to ∼3-Å resolution. Comparison of the structures reveals insights into the timing of rRNA folding and protein incorporation during the final steps of ribosomal maturation and the evolutionary adaptations that are required to preserve biogenesis after the structural diversification of mitoribosomes. Furthermore, the structures redefine the ribosome silencing factor (RsfS) family as multifunctional biogenesis factors and identify two new assembly factors (L0R8F8 and mt-ACP) not previously implicated in mitoribosomal biogenesis. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5oom.cif.gz | 2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb5oom.ent.gz | 1.6 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5oom.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 5oom_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 5oom_full_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | |
XML形式データ | 5oom_validation.xml.gz | 222 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 5oom_validation.cif.gz | 368.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/oo/5oom ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/oo/5oom | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 2種, 2分子 AB
#1: RNA鎖 | 分子量: 500019.594 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 1025814679 |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 22022.131 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 1215733170 |
+39S ribosomal protein ... , 46種, 46分子 DEFHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ01235678...
-タンパク質 , 6種, 6分子 opquvw
#47: タンパク質 | 分子量: 12292.333 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BQC6 |
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#48: タンパク質 | 分子量: 23674.203 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q14197, peptidyl-tRNA hydrolase |
#49: タンパク質 | 分子量: 25426.895 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8TAE8 |
#53: タンパク質 | 分子量: 26203.076 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96EH3 |
#54: タンパク質 | 分子量: 8460.787 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: L0R8F8 |
#55: タンパク質 | 分子量: 17434.273 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O14561 |
-タンパク質・ペプチド , 1種, 1分子 t
#52: タンパク質・ペプチド | 分子量: 2400.951 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) |
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-非ポリマー , 3種, 52分子
#56: 化合物 | ChemComp-MG / #57: 化合物 | #58: 化合物 | ChemComp-PNS / | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Mitochondrial ribosome large subunit with assembly factor タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: #1-#55 / 由来: NATURAL | |||||||||||||||||||||||||
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分子量 | 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) | |||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.45 詳細: 2 mM Synercid (Santa Cruz Biotechnology, Inc) was added to reduce preferential orientation. | |||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: Sample concentration = 100 nM | |||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 | |||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K / 詳細: Sample incubated for 30 s prior to freezing. |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(補正後): 130841 X / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 1.5 sec. / 電子線照射量: 1.56 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 25 / 利用したフレーム数/画像: 1-25 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.11.1-2575_1479: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.03 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 379869 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 85 / プロトコル: OTHER / 空間: REAL / Target criteria: Cross-correlation coefficient | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 3J9M | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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