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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5jcs | |||||||||
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タイトル | CRYO-EM STRUCTURE OF THE RIX1-REA1 PRE-60S PARTICLE | |||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / pre-60S ribosome rix1 rea1 | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein-RNA complex remodeling / regulation of ribosomal subunit export from nucleus / 加水分解酵素 / traversing start control point of mitotic cell cycle / positive regulation of ATP-dependent activity / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of 5.8S rRNA / hexon binding / pre-mRNA 5'-splice site binding / cleavage in ITS2 between 5.8S rRNA and LSU-rRNA of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) ...protein-RNA complex remodeling / regulation of ribosomal subunit export from nucleus / 加水分解酵素 / traversing start control point of mitotic cell cycle / positive regulation of ATP-dependent activity / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of 5.8S rRNA / hexon binding / pre-mRNA 5'-splice site binding / cleavage in ITS2 between 5.8S rRNA and LSU-rRNA of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / ribosomal large subunit binding / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / Formation of a pool of free 40S subunits / negative regulation of mRNA splicing, via spliceosome / preribosome, large subunit precursor / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / ATPase activator activity / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / translational elongation / ribosomal large subunit export from nucleus / regulation of translational fidelity / protein-RNA complex assembly / ribosomal subunit export from nucleus / maturation of LSU-rRNA / Neutrophil degranulation / translation initiation factor activity / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / assembly of large subunit precursor of preribosome / ribosomal large subunit biogenesis / maturation of SSU-rRNA / cytosolic ribosome assembly / small-subunit processome / macroautophagy / maintenance of translational fidelity / rRNA processing / metallopeptidase activity / protein transport / ribosome biogenesis / viral capsid / ATPase binding / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / GTPase activity / mRNA binding / host cell nucleus / GTP binding / nucleolus / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / proteolysis / RNA binding / nucleoplasm / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 9.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Barrio-Garcia, C. / Thoms, M. / Flemming, D. / Kater, L. / Berninghausen, O. / Bassler, J. / Beckmann, R. / Hurt, E. | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2016 タイトル: Architecture of the Rix1-Rea1 checkpoint machinery during pre-60S-ribosome remodeling. 著者: Clara Barrio-Garcia / Matthias Thoms / Dirk Flemming / Lukas Kater / Otto Berninghausen / Jochen Baßler / Roland Beckmann / Ed Hurt / 要旨: Ribosome synthesis is catalyzed by ∼200 assembly factors, which facilitate efficient production of mature ribosomes. Here, we determined the cryo-EM structure of a Saccharomyces cerevisiae ...Ribosome synthesis is catalyzed by ∼200 assembly factors, which facilitate efficient production of mature ribosomes. Here, we determined the cryo-EM structure of a Saccharomyces cerevisiae nucleoplasmic pre-60S particle containing the dynein-related 550-kDa Rea1 AAA(+) ATPase and the Rix1 subcomplex. This particle differs from its preceding state, the early Arx1 particle, by two massive structural rearrangements: an ∼180° rotation of the 5S ribonucleoprotein complex and the central protuberance (CP) rRNA helices, and the removal of the 'foot' structure from the 3' end of the 5.8S rRNA. Progression from the Arx1 to the Rix1 particle was blocked by mutational perturbation of the Rix1-Rea1 interaction but not by a dominant-lethal Rea1 AAA(+) ATPase-ring mutant. After remodeling, the Rix1 subcomplex and Rea1 become suitably positioned to sense correct structural maturation of the CP, which allows unidirectional progression toward mature ribosomes. | |||||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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PDBx/mmCIF形式 | 5jcs.cif.gz | 2.9 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb5jcs.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 5jcs.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 5jcs_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 5jcs_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | 5jcs_validation.xml.gz | 242.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 5jcs_validation.cif.gz | 421.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/jc/5jcs ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/jc/5jcs | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
+60S ribosomal protein ... , 37種, 37分子 AcBdCeDfEgFhGiHjIkJlKLMNpOPQRS...
-タンパク質 , 6種, 6分子 morstu
#22: タンパク質 | 分子量: 26476.605 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: TIF6, CDC95, YPR016C, LPZ15C / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q12522 |
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#26: タンパク質 | 分子量: 74531.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: NOG1, YPL093W, LPG15W / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q02892 |
#32: タンパク質 | 分子量: 86755.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: SDA1, YGR245C / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P53313 |
#34: タンパク質 | 分子量: 559951.438 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: MDN1, REA1, YLR106C, L2901, L8004.13 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q12019 |
#36: タンパク質 | 分子量: 24027.650 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RLP24, YLR009W / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q07915 |
#38: タンパク質 | 分子量: 65290.336 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: ARX1, YDR101C, YD8557.10c / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q03862, 加水分解酵素 |
-Ribosome assembly ... , 2種, 2分子 nq
#24: タンパク質 | 分子量: 27098.012 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: MRT4, YKL009W, YKL160 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P33201 |
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#30: タンパク質 | 分子量: 57106.781 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RSA4, YCR072C, YCR72C / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P25382 |
-RNA鎖 , 3種, 3分子 xyz
#40: RNA鎖 | 分子量: 1097493.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: GenBank: 834774822 |
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#42: RNA鎖 | 分子量: 50682.922 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: GenBank: 1036126960 |
#44: RNA鎖 | 分子量: 38951.105 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: GenBank: 1039022925 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Rix1-Rea1 pre-60S particle / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 20 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F816 (8k x 8k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
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3次元再構成 | 解像度: 9.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / 粒子像の数: 15749 / 対称性のタイプ: POINT |