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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4v6u | |||||||||
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タイトル | Promiscuous behavior of proteins in archaeal ribosomes revealed by cryo-EM: implications for evolution of eukaryotic ribosomes | |||||||||
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![]() | RIBOSOME / archaea / archaeal / ribosomal / 70S / kink-turn / protein synthesis / RNA | |||||||||
機能・相同性 | ![]() ribonuclease P activity / tRNA 5'-leader removal / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / ribosomal large subunit biogenesis / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of SSU-rRNA / rRNA processing / large ribosomal subunit / regulation of translation / ribosomal small subunit biogenesis ...ribonuclease P activity / tRNA 5'-leader removal / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / ribosomal large subunit biogenesis / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of SSU-rRNA / rRNA processing / large ribosomal subunit / regulation of translation / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic small ribosomal subunit / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / structural constituent of ribosome / ribosome / translation / ribonucleoprotein complex / mRNA binding / RNA binding / zinc ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.6 Å | |||||||||
![]() | Armache, J.-P. / Anger, A.M. / Marquez, V. / Frankenberg, S. / Froehlich, T. / Villa, E. / Berninghausen, O. / Thomm, M. / Arnold, G.J. / Beckmann, R. / Wilson, D.N. | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Promiscuous behaviour of archaeal ribosomal proteins: implications for eukaryotic ribosome evolution. 著者: Jean-Paul Armache / Andreas M Anger / Viter Márquez / Sibylle Franckenberg / Thomas Fröhlich / Elizabeth Villa / Otto Berninghausen / Michael Thomm / Georg J Arnold / Roland Beckmann / Daniel N Wilson / ![]() 要旨: In all living cells, protein synthesis occurs on ribonucleoprotein particles called ribosomes. Molecular models have been reported for complete bacterial 70S and eukaryotic 80S ribosomes; however, ...In all living cells, protein synthesis occurs on ribonucleoprotein particles called ribosomes. Molecular models have been reported for complete bacterial 70S and eukaryotic 80S ribosomes; however, only molecular models of large 50S subunits have been reported for archaea. Here, we present a complete molecular model for the Pyrococcus furiosus 70S ribosome based on a 6.6 Å cryo-electron microscopy map. Moreover, we have determined cryo-electron microscopy reconstructions of the Euryarchaeota Methanococcus igneus and Thermococcus kodakaraensis 70S ribosomes and Crenarchaeota Staphylothermus marinus 50S subunit. Examination of these structures reveals a surprising promiscuous behavior of archaeal ribosomal proteins: We observe intersubunit promiscuity of S24e and L8e (L7ae), the latter binding to the head of the small subunit, analogous to S12e in eukaryotes. Moreover, L8e and L14e exhibit intrasubunit promiscuity, being present in two copies per archaeal 50S subunit, with the additional binding site of L14e analogous to the related eukaryotic r-protein L27e. Collectively, these findings suggest insights into the evolution of eukaryotic ribosomal proteins through increased copy number and binding site promiscuity. | |||||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
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その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.6 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 4.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 506.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 769.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
+30S ribosomal protein ... , 24種, 25分子 AQAKAIAGAWACABARADANAXAMAEAJAOAFASAYATAAAHAPAVB6AL
-タンパク質 , 3種, 3分子 A9AUBk
#9: タンパク質 | 分子量: 4868.993 Da / 分子数: 1 / Fragment: SEE REMARK 999 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#30: タンパク質 | 分子量: 17394.236 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#43: タンパク質 | 分子量: 37166.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-RNA鎖 , 5種, 5分子 A1A2A0B1B3
#11: RNA鎖 | 分子量: 24880.865 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#21: RNA鎖 | 分子量: 485455.500 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#27: RNA鎖 | 分子量: 24538.561 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#67: RNA鎖 | 分子量: 990820.375 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#68: RNA鎖 | 分子量: 40689.262 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
+50S ribosomal protein ... , 36種, 39分子 A3BGB4BYBOBCB5BKBLBfBUBbBeBEBaBTBWBiBABIBRBQBVBjBBBDBFBhBHBZ...
-詳細
配列の詳細 | THE SEQUENCE OF 30S RIBOSOMAL PROTEIN SX IS NOT KNOWN. |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Pyrococcus furiosus 70S ribosome / タイプ: RIBOSOME |
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緩衝液 | 名称: 56 mM Tris pH 8.2, 250 mM KOAc, 80 mM NH4OAc, 50 mM MgCl2, 1 mM DTT, 2 mM ADPNP pH: 8.2 詳細: 56 mM Tris pH 8.2, 250 mM KOAc, 80 mM NH4OAc, 50 mM MgCl2, 1 mM DTT, 2 mM ADPNP |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: Quantifoil grids (3/3) with 2 nm carbon on top |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK I / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % 詳細: Blot for 10 seconds before plunging into liquid ethane, using 2 layers of filter paper (FEI VITROBOT) |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 75000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3600 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 電子線照射量: 25 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F416 (4k x 4k) |
放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 相対比: 1 |
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解析
EMソフトウェア | 名称: SPIDER / カテゴリ: 3次元再構成 | ||||||||||||
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CTF補正 | 詳細: Wiener Filter | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 手法: Single Particle / 解像度: 6.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / 粒子像の数: 10000 / ピクセルサイズ(公称値): 1.24 Å / ピクセルサイズ(実測値): 1.24 Å 詳細: sorting for ribosome conformation and ligand presence was performed 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST
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