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- PDB-3p8b: X-ray crystal structure of Pyrococcus furiosus transcription elon... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 3p8b
タイトルX-ray crystal structure of Pyrococcus furiosus transcription elongation factor Spt4/5
要素
  • DNA-directed RNA polymerase, subunit e''
  • Transcription antitermination protein nusG
キーワードTRANSFERASE/TRANSCRIPTION / transcription elongation factor / RNA polymerase / TRANSFERASE-TRANSCRIPTION complex
機能・相同性
機能・相同性情報


transcription elongation-coupled chromatin remodeling / translation elongation factor activity / regulation of DNA-templated transcription elongation / ribosome / structural constituent of ribosome / mRNA binding / regulation of DNA-templated transcription / regulation of transcription by RNA polymerase II / zinc ion binding
類似検索 - 分子機能
Rubrerythrin, domain 2 - #90 / Archaeal transcription elongation factor Spt4 / Transcription elongation factor Spt5, archaeal / Archaeal transcription elongation factor Spt4 superfamily / NusG, N-terminal domain / Spt4/RpoE2 zinc finger / Spt4/RpoE2 zinc finger / Spt4/RpoE2 zinc finger / NGN domain / Transcription elongation factor SPT5 ...Rubrerythrin, domain 2 - #90 / Archaeal transcription elongation factor Spt4 / Transcription elongation factor Spt5, archaeal / Archaeal transcription elongation factor Spt4 superfamily / NusG, N-terminal domain / Spt4/RpoE2 zinc finger / Spt4/RpoE2 zinc finger / Spt4/RpoE2 zinc finger / NGN domain / Transcription elongation factor SPT5 / Early transcription elongation factor of RNA pol II, NGN section / SH3 type barrels. - #30 / NusG, N-terminal / In Spt5p, this domain may confer affinity for Spt4p. It possesses a RNP-like fold. / NusG, N-terminal domain superfamily / Rubrerythrin, domain 2 / RNA polymerase subunit RPABC4/transcription elongation factor Spt4 / Single Sheet / SH3 type barrels. / Ribosomal protein L24/L26, conserved site / KOW (Kyprides, Ouzounis, Woese) motif. / Translation protein SH3-like domain superfamily / KOW motif / KOW / Ribosomal protein L2, domain 2 / Roll / Alpha-Beta Plaits / 2-Layer Sandwich / Mainly Beta / Alpha Beta
類似検索 - ドメイン・相同性
BETA-MERCAPTOETHANOL / Transcription elongation factor Spt5 / Transcription elongation factor Spt4
類似検索 - 構成要素
生物種Pyrococcus furiosus (古細菌)
手法X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 1.8 Å
データ登録者Murakami, K.S. / Klein, B.J.
引用ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / : 2011
タイトル: RNA polymerase and transcription elongation factor Spt4/5 complex structure.
著者: Brianna J Klein / Daniel Bose / Kevin J Baker / Zahirah M Yusoff / Xiaodong Zhang / Katsuhiko S Murakami /
要旨: Spt4/5 in archaea and eukaryote and its bacterial homolog NusG is the only elongation factor conserved in all three domains of life and plays many key roles in cotranscriptional regulation and in ...Spt4/5 in archaea and eukaryote and its bacterial homolog NusG is the only elongation factor conserved in all three domains of life and plays many key roles in cotranscriptional regulation and in recruiting other factors to the elongating RNA polymerase. Here, we present the crystal structure of Spt4/5 as well as the structure of RNA polymerase-Spt4/5 complex using cryoelectron microscopy reconstruction and single particle analysis. The Spt4/5 binds in the middle of RNA polymerase claw and encloses the DNA, reminiscent of the DNA polymerase clamp and ring helicases. The transcription elongation complex model reveals that the Spt4/5 is an upstream DNA holder and contacts the nontemplate DNA in the transcription bubble. These structures reveal that the cellular RNA polymerases also use a strategy of encircling DNA to enhance its processivity as commonly observed for many nucleic acid processing enzymes including DNA polymerases and helicases.
履歴
登録2010年10月13日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02011年1月26日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12011年7月13日Group: Version format compliance
改定 1.22024年2月21日Group: Data collection / Database references / Derived calculations
カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond ...chem_comp_atom / chem_comp_bond / database_2 / pdbx_struct_conn_angle / struct_conn / struct_ref_seq_dif / struct_site
Item: _database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession ..._database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession / _pdbx_struct_conn_angle.ptnr1_auth_seq_id / _pdbx_struct_conn_angle.ptnr1_label_seq_id / _pdbx_struct_conn_angle.ptnr3_auth_seq_id / _pdbx_struct_conn_angle.ptnr3_label_seq_id / _pdbx_struct_conn_angle.value / _struct_conn.pdbx_dist_value / _struct_conn.ptnr1_auth_asym_id / _struct_conn.ptnr1_auth_seq_id / _struct_conn.ptnr1_label_asym_id / _struct_conn.ptnr1_label_seq_id / _struct_conn.ptnr2_auth_asym_id / _struct_conn.ptnr2_label_asym_id / _struct_ref_seq_dif.details / _struct_site.pdbx_auth_asym_id / _struct_site.pdbx_auth_comp_id / _struct_site.pdbx_auth_seq_id

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: DNA-directed RNA polymerase, subunit e''
B: Transcription antitermination protein nusG
C: DNA-directed RNA polymerase, subunit e''
D: Transcription antitermination protein nusG
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)52,96617
ポリマ-51,9064
非ポリマー1,06013
2,000111
1
A: DNA-directed RNA polymerase, subunit e''
B: Transcription antitermination protein nusG
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)26,60710
ポリマ-25,9532
非ポリマー6548
362
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
Buried area3610 Å2
ΔGint-13 kcal/mol
Surface area11120 Å2
手法PISA
2
C: DNA-directed RNA polymerase, subunit e''
D: Transcription antitermination protein nusG
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)26,3597
ポリマ-25,9532
非ポリマー4065
362
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
Buried area3670 Å2
ΔGint-16 kcal/mol
Surface area11260 Å2
手法PISA
3


  • 登録構造と同一
  • ソフトウェアが定義した集合体
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
Buried area10870 Å2
ΔGint-46 kcal/mol
Surface area18790 Å2
手法PISA
単位格子
Length a, b, c (Å)40.532, 87.213, 133.107
Angle α, β, γ (deg.)90.00, 90.00, 90.00
Int Tables number18
Space group name H-MP22121

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要素

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タンパク質 , 2種, 4分子 ACBD

#1: タンパク質 DNA-directed RNA polymerase, subunit e''


分子量: 9136.414 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Pyrococcus furiosus (古細菌) / 遺伝子: PF0255, Spt4 / プラスミド: pET15b / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21(DE3)codonplus RIPL / 参照: UniProt: Q8U440
#2: タンパク質 Transcription antitermination protein nusG


分子量: 16816.600 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Pyrococcus furiosus (古細菌) / 遺伝子: PF1990, Spt5 / プラスミド: pET21a / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21(DE3)codonplus RIPL / 参照: UniProt: Q8TZK1

-
非ポリマー , 4種, 124分子

#3: 化合物 ChemComp-ZN / ZINC ION


分子量: 65.409 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : Zn
#4: 化合物
ChemComp-BME / BETA-MERCAPTOETHANOL / 2-メルカプトエタノ-ル


分子量: 78.133 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 合成 / : C2H6OS
#5: 化合物
ChemComp-GOL / GLYCEROL / GLYCERIN / PROPANE-1,2,3-TRIOL / グリセロ-ル


分子量: 92.094 Da / 分子数: 5 / 由来タイプ: 合成 / : C3H8O3
#6: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 111 / 由来タイプ: 天然 / : H2O

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実験情報

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実験

実験手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1

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試料調製

結晶マシュー密度: 2.27 Å3/Da / 溶媒含有率: 45.72 %
結晶化温度: 295 K / 手法: 蒸気拡散法, シッティングドロップ法 / pH: 5.5
詳細: 0.1 M Bis-Tris (pH 5.5), 0.2 M NaCl, and 25% PEG3350, VAPOR DIFFUSION, SITTING DROP, temperature 295K

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データ収集

放射光源由来: シンクロトロン / サイト: CHESS / ビームライン: F1 / 波長: 0.9181 Å
検出器タイプ: ADSC QUANTUM 270 / 検出器: CCD / 日付: 2009年11月9日
放射プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray
放射波長波長: 0.9181 Å / 相対比: 1
反射解像度: 1.8→30 Å / Num. obs: 44007

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解析

ソフトウェア
名称バージョン分類
PHASER位相決定
REFMAC5.5.0072精密化
HKL-2000データ削減
HKL-2000データスケーリング
精密化構造決定の手法: 分子置換 / 解像度: 1.8→30 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.945 / Cor.coef. Fo:Fc free: 0.911 / SU B: 4.424 / SU ML: 0.132 / 交差検証法: THROUGHOUT / ESU R Free: 0.154 / 立体化学のターゲット値: MAXIMUM LIKELIHOOD / 詳細: HYDROGENS HAVE BEEN ADDED IN THE RIDING POSITIONS
Rfactor反射数%反射Selection details
Rfree0.29234 2208 5 %RANDOM
Rwork0.23644 ---
obs0.23928 41656 98.13 %-
溶媒の処理イオンプローブ半径: 0.8 Å / 減衰半径: 0.8 Å / VDWプローブ半径: 1.4 Å / 溶媒モデル: MASK
原子変位パラメータBiso mean: 31.098 Å2
Baniso -1Baniso -2Baniso -3
1-0.46 Å20 Å20 Å2
2--1.09 Å20 Å2
3----1.55 Å2
精密化ステップサイクル: LAST / 解像度: 1.8→30 Å
タンパク質核酸リガンド溶媒全体
原子数3238 0 56 111 3405
拘束条件
Refine-IDタイプDev idealDev ideal target
X-RAY DIFFRACTIONr_bond_refined_d0.0240.0223343
X-RAY DIFFRACTIONr_bond_other_d
X-RAY DIFFRACTIONr_angle_refined_deg1.9911.9884499
X-RAY DIFFRACTIONr_angle_other_deg
X-RAY DIFFRACTIONr_dihedral_angle_1_deg6.2465410
X-RAY DIFFRACTIONr_dihedral_angle_2_deg31.93623.433134
X-RAY DIFFRACTIONr_dihedral_angle_3_deg18.64115598
X-RAY DIFFRACTIONr_dihedral_angle_4_deg20.641524
X-RAY DIFFRACTIONr_chiral_restr0.140.2512
X-RAY DIFFRACTIONr_gen_planes_refined0.010.0212434
X-RAY DIFFRACTIONr_gen_planes_other
X-RAY DIFFRACTIONr_nbd_refined
X-RAY DIFFRACTIONr_nbd_other
X-RAY DIFFRACTIONr_nbtor_refined
X-RAY DIFFRACTIONr_nbtor_other
X-RAY DIFFRACTIONr_xyhbond_nbd_refined
X-RAY DIFFRACTIONr_xyhbond_nbd_other
X-RAY DIFFRACTIONr_metal_ion_refined
X-RAY DIFFRACTIONr_metal_ion_other
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_vdw_refined
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_vdw_other
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_hbond_refined
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_hbond_other
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_metal_ion_refined
X-RAY DIFFRACTIONr_symmetry_metal_ion_other
X-RAY DIFFRACTIONr_mcbond_it1.3111.52062
X-RAY DIFFRACTIONr_mcbond_other
X-RAY DIFFRACTIONr_mcangle_it2.24423360
X-RAY DIFFRACTIONr_scbond_it3.631281
X-RAY DIFFRACTIONr_scangle_it5.9834.51139
X-RAY DIFFRACTIONr_rigid_bond_restr
X-RAY DIFFRACTIONr_sphericity_free
X-RAY DIFFRACTIONr_sphericity_bonded
LS精密化 シェル解像度: 1.8→1.847 Å / Total num. of bins used: 20
Rfactor反射数%反射
Rfree0.407 142 -
Rwork0.396 2684 -
obs--86.26 %

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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