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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-9888 | |||||||||
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タイトル | Structure of influenza D virus polymerase bound to cRNA promoter in class 2 | |||||||||
マップデータ | Structure of influenza D virus polymerase bound to cRNA promoter in mode 2 | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 cap snatching / symbiont-mediated suppression of host mRNA transcription via inhibition of RNA polymerase II activity / host cell mitochondrion / 7-methylguanosine mRNA capping / virion component / RNA-directed RNA polymerase / viral RNA genome replication / RNA-dependent RNA polymerase activity / nucleotide binding / DNA-templated transcription ...cap snatching / symbiont-mediated suppression of host mRNA transcription via inhibition of RNA polymerase II activity / host cell mitochondrion / 7-methylguanosine mRNA capping / virion component / RNA-directed RNA polymerase / viral RNA genome replication / RNA-dependent RNA polymerase activity / nucleotide binding / DNA-templated transcription / host cell nucleus / RNA binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Influenza D virus (インフルエンザウイルス) / synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Peng Q / Peng R / Qi J / Gao GF / Shi Y | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Microbiol / 年: 2019 タイトル: Structural insight into RNA synthesis by influenza D polymerase. 著者: Qi Peng / Yuqian Liu / Ruchao Peng / Min Wang / Wei Yang / Hao Song / Yuhai Chen / Sheng Liu / Min Han / Xinzheng Zhang / Peiyi Wang / Jinghua Yan / Buchang Zhang / Jianxun Qi / Tao Deng / ...著者: Qi Peng / Yuqian Liu / Ruchao Peng / Min Wang / Wei Yang / Hao Song / Yuhai Chen / Sheng Liu / Min Han / Xinzheng Zhang / Peiyi Wang / Jinghua Yan / Buchang Zhang / Jianxun Qi / Tao Deng / George F Gao / Yi Shi / 要旨: The influenza virus polymerase uses capped RNA primers to initiate transcription, and a combination of terminal and internal de novo initiations for the two-step replication process by binding the ...The influenza virus polymerase uses capped RNA primers to initiate transcription, and a combination of terminal and internal de novo initiations for the two-step replication process by binding the conserved viral genomic RNA (vRNA) or complementary RNA (cRNA) promoter. Here, we determined the apo and promoter-bound influenza D polymerase structures using cryo-electron microscopy and found the polymerase has an evolutionarily conserved stable core structure with inherently flexible peripheral domains. Strikingly, two conformations (mode A and B) of the vRNA promoter were observed where the 3'-vRNA end can bind at two different sites, whereas the cRNA promoter only binds in the mode B conformation. Functional studies confirmed the critical role of the mode B conformation for vRNA synthesis via the intermediate cRNA but not for cRNA production, which is mainly regulated by the mode A conformation. Both conformations participate in the regulation of the transcription process. This work advances our understanding of the regulatory mechanisms for the synthesis of different RNA species by influenza virus polymerase and opens new opportunities for antiviral drug design. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_9888.map.gz | 2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-9888-v30.xml emd-9888.xml | 18 KB 18 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_9888_fsc.xml | 6.5 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_9888.png | 36.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-9888 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-9888 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_9888_validation.pdf.gz | 370.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_9888_full_validation.pdf.gz | 370.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_9888_validation.xml.gz | 9.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_9888_validation.cif.gz | 11.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-9888 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-9888 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 6kuvMC 9577C 9578C 9579C 9580C 9581C 9582C 9887C 6kujC 6kukC 6kupC 6kurC 6kutC 6kuuC 6kv5C M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_9888.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 22.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Structure of influenza D virus polymerase bound to cRNA promoter in mode 2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.36 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Influenza D virus polymerase bound to cRNA promoter in mode B con...
全体 | 名称: Influenza D virus polymerase bound to cRNA promoter in mode B conformation |
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要素 |
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-超分子 #1: Influenza D virus polymerase bound to cRNA promoter in mode B con...
超分子 | 名称: Influenza D virus polymerase bound to cRNA promoter in mode B conformation タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Influenza D virus (インフルエンザウイルス) |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 組換細胞: Hive Five |
分子量 | 実験値: 270 KDa |
-分子 #1: Polymerase 3
分子 | 名称: Polymerase 3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Influenza D virus (インフルエンザウイルス) |
分子量 | 理論値: 83.036086 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MSSVIREIAK RFLEQATINI AEEVVREYGD HERTMISVGV HFQACCLISD EYTLEDETTP RYVLLEGLKR QEAISKQNNI CSTLGLEPL RNLADIFDRK TRRFLEVGIT KRESDEYYQE KFNKIGNDMD IHVFTYEGKY FSNNPNGLED IQKTRIFTFL S FVSDELRK ...文字列: MSSVIREIAK RFLEQATINI AEEVVREYGD HERTMISVGV HFQACCLISD EYTLEDETTP RYVLLEGLKR QEAISKQNNI CSTLGLEPL RNLADIFDRK TRRFLEVGIT KRESDEYYQE KFNKIGNDMD IHVFTYEGKY FSNNPNGLED IQKTRIFTFL S FVSDELRK ENMFTEMYVT EEGAPELEMY KSKLFIAMRD ESVPLPYINY EHLRTRCETF KRNQAECEAK VADVASRLKI KL EHLEENK LRPLEIPKEK EAPYTHKFLM KDAWFFAKPH DSERAQPQQI LYDFFEAANM GFMTTSPKPI FGKQGLMYHS LWG QTKRAI KDKRNELEPS EQRDFLCGIG RASKKIQEDK WQESREEEFK QEETKGAAKR GFPTWFNEEW LWAMRDSGDG DNKI GDWIP MAEMPPCKNE MEDYAKKMCE ELESKIQGTN CAREMSKLIH TIGSLHTECR NFPGKVKIVP IYCRGTLRGE STDCL FGIA IKGKSHLNKD DGMYTVVTFE FSTEEPNPSK HEKYTVFEAG TVPVEAVVLT PKRERVLKEK KLFLYCRTTG MSKLKN DWF SKCRRCLIPT METVEQIVLK ECALKEENRV SEMLENKRAW IAHENGENLT RLVSTKLKDL CRMLIVTQFY YCIYNDN QL EGFCNEQKKF LMFLQADKDS KSAFTFNQKG LYEKIEECIV SNPLCIFLAD RLNKLFLVAK SNGAKYFE |
-分子 #2: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit
分子 | 名称: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: RNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Influenza D virus (インフルエンザウイルス) |
分子量 | 理論値: 86.138844 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MEINPYLLML NNDITSMISL TYPYTGAPPM SHGTSTKYSM ETVSRTYSYS RTKKEVPSGI FPIERRKFCN TIEDKENLEK PNGNVDINF MLSLAEMLEE KMGKGFFKFC ANEAEAEILK MHFSKLTEGR QTYDWTSERN MPAATALQLT VDAIQETQGT F KGTTMVEY ...文字列: MEINPYLLML NNDITSMISL TYPYTGAPPM SHGTSTKYSM ETVSRTYSYS RTKKEVPSGI FPIERRKFCN TIEDKENLEK PNGNVDINF MLSLAEMLEE KMGKGFFKFC ANEAEAEILK MHFSKLTEGR QTYDWTSERN MPAATALQLT VDAIQETQGT F KGTTMVEY CNKILEMMDW PEVKFKKVRM IVQRHWDPKT KKEIKMKSPT LMITKIGREE FIKRICTINT MAKDGERGKY KR RAIATPG MGIRPFSKIV ETLAQKICER LAESGLPVGG NEKKAKLKTT VSSTNSKLQE GQFMVNITGD NSKWNECQQP EAY LAMLAY ITKDSSNLMK DLCSVAPTLF CNKYVKMGQG FRAKNKRKTK EIVIPAKKMK ERKELMNAEW RDLFETIEPY MDGE CCFLG GGMLMGMFNM LSTVFGVMTL NYREEALARR NCYWTGLQSS DDFVLFCISR TWPEMEMTIL KFIAVCKLMG INMSL EKSY GCLPELFEFT SMFFSGDFVS NIALELPAFT TAGMNEGTDF TAAMSVIRTN MINNGLSPGT ALMALRICLQ EFRATY RVH PYDSGVKNHR MKIIRKFIET IENKDGLLIS DGGKLMNNIS SLHIPEEILK EDLMDPSYRN RVFNPRNPFT QFEKTVD IF KASGPIRVEE NEAVVSTHSF RTRSNRTLLN TDMRAMALEE KRYQVVCNMY RSVFESADVN TPIGSMSMGE AIEAKILD R ARTQFENGII GGEEYSEIKR LIEDAKRQRL SV |
-分子 #3: Polymerase PB2
分子 | 名称: Polymerase PB2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Influenza D virus (インフルエンザウイルス) |
分子量 | 理論値: 88.480484 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MSLLLTLAKE YANLTKDKKS CKLLSQGTVS SYTTFKKWTT SRKEKNPSLR MRWAMGSKFP IMANREILEE AGIPEQWEGI DLWSKKDDV SKLGMVLASP AAITYWNFCG PGVDNSSVIK DVYKAKFMKK ERWRETLWGP MNFELVGKQR RVVETQPVEI K LNQKEIKE ...文字列: MSLLLTLAKE YANLTKDKKS CKLLSQGTVS SYTTFKKWTT SRKEKNPSLR MRWAMGSKFP IMANREILEE AGIPEQWEGI DLWSKKDDV SKLGMVLASP AAITYWNFCG PGVDNSSVIK DVYKAKFMKK ERWRETLWGP MNFELVGKQR RVVETQPVEI K LNQKEIKE LTMWVLFEDE ANLASKFIQE NFSLVLSLRE LYKGKAVNKD VAAFMIAHQF SPEKRFLPTF GPIRPERMEL LH CLGGDFW KIEAVTAGSL NEEQKKRDVR AVARKICLRA SVDLFTPAEK IRDYIASVTM RFGTVERTFE DVIRNSDDIS AEV TLCKAA LGCELGKSMS FGNLNLRKVS GEAETMEKTV YWGLKPIKYK CWRGEETFYC ELRKVTCMFR RSEGLDWANI GPGS PEERR ELLAMVMIFC RDGRFFESAP VNIDESFFRT RLNKEIPYQY VLLKWVRQSR DNLDALLSTR GLIPAHIGQF GKGMG IDGS SSSSMVYKGV MLSKTPIDIV ESKEKHRLFL NDNIEAVTER GAMVASIMDL SEDNRETFND VTFNHVDLAV LKDEKT AII KIYRSLVERI NTDDDGLPAL IMGKRYLELY QLDEVKDAVG LIPKRMLGAY SYQARQLIQS QIKNDSYSLP EIIKLLP FC YSPPKKMLFD GTFHFKNQMY VRPGINTNLF SFSKTDKSKI YVNGSAVKIK LVLGDDEMDT SLAFVEGFQV CEYDPRAP L IPRRDLRLIG FGKKVRVFVG QGQEKTLVRT SSKRAASHDV SKNIRRMRLE V |
-分子 #4: RNA (5'-R(P*UP*CP*CP*UP*UP*GP*CP*UP*AP*CP*UP*GP*CP*U)-3')
分子 | 名称: RNA (5'-R(P*UP*CP*CP*UP*UP*GP*CP*UP*AP*CP*UP*GP*CP*U)-3') タイプ: rna / ID: 4 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 4.337563 KDa |
配列 | 文字列: UCCUUGCUAC UGCU |
-分子 #5: RNA (5'-R(P*AP*GP*CP*AP*UP*AP*AP*GP*CP*AP*GP*GP*AP*GP*A)-3')
分子 | 名称: RNA (5'-R(P*AP*GP*CP*AP*UP*AP*AP*GP*CP*AP*GP*GP*AP*GP*A)-3') タイプ: rna / ID: 5 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 4.902042 KDa |
配列 | 文字列: AGCAUAAGCA GGAGA |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.8 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT |
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得られたモデル | PDB-6kuv: |