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- EMDB-6478: Single-particle cryo-electron microscopy reconstruction of the eu... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-6478
タイトルSingle-particle cryo-electron microscopy reconstruction of the eukaryotic large ribosomal subunit
マップデータSingle-particle cryo-EM reconstruction of the eukaryotic large 60S ribosomal subunit
試料
  • 試料: Saccharomyces cerevisiae large 60S ribosomal subunit
  • 複合体: 60S large ribosomal subunit
キーワードribosome / translation
機能・相同性
機能・相同性情報


SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / Formation of a pool of free 40S subunits / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / ribosomal large subunit assembly / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / structural constituent of ribosome ...SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / Formation of a pool of free 40S subunits / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / ribosomal large subunit assembly / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / structural constituent of ribosome / RNA binding / cytosol
類似検索 - 分子機能
: / Ribosomal protein L6e signature. / Ribosomal Protein L6, KOW domain / Ribosomal protein L6e / 60S ribosomal protein L6E / Translation protein SH3-like domain superfamily / Ribosomal protein L2, domain 2
類似検索 - ドメイン・相同性
Large ribosomal subunit protein eL6A
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å
データ登録者Passos DO / Lyumkis D
引用ジャーナル: J Struct Biol / 年: 2015
タイトル: Single-particle cryoEM analysis at near-atomic resolution from several thousand asymmetric subunits.
著者: Dario Oliveira Passos / Dmitry Lyumkis /
要旨: A single-particle cryoEM reconstruction of the large ribosomal subunit from Saccharomyces cerevisiae was obtained from a dataset of ∼75,000 particles. The gold-standard and frequency-limited ...A single-particle cryoEM reconstruction of the large ribosomal subunit from Saccharomyces cerevisiae was obtained from a dataset of ∼75,000 particles. The gold-standard and frequency-limited approaches to single-particle refinement were each independently used to determine orientation parameters for the final reconstruction. Both approaches showed similar resolution curves and nominal resolution values for the 60S dataset, estimated at 2.9 Å. The amount of over-fitting present during frequency-limited refinement was quantitatively analyzed using the high-resolution phase-randomization test, and the results showed no apparent over-fitting. The number of asymmetric subunits required to reach specific resolutions was subsequently analyzed by refining subsets of the data in an ab initio manner. With our data collection and processing strategies, sub-nanometer resolution was obtained with ∼200 asymmetric subunits (or, equivalently for the ribosomal subunit, particles). Resolutions of 5.6 Å, 4.5 Å, and 3.8 Å were reached with ∼1000, ∼1600, and ∼5000 asymmetric subunits, respectively. At these resolutions, one would expect to detect alpha-helical pitch, separation of beta-strands, and separation of Cα atoms, respectively. Using this map, together with strategies for ab initio model building and model refinement, we built a region of the ribosomal protein eL6, which was missing in previous models of the yeast ribosome. The relevance for more routine high-resolution structure determination is discussed.
履歴
登録2015年10月5日-
ヘッダ(付随情報) 公開2015年10月21日-
マップ公開2015年10月21日-
更新2015年11月25日-
現状2015年11月25日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.01
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（高さに従い着色）
  • 表面レベル: 0.01
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-3jbs
  • 表面レベル: 0.01
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-3jbs
  • 表面レベル: 0.01
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-3jbs
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

400_6478.gif

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_6478.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 122.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Single-particle cryo-EM reconstruction of the eukaryotic large 60S ribosomal subunit
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.31 Å/pix.
x 320 pix.
= 419.2 Å		1.31 Å/pix.
x 320 pix.
= 419.2 Å		1.31 Å/pix.
x 320 pix.
= 419.2 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.31 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.01 / ムービー #1: 0.01
最小 - 最大-0.04220856 - 0.09491237
平均 (標準偏差)-0.00044745 (±0.00324659)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ320320320
Spacing320320320
セルA=B=C: 419.19998 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.311.311.31
M x/y/z320320320
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z419.200419.200419.200
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS320320320
D min/max/mean-0.0420.095-0.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Saccharomyces cerevisiae large 60S ribosomal subunit

全体名称: Saccharomyces cerevisiae large 60S ribosomal subunit
要素
  • 試料: Saccharomyces cerevisiae large 60S ribosomal subunit
  • 複合体: 60S large ribosomal subunit

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超分子 #1000: Saccharomyces cerevisiae large 60S ribosomal subunit

超分子名称: Saccharomyces cerevisiae large 60S ribosomal subunit
タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1
分子量理論値: 2.5 MDa

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超分子 #1: 60S large ribosomal subunit

超分子名称: 60S large ribosomal subunit / タイプ: complex / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI / Ribosome-details: ribosome-eukaryote: LSU 60S
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 株: BY4741 / 別称: yeast / 細胞中の位置: cytosol
分子量理論値: 2.5 MDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 6.8
詳細: 50 mM HEPES-KOH, 100 mM KOAc, 5 mM MgOAc, 1 mM EDTA, 2 mM DTT
グリッド詳細: 400 mesh, 1.2x1.3 micron C-flat grids, plasma-treated for 5 seconds
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 77 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER
手法: A 3 uL sample was applied onto a freshly plasma-treated (6 seconds, Gatan Solarus plasma cleaner) holey carbon C-flat grid (Protochips, Inc.), allowing the sample to adsorb for 30 seconds. ...手法: A 3 uL sample was applied onto a freshly plasma-treated (6 seconds, Gatan Solarus plasma cleaner) holey carbon C-flat grid (Protochips, Inc.), allowing the sample to adsorb for 30 seconds. The sample was then plunge-frozen in liquid ethane using a manual cryo-plunger in ambient atmosphere at 4 degrees C.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
アライメント法Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected within the Leginon software.
詳細super-resolution imaging
日付2014年9月2日
撮影カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 (4k x 4k) / 実像数: 1833 / 平均電子線量: 25 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系倍率（補正後）: 38167 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.5 µm / 倍率（公称値）: 22500
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正詳細: each particle
最終 再構成アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Frealign / 詳細: B-factor of -50 applied to final map / 使用した粒子像数: 75653

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

4ujq
PDB 未公開エントリ


Chain - Chain ID: H
ソフトウェア名称: Chimera, Rosetta
精密化空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 当てはまり具合の基準: FSC
得られたモデル

PDB-3jbs:
eL6 protein from yeast 60S ribosomal subunit

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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