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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6372 | |||||||||
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タイトル | JRFL Env SOSIP.664 in complex with CD4-binding site broadly neutralizing antibody DRVIA7 | |||||||||
マップデータ | HIV-1 soluble Env SOSIP trimer in complex with broadly neutralizing antibody DRVIA7 Fab | |||||||||
試料 |
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キーワード | HIV-1 / Env / broadly-neutralizing antibody / CD4 binding site / SOSIP | |||||||||
生物種 | Human immunodeficiency virus 1 (ヒト免疫不全ウイルス) / Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 21.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Ozorowski G / Ward AB | |||||||||
引用 | ジャーナル: Immunity / 年: 2016 タイトル: Key gp120 Glycans Pose Roadblocks to the Rapid Development of VRC01-Class Antibodies in an HIV-1-Infected Chinese Donor. 著者: Leopold Kong / Bin Ju / Yajing Chen / Linling He / Li Ren / Jiandong Liu / Kunxue Hong / Bin Su / Zheng Wang / Gabriel Ozorowski / Xiaolin Ji / Yuanzi Hua / Yanli Chen / Marc C Deller / ...著者: Leopold Kong / Bin Ju / Yajing Chen / Linling He / Li Ren / Jiandong Liu / Kunxue Hong / Bin Su / Zheng Wang / Gabriel Ozorowski / Xiaolin Ji / Yuanzi Hua / Yanli Chen / Marc C Deller / Yanling Hao / Yi Feng / Fernando Garces / Richard Wilson / Kaifan Dai / Sijy O'Dell / Krisha McKee / John R Mascola / Andrew B Ward / Richard T Wyatt / Yuxing Li / Ian A Wilson / Jiang Zhu / Yiming Shao / 要旨: VRC01-class antibodies neutralize diverse HIV-1 strains by targeting the conserved CD4-binding site. Despite extensive investigations, crucial events in the early stage of VRC01 development remain ...VRC01-class antibodies neutralize diverse HIV-1 strains by targeting the conserved CD4-binding site. Despite extensive investigations, crucial events in the early stage of VRC01 development remain elusive. We demonstrated how VRC01-class antibodies emerged in a Chinese donor by antigen-specific single B cell sorting, structural and functional studies, and longitudinal antibody and virus repertoire analyses. A monoclonal antibody DRVIA7 with modest neutralizing breadth was isolated that displayed a subset of VRC01 signatures. X-ray and EM structures revealed a VRC01-like angle of approach, but less favorable interactions between the DRVIA7 light-chain CDR1 and the N terminus with N276 and V5 glycans of gp120. Although the DRVIA7 lineage was unable to acquire broad neutralization, longitudinal analysis revealed a repertoire-encoded VRC01 light-chain CDR3 signature and VRC01-like neutralizing heavy-chain precursors that rapidly matured within 2 years. Thus, light chain accommodation of the glycan shield should be taken into account in vaccine design targeting this conserved site of vulnerability. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_6372.map.gz | 14.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-6372-v30.xml emd-6372.xml | 12.4 KB 12.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_6372.png | 60.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6372 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6372 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_6372_validation.pdf.gz | 78.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_6372_full_validation.pdf.gz | 77.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_6372_validation.xml.gz | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6372 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6372 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6372.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 15.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | HIV-1 soluble Env SOSIP trimer in complex with broadly neutralizing antibody DRVIA7 Fab | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.98 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Fab of broadly neutralizing antibody DRVIA7 in complex with HIV-1...
全体 | 名称: Fab of broadly neutralizing antibody DRVIA7 in complex with HIV-1 JRFL Env SOSIP.664 trimer |
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要素 |
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-超分子 #1000: Fab of broadly neutralizing antibody DRVIA7 in complex with HIV-1...
超分子 | 名称: Fab of broadly neutralizing antibody DRVIA7 in complex with HIV-1 JRFL Env SOSIP.664 trimer タイプ: sample / ID: 1000 詳細: Incubated Fab with trimer overnight at room temperature prior to placing on grid. 集合状態: Trimer of JRFL SOSIP.664 with one Fab bound to each protomer Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 570 KDa |
-分子 #1: HIV-1 Env SOSIP gp140
分子 | 名称: HIV-1 Env SOSIP gp140 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: SOSIP.664 / コピー数: 1 / 集合状態: Trimer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Human immunodeficiency virus 1 (ヒト免疫不全ウイルス) 株: JRFL / 別称: HIV-1 |
分子量 | 理論値: 420 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: HEK293F |
-分子 #2: DRVIA7 anti-HIV antibody Fab
分子 | 名称: DRVIA7 anti-HIV antibody Fab / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 3 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human |
分子量 | 理論値: 50 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: HEK293F |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.05 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 50 mM Tris-HCl, pH 7.4, 150 mM NaCl |
染色 | タイプ: NEGATIVE 詳細: Grids containing adsorbed protein were treated with 3 uL of 2% w/v uranyl formate for 60 seconds. Uranyl formate was then removed with blotting paper. |
グリッド | 詳細: Glow-discharged CU400 copper grids with carbon support |
凍結 | 凍結剤: NONE / 装置: OTHER |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | OTHER |
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アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 73,000 magnification. |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: FEI |
詳細 | A series of tilts from 0 to 50 degrees in 10 degree increments was collected to increase side views. |
日付 | 2015年4月6日 |
撮影 | カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: FEI CETA (4k x 4k) / 実像数: 142 / 平均電子線量: 25.05 e/Å2 |
Tilt angle max | 0 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): -1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): -1.5 µm / 倍率(公称値): 73000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC / Tilt angle min: -50 |
-画像解析
詳細 | Particles were selected automatically using DogPicker. Initial 2D class averages were inspected; those displaying complexes of trimer with Fab were subjected another round of classification. Only classes that clearly showed two or three Fabs per trimer were used for reconstruction. |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 21.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: EMAN2, Sparx / 使用した粒子像数: 10685 |