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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5563 | |||||||||
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| タイトル | Electron microscopy of Everglades virus | |||||||||
マップデータ | Reconstruction of wild type everglades virus | |||||||||
試料 |
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キーワード | electron microscopy / cryo-electron microscopy / alphavirus / everglades virus | |||||||||
| 生物種 | Everglades virus (エバーグレーズウイルス) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Sherman MB / Trujillo J / Leahy I / Razmus D / DeHate R / Lorcheim P / Czarneski MA / Zimmerman D / Newton JPM / Haddow AM / Weaver SC | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Struct Biol / 年: 2013タイトル: Construction and organization of a BSL-3 cryo-electron microscopy laboratory at UTMB. 著者: Michael B Sherman / Juan Trujillo / Ian Leahy / Dennis Razmus / Robert Dehate / Paul Lorcheim / Mark A Czarneski / Domenica Zimmerman / Je T'aime M Newton / Andrew D Haddow / Scott C Weaver / ![]() 要旨: A unique cryo-electron microscopy facility has been designed and constructed at the University of Texas Medical Branch (UTMB) to study the three-dimensional organization of viruses and bacteria ...A unique cryo-electron microscopy facility has been designed and constructed at the University of Texas Medical Branch (UTMB) to study the three-dimensional organization of viruses and bacteria classified as select agents at biological safety level (BSL)-3, and their interactions with host cells. A 200keV high-end cryo-electron microscope was installed inside a BSL-3 containment laboratory and standard operating procedures were developed and implemented to ensure its safe and efficient operation. We also developed a new microscope decontamination protocol based on chlorine dioxide gas with a continuous flow system, which allowed us to expand the facility capabilities to study bacterial agents including spore-forming species. The new unified protocol does not require agent-specific treatment in contrast to the previously used heat decontamination. To optimize the use of the cryo-electron microscope and to improve safety conditions, it can be remotely controlled from a room outside of containment, or through a computer network world-wide. Automated data collection is provided by using JADAS (single particle imaging) and SerialEM (tomography). The facility has successfully operated for more than a year without an incident and was certified as a select agent facility by the Centers for Disease Control. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_5563.map.gz | 15.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-5563-v30.xml emd-5563.xml | 10.8 KB 10.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_5563_1.jpg | 266.9 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5563 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5563 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_5563_validation.pdf.gz | 78.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_5563_full_validation.pdf.gz | 78 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_5563_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5563 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5563 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5563.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 29.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | Reconstruction of wild type everglades virus | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Everglades virus
| 全体 | 名称: Everglades virus (エバーグレーズウイルス) |
|---|---|
| 要素 |
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-超分子 #1000: Everglades virus
| 超分子 | 名称: Everglades virus / タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: monodisperse sample / Number unique components: 4 |
|---|
-超分子 #1: Everglades virus
| 超分子 | 名称: Everglades virus / タイプ: virus / ID: 1 / 生物種: Everglades virus / Sci species strain: Fe5-47et / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: Yes / ウイルス・中空状態: No |
|---|---|
| 宿主 | 生物種: unidentified (未定義) / 別称: VERTEBRATES |
| Host system | 生物種: unidentified (未定義) |
| ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: glycoprotein E1/E2 / 直径: 700 Å / T番号(三角分割数): 4 |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 濃度 | 1 mg/mL |
|---|---|
| 緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 0.05 M Tris HCl, pH 7.4, 0.1 M NaCl, 0.001 M EDTA |
| グリッド | 詳細: C-flat 1.2/1.3 holey film |
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 60 % / チャンバー内温度: 90 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 手法: blot for 4 seconds before plunging |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | JEOL 2200FS |
|---|---|
| 温度 | 最低: 87 K / 最高: 90 K / 平均: 88 K |
| アライメント法 | Legacy - 非点収差: manual correction at 150,000x |
| 特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: omega |
| 日付 | 2012年2月9日 |
| 撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 15 µm / 実像数: 80 / 平均電子線量: 20 e/Å2 / ビット/ピクセル: 16 |
| 電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 倍率(補正後): 74800 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.3 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.3 µm / 倍率(公称値): 60000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダー: Gatan 626 70 degree holder / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
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画像解析
| 詳細 | particles picked with EMAN2 boxer, reconstructed using IMAGIC-5 |
|---|---|
| CTF補正 | 詳細: micrograph |
| 最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 10.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: IMAGIC-5 詳細: final maps were calculated from individual particles 使用した粒子像数: 1000 |
| 最終 角度割当 | 詳細: icosahedral asymmetric unit |
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Everglades virus (エバーグレーズウイルス)
キーワード
データ登録者
引用
UCSF Chimera









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