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万見
- EMDB-3199: Cryo-EM structure of the Rix1-Rea1 pre-60S particle -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-3199
タイトルCryo-EM structure of the Rix1-Rea1 pre-60S particle
マップデータCryo-EM structure of the Rix1-Rea1 pre-60S particle
試料
  • 試料: Rix1-Rea1 pre60S particle
  • 複合体: pre-60S particle
キーワードribosome / ribosome biogenesis / ribosome assembly / pre-60S / 5S RNP / assembly intermediate / cryo-EM / Rea1 / Rix1 complex / Sda1
機能・相同性
機能・相同性情報


protein-RNA complex remodeling / regulation of ribosomal subunit export from nucleus / 加水分解酵素 / traversing start control point of mitotic cell cycle / positive regulation of ATP-dependent activity / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / pre-mRNA 5'-splice site binding / maturation of 5.8S rRNA / cleavage in ITS2 between 5.8S rRNA and LSU-rRNA of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane ...protein-RNA complex remodeling / regulation of ribosomal subunit export from nucleus / 加水分解酵素 / traversing start control point of mitotic cell cycle / positive regulation of ATP-dependent activity / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / pre-mRNA 5'-splice site binding / maturation of 5.8S rRNA / cleavage in ITS2 between 5.8S rRNA and LSU-rRNA of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / ribosomal large subunit binding / ATPase activator activity / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / negative regulation of mRNA splicing, via spliceosome / Formation of a pool of free 40S subunits / preribosome, large subunit precursor / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / translational elongation / ribosomal large subunit export from nucleus / ribosomal subunit export from nucleus / regulation of translational fidelity / protein-RNA complex assembly / maturation of LSU-rRNA / Neutrophil degranulation / translation initiation factor activity / assembly of large subunit precursor of preribosome / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / ribosomal large subunit biogenesis / cytosolic ribosome assembly / maturation of SSU-rRNA / small-subunit processome / macroautophagy / maintenance of translational fidelity / metallopeptidase activity / rRNA processing / protein transport / ribosome biogenesis / ATPase binding / 5S rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / nucleolus / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / proteolysis / RNA binding / zinc ion binding / nucleoplasm / ATP binding / metal ion binding / nucleus / cytosol / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
SDA1 domain / Midasin / Uncharacterised domain NUC130/133, N-terminal / Sda1 / Midasin, AAA lid domain 7 / Midasin AAA lid domain 5 / : / : / SDA1, conserved domain / SDA1, HEAT repeat ...SDA1 domain / Midasin / Uncharacterised domain NUC130/133, N-terminal / Sda1 / Midasin, AAA lid domain 7 / Midasin AAA lid domain 5 / : / : / SDA1, conserved domain / SDA1, HEAT repeat / Midasin AAA lid domain / Midasin AAA lid domain / Midasin AAA+ ATPase lid domain / SDA1, C-terminal / ATPase, dynein-related, AAA domain / AAA domain (dynein-related subfamily) / : / Sigma-54 interaction domain, ATP-binding site 1 / NLE / NLE (NUC135) domain / Ribosome assembly factor Mrt4 / : / NOG, C-terminal / Nucleolar GTP-binding protein 1 / NOGCT (NUC087) domain / Nucleolar GTP-binding protein 1, Rossman-fold domain / NOG1, N-terminal helical domain / Nucleolar GTP-binding protein 1 (NOG1) / NOG1 N-terminal helical domain / OBG-type guanine nucleotide-binding (G) domain / OBG-type guanine nucleotide-binding (G) domain profile. / Translation initiation factor IF6 / eIF-6 family / translation initiation factor 6 / Creatinase/aminopeptidase-like / GTP binding domain / 50S ribosomal protein L10, insertion domain superfamily / 60S ribosomal protein L10P, insertion domain / Insertion domain in 60S ribosomal protein L10P / : / metallochaperone-like domain / TRASH domain / VWFA domain profile. / Ribosomal protein L1, conserved site / Ribosomal protein L1 signature. / Ribosomal protein L1 / Ribosomal protein L13e, conserved site / Ribosomal protein L13e signature. / Ribosomal protein L22e / Ribosomal protein L22e superfamily / Ribosomal L22e protein family / Ribosomal protein L27e, conserved site / Ribosomal protein L27e signature. / Ribosomal protein L38e / Ribosomal protein L38e superfamily / Ribosomal L38e protein family / von Willebrand factor, type A / Ribosomal protein L1, 3-layer alpha/beta-sandwich / : / Ribosomal protein L19, eukaryotic / Ribosomal protein L19/L19e conserved site / Ribosomal protein L19e signature. / Ribosomal protein L6e signature. / Ribosomal protein L13e / Ribosomal protein L13e / 60S ribosomal protein L18a/ L20, eukaryotes / Ribosomal protein L34e, conserved site / Ribosomal protein L34e signature. / Ribosomal protein L5 eukaryotic, C-terminal / Ribosomal L18 C-terminal region / Ribosomal protein L30e signature 1. / 50S ribosomal protein L18Ae/60S ribosomal protein L20 and L18a / Ribosomal protein 50S-L18Ae/60S-L20/60S-L18A / Ribosomal proteins 50S-L18Ae/60S-L20/60S-L18A / Ribosomal protein L23/L25, N-terminal / : / Ribosomal protein L23, N-terminal domain / Eukaryotic Ribosomal Protein L27, KOW domain / Ribosomal protein 60S L18 and 50S L18e / Ribosomal Protein L6, KOW domain / Ribosomal protein L18/L18-A/B/e, conserved site / Ribosomal protein L18e signature. / Ribosomal protein L30e signature 2. / Ribosomal protein L27e / Ribosomal protein L27e superfamily / Ribosomal L27e protein family / Ribosomal protein L36e signature. / Ribosomal protein L35Ae, conserved site / Ribosomal protein L30e, conserved site / Ribosomal protein L35Ae signature. / Ribosomal protein L1-like / Ribosomal protein L1/ribosomal biogenesis protein / Ribosomal protein L1p/L10e family / Ribosomal protein L39e, conserved site / Ribosomal protein L39e signature. / : / Ribosomal protein L6e / Ribosomal protein L34Ae / Ribosomal protein L34e / 60S ribosomal protein L19
類似検索 - ドメイン・相同性
Large ribosomal subunit protein uL15 / Large ribosomal subunit protein uL23 / Large ribosomal subunit protein eL39 / Large ribosomal subunit protein uL30A / Large ribosomal subunit protein uL6A / Large ribosomal subunit protein uL22A / Large ribosomal subunit protein uL24A / Large ribosomal subunit protein eL33A / Large ribosomal subunit protein eL36A / Large ribosomal subunit protein eL15A ...Large ribosomal subunit protein uL15 / Large ribosomal subunit protein uL23 / Large ribosomal subunit protein eL39 / Large ribosomal subunit protein uL30A / Large ribosomal subunit protein uL6A / Large ribosomal subunit protein uL22A / Large ribosomal subunit protein uL24A / Large ribosomal subunit protein eL33A / Large ribosomal subunit protein eL36A / Large ribosomal subunit protein eL15A / Large ribosomal subunit protein eL22A / Large ribosomal subunit protein uL5A / Large ribosomal subunit protein eL27A / Large ribosomal subunit protein eL31A / Large ribosomal subunit protein eL20A / Large ribosomal subunit protein eL43A / Large ribosomal subunit protein uL14A / Large ribosomal subunit protein uL1A / Large ribosomal subunit protein uL2A / Large ribosomal subunit protein eL18A / Large ribosomal subunit protein uL11A / Large ribosomal subunit protein eL19A / Large ribosomal subunit protein uL29A / Large ribosomal subunit protein uL4A / Large ribosomal subunit protein eL30 / Large ribosomal subunit protein uL3 / Large ribosomal subunit protein eL8A / Ribosome assembly protein 4 / Large ribosomal subunit protein uL18 / Large ribosomal subunit protein uL13A / Ribosome assembly factor MRT4 / Large ribosomal subunit protein eL14A / Large ribosomal subunit protein eL32 / Large ribosomal subunit protein eL37A / Large ribosomal subunit protein eL38 / Protein SDA1 / Large ribosomal subunit protein eL34A / Large ribosomal subunit protein eL6A / Large ribosomal subunit protein eL21A / Nucleolar GTP-binding protein 1 / Probable metalloprotease ARX1 / Ribosome biogenesis protein RLP24 / Midasin / Eukaryotic translation initiation factor 6 / Large ribosomal subunit protein eL13A
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 9.5 Å
データ登録者Barrio-Garcia C / Thoms M / Flemming D / Kater L / Berninghausen O / Bassler J / Beckmann R / Hurt E
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2016
タイトル: Architecture of the Rix1-Rea1 checkpoint machinery during pre-60S-ribosome remodeling.
著者: Clara Barrio-Garcia / Matthias Thoms / Dirk Flemming / Lukas Kater / Otto Berninghausen / Jochen Baßler / Roland Beckmann / Ed Hurt /
要旨: Ribosome synthesis is catalyzed by ∼200 assembly factors, which facilitate efficient production of mature ribosomes. Here, we determined the cryo-EM structure of a Saccharomyces cerevisiae ...Ribosome synthesis is catalyzed by ∼200 assembly factors, which facilitate efficient production of mature ribosomes. Here, we determined the cryo-EM structure of a Saccharomyces cerevisiae nucleoplasmic pre-60S particle containing the dynein-related 550-kDa Rea1 AAA(+) ATPase and the Rix1 subcomplex. This particle differs from its preceding state, the early Arx1 particle, by two massive structural rearrangements: an ∼180° rotation of the 5S ribonucleoprotein complex and the central protuberance (CP) rRNA helices, and the removal of the 'foot' structure from the 3' end of the 5.8S rRNA. Progression from the Arx1 to the Rix1 particle was blocked by mutational perturbation of the Rix1-Rea1 interaction but not by a dominant-lethal Rea1 AAA(+) ATPase-ring mutant. After remodeling, the Rix1 subcomplex and Rea1 become suitably positioned to sense correct structural maturation of the CP, which allows unidirectional progression toward mature ribosomes.
履歴
登録2015年10月19日-
ヘッダ(付随情報) 公開2015年11月4日-
マップ公開2015年12月9日-
更新2016年2月17日-
現状2016年2月17日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（高さに従い着色）
  • 表面レベル: 0.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-5jcs
  • 表面レベル: 0.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-5jcs
  • 表面レベル: 0.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

EMD-3199_Rix...

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_3199.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 238.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Cryo-EM structure of the Rix1-Rea1 pre-60S particle
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
2.07 Å/pix.
x 400 pix.
= 827.6 Å		2.07 Å/pix.
x 400 pix.
= 827.6 Å		2.07 Å/pix.
x 400 pix.
= 827.6 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 2.069 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.3 / ムービー #1: 0.3
最小 - 最大-0.72063726 - 1.47908759
平均 (標準偏差)0.00007106 (±0.04510443)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ400400400
Spacing400400400
セルA=B=C: 827.6 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z2.0692.0692.069
M x/y/z400400400
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z827.600827.600827.600
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-180-180-179
NX/NY/NZ360360360
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS400400400
D min/max/mean-0.7211.4790.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Rix1-Rea1 pre60S particle

全体名称: Rix1-Rea1 pre60S particle
要素
  • 試料: Rix1-Rea1 pre60S particle
  • 複合体: pre-60S particle

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超分子 #1000: Rix1-Rea1 pre60S particle

超分子名称: Rix1-Rea1 pre60S particle / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1

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超分子 #1: pre-60S particle

超分子名称: pre-60S particle / タイプ: complex / ID: 1 / Name.synonym: pre-60S / 組換発現: No / Ribosome-details: ribosome-eukaryote: LSU 60S
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 別称: yeast

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度2.06 mg/mL
緩衝液pH: 7.5 / 詳細: 50 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 1.5 mM or 5 mM MgCl2
グリッド詳細: The freshly prepared pre-60S sample was applied to 2 nm pre-coated Quantifoil holey carbon supported grids and vitrified
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 手法: Blot for 3 seconds before plunging

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
日付2014年6月12日
撮影カテゴリ: CCD
フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F816 (8k x 8k)
実像数: 2659 / 平均電子線量: 20 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 4.2 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.1 µm / 倍率（公称値）: 75000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

詳細The particles were selected using the automatic selection program SIGNATURE
CTF補正詳細: Subvolumes
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 9.5 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Signature, Spider / 使用した粒子像数: 15749

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

3j64
PDB 未公開エントリ

ソフトウェア名称: Chimera, MDFF, Coot
精密化空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT
得られたモデル

PDB-5jcs:
CRYO-EM STRUCTURE OF THE RIX1-REA1 PRE-60S PARTICLE

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原子モデル構築 2

初期モデルPDB ID:

3u5d
PDB 未公開エントリ

ソフトウェア名称: Chimera, MDFF, Coot
精密化空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT
得られたモデル

PDB-5jcs:
CRYO-EM STRUCTURE OF THE RIX1-REA1 PRE-60S PARTICLE

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原子モデル構築 3

初期モデルPDB ID:

3u5e
PDB 未公開エントリ

ソフトウェア名称: Chimera
精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT
得られたモデル

PDB-5jcs:
CRYO-EM STRUCTURE OF THE RIX1-REA1 PRE-60S PARTICLE

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原子モデル構築 4

初期モデルPDB ID:

3j65
PDB 未公開エントリ

ソフトウェア名称: Chimera
精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT
得られたモデル

PDB-5jcs:
CRYO-EM STRUCTURE OF THE RIX1-REA1 PRE-60S PARTICLE

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原子モデル構築 5

初期モデルPDB ID:

4wjs

ソフトウェア名称: MDFF, Coot
精密化空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT
得られたモデル

PDB-5jcs:
CRYO-EM STRUCTURE OF THE RIX1-REA1 PRE-60S PARTICLE

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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