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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-23961 | |||||||||
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タイトル | Mtb 70SIC in complex with MtbEttA at Pre_R0 state | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | mycobacterium tuberculosis / ABCF ribosome complex / antibiotic / RIBOSOME | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of translational elongation / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; リン含有酸無水物に作用 / peptidoglycan-based cell wall / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit ...negative regulation of translational elongation / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; リン含有酸無水物に作用 / peptidoglycan-based cell wall / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / response to antibiotic / mRNA binding / ATP hydrolysis activity / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / metal ion binding / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) / Mycobacterium tuberculosis (strain ATCC 25618 / H37Rv) (結核菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.97 Å | |||||||||
データ登録者 | Cui Z / Zhang J | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Interplay between an ATP-binding cassette F protein and the ribosome from Mycobacterium tuberculosis. 著者: Zhicheng Cui / Xiaojun Li / Joonyoung Shin / Howard Gamper / Ya-Ming Hou / James C Sacchettini / Junjie Zhang / 要旨: EttA, energy-dependent translational throttle A, is a ribosomal factor that gates ribosome entry into the translation elongation cycle. A detailed understanding of its mechanism of action is limited ...EttA, energy-dependent translational throttle A, is a ribosomal factor that gates ribosome entry into the translation elongation cycle. A detailed understanding of its mechanism of action is limited due to the lack of high-resolution structures along its ATPase cycle. Here we present the cryo-electron microscopy (cryo-EM) structures of EttA from Mycobacterium tuberculosis (Mtb), referred to as MtbEttA, in complex with the Mtb 70S ribosome initiation complex (70SIC) at the pre-hydrolysis (ADPNP) and transition (ADP-VO) states, and the crystal structure of MtbEttA alone in the post-hydrolysis (ADP) state. We observe that MtbEttA binds the E-site of the Mtb 70SIC, remodeling the P-site tRNA and the ribosomal intersubunit bridge B7a during the ribosomal ratcheting. In return, the rotation of the 30S causes conformational changes in MtbEttA, forcing the two nucleotide-binding sites (NBSs) to alternate to engage each ADPNP in the pre-hydrolysis states, followed by complete engagements of both ADP-VO molecules in the ATP-hydrolysis transition states. In the post-hydrolysis state, the conserved ATP-hydrolysis motifs of MtbEttA dissociate from both ADP molecules, leaving two nucleotide-binding domains (NBDs) in an open conformation. These structures reveal a dynamic interplay between MtbEttA and the Mtb ribosome, providing insights into the mechanism of translational regulation by EttA-like proteins. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_23961.map.gz | 93.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-23961-v30.xml emd-23961.xml | 72.8 KB 72.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_23961_fsc.xml | 11.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_23961.png | 112.1 KB | ||
Filedesc metadata | emd-23961.cif.gz | 14.3 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23961 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23961 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_23961_validation.pdf.gz | 601.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_23961_full_validation.pdf.gz | 601.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_23961_validation.xml.gz | 12.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_23961_validation.cif.gz | 16.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23961 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23961 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_23961.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.06 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : The complex of Mtb 70SIC with MtbEttA at pre-hydrolysis state (Pre_R0)
+超分子 #1: The complex of Mtb 70SIC with MtbEttA at pre-hydrolysis state (Pre_R0)
+分子 #1: 50S ribosomal protein L32
+分子 #2: 50S ribosomal protein L33 2
+分子 #3: 50S ribosomal protein L34
+分子 #4: 50S ribosomal protein L35
+分子 #5: 50S ribosomal protein L36
+分子 #6: 50S ribosomal protein L31
+分子 #7: 50S ribosomal protein L37
+分子 #8: 50S ribosomal protein L1
+分子 #11: 50S ribosomal protein L2
+分子 #12: 50S ribosomal protein L3
+分子 #13: 50S ribosomal protein L4
+分子 #14: 50S ribosomal protein L5
+分子 #15: 50S ribosomal protein L6
+分子 #16: 50S ribosomal protein L9
+分子 #17: 50S ribosomal protein L13
+分子 #18: 50S ribosomal protein L14
+分子 #19: 50S ribosomal protein L15
+分子 #20: 50S ribosomal protein L16
+分子 #21: 50S ribosomal protein L17
+分子 #22: 50S ribosomal protein L18
+分子 #23: 50S ribosomal protein L19
+分子 #24: 50S ribosomal protein L20
+分子 #25: 50S ribosomal protein L21
+分子 #26: 50S ribosomal protein L22
+分子 #27: 50S ribosomal protein L23
+分子 #28: 50S ribosomal protein L24
+分子 #29: 50S ribosomal protein L25
+分子 #30: 50S ribosomal protein L27
+分子 #31: 50S ribosomal protein L28
+分子 #32: 50S ribosomal protein L29
+分子 #33: 50S ribosomal protein L30
+分子 #35: 30S ribosomal protein S3
+分子 #36: 30S ribosomal protein S4
+分子 #37: 30S ribosomal protein S5
+分子 #38: 30S ribosomal protein S6
+分子 #39: 30S ribosomal protein S7
+分子 #40: 30S ribosomal protein S8
+分子 #41: 30S ribosomal protein S9
+分子 #42: 30S ribosomal protein S10
+分子 #43: 30S ribosomal protein S11
+分子 #44: 30S ribosomal protein S12
+分子 #45: 30S ribosomal protein S13
+分子 #46: 30S ribosomal protein S14 type Z
+分子 #47: 30S ribosomal protein S15
+分子 #48: 30S ribosomal protein S16
+分子 #49: 30S ribosomal protein S17
+分子 #50: 30S ribosomal protein S18 1
+分子 #51: 30S ribosomal protein S19
+分子 #52: 30S ribosomal protein S20
+分子 #53: Energy-dependent translational throttle protein EttA
+分子 #9: 23S rRNA
+分子 #10: 5S rRNA
+分子 #34: 16S rRNA
+分子 #54: initiator tRNA (Met)
+分子 #55: mRNA
+分子 #56: ZINC ION
+分子 #57: MAGNESIUM ION
+分子 #58: PHOSPHOAMINOPHOSPHONIC ACID-ADENYLATE ESTER
+分子 #59: N-FORMYLMETHIONINE
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 2 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295 K |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 48.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |