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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-23358
タイトルStructure of E. coli 70S ribosome from EMPIAR-10304 at 4.8 Angstrom Resolution
マップデータStructure of E. coli 70S ribosome from EMPIAR-10304 at 4.8 Angstrom Resolution
試料
  • 複合体: 70S ribosome
生物種Escherichia coli (大腸菌)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.8 Å
データ登録者Bouvette J / Liu HF / Du X / Zhou Y / Sikkema AP / Mello JFR / Klemm B / Huang R / Schaaper RM / Borgnia MJ / Bartesaghi A
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021
タイトル: Beam image-shift accelerated data acquisition for near-atomic resolution single-particle cryo-electron tomography.
著者: Jonathan Bouvette / Hsuan-Fu Liu / Xiaochen Du / Ye Zhou / Andrew P Sikkema / Juliana da Fonseca Rezende E Mello / Bradley P Klemm / Rick Huang / Roel M Schaaper / Mario J Borgnia / Alberto Bartesaghi /
要旨: Tomographic reconstruction of cryopreserved specimens imaged in an electron microscope followed by extraction and averaging of sub-volumes has been successfully used to derive atomic models of ...Tomographic reconstruction of cryopreserved specimens imaged in an electron microscope followed by extraction and averaging of sub-volumes has been successfully used to derive atomic models of macromolecules in their biological environment. Eliminating biochemical isolation steps required by other techniques, this method opens up the cell to in-situ structural studies. However, the need to compensate for errors in targeting introduced during mechanical navigation of the specimen significantly slows down tomographic data collection thus limiting its practical value. Here, we introduce protocols for tilt-series acquisition and processing that accelerate data collection speed by up to an order of magnitude and improve map resolution compared to existing approaches. We achieve this by using beam-image shift to multiply the number of areas imaged at each stage position, by integrating geometrical constraints during imaging to achieve high precision targeting, and by performing per-tilt astigmatic CTF estimation and data-driven exposure weighting to improve final map resolution. We validated our beam image-shift electron cryo-tomography (BISECT) approach by determining the structure of a low molecular weight target (~300 kDa) at 3.6 Å resolution where density for individual side chains is clearly resolved.
履歴
登録2021年1月26日-
ヘッダ(付随情報) 公開2021年3月3日-
マップ公開2021年3月3日-
更新2021年4月14日-
現状2021年4月14日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.04
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（高さに従い着色）
  • 表面レベル: 0.04
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_23358.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_23358.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 9.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Structure of E. coli 70S ribosome from EMPIAR-10304 at 4.8 Angstrom Resolution
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸X (Sec.)Y (Row.)Z (Col.)
2.1 Å/pix.
x 139 pix.
= 291.9 Å		2.1 Å/pix.
x 143 pix.
= 300.3 Å		2.1 Å/pix.
x 124 pix.
= 260.4 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

これらの図は立方格子座標系で作成されたものです

ボクセルのサイズX=Y=Z: 2.1 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.054 / ムービー #1: 0.04
最小 - 最大-0.33342642 - 0.3659016
平均 (標準偏差)9.830587e-13 (±0.025375808)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderZYX
Origin536564
サイズ143124139
Spacing139143124
セルA: 291.9 Å / B: 300.3 Å / C: 260.4 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z2.12.12.1
M x/y/z139143124
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z291.900300.300260.400
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ645365
NX/NY/NZ139143124
MAP C/R/S321
start NC/NR/NS655364
NC/NR/NS124143139
D min/max/mean-0.3330.3660.000

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_23358_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: Structure of E. coli 70S ribosome from EMPIAR-10304...

ファイルemd_23358_additional_1.map
注釈Structure of E. coli 70S ribosome from EMPIAR-10304 at 4.8 Angstrom Resolution
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Structure of E. coli 70S ribosome from EMPIAR-10304...

ファイルemd_23358_half_map_1.map
注釈Structure of E. coli 70S ribosome from EMPIAR-10304 at 4.8 Angstrom Resolution
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Structure of E. coli 70S ribosome from EMPIAR-10304...

ファイルemd_23358_half_map_2.map
注釈Structure of E. coli 70S ribosome from EMPIAR-10304 at 4.8 Angstrom Resolution
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : 70S ribosome

全体名称: 70S ribosome
要素
  • 複合体: 70S ribosome

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超分子 #1: 70S ribosome

超分子名称: 70S ribosome / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
グリッドモデル: Quantifoil / 材質: COPPER / メッシュ: 200
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / デジタル化 - サイズ - 横: 4092 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 5760 pixel / 平均電子線量: 3.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm
試料ステージホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成使用したクラス数: 1 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用したサブトモグラム数: 12914
抽出トモグラム数: 12 / 使用した粒子像数: 12914
最終 3次元分類クラス数: 1
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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