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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-22332 | |||||||||
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タイトル | Phage SPN3US mottled capsid (glutaraldehyde-fixed) | |||||||||
マップデータ | Phage SPN3US glutaraldehyde-fixed mottled capsid | |||||||||
試料 |
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生物種 | Salmonella phage SPN3US (ファージ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 20.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Heymann JB / Wang B / Newcomb WW / Wu W / Winkler DC / Cheng N / Reilly ER / Hsia R-C / Thomas JA / Steven AC | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Viruses / 年: 2020 タイトル: The Mottled Capsid of the Giant Phage SPN3US, a Likely Maturation Intermediate with a Novel Internal Shell. 著者: J Bernard Heymann / Bing Wang / William W Newcomb / Weimin Wu / Dennis C Winkler / Naiqian Cheng / Erin R Reilly / Ru-Ching Hsia / Julie A Thomas / Alasdair C Steven / 要旨: "Giant" phages have genomes of >200 kbp, confined in correspondingly large capsids whose assembly and maturation are still poorly understood. Nevertheless, the first assembly product is likely to be, ..."Giant" phages have genomes of >200 kbp, confined in correspondingly large capsids whose assembly and maturation are still poorly understood. Nevertheless, the first assembly product is likely to be, as in other tailed phages, a procapsid that subsequently matures and packages the DNA. The associated transformations include the cleavage of many proteins by the phage-encoded protease, as well as the thinning and angularization of the capsid. We exploited an amber mutation in the viral protease gene of the giant phage SPN3US, which leads to the accumulation of a population of capsids with distinctive properties. Cryo-electron micrographs reveal patterns of internal density different from those of the DNA-filled heads of virions, leading us to call them "mottled capsids". Reconstructions show an outer shell with T = 27 symmetry, an embellishment of the HK97 prototype composed of the major capsid protein, gp75, which is similar to some other giant viruses. The mottled capsid has a T = 1 inner icosahedral shell that is a complex network of loosely connected densities composed mainly of the ejection proteins gp53 and gp54. Segmentation of this inner shell indicated that a number of densities (~12 per asymmetric unit) adopt a "twisted hook" conformation. Large patches of a proteinaceous tetragonal lattice with a 67 Å repeat were also present in the cell lysate. The unexpected nature of these novel inner shell and lattice structures poses questions as to their functions in virion assembly. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_22332.map.gz | 440.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-22332-v30.xml emd-22332.xml | 18 KB 18 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_22332_fsc.xml | 17.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_22332.png | 223.6 KB | ||
マスクデータ | emd_22332_msk_1.map | 476.8 MB | マスクマップ | |
その他 | emd_22332_half_map_1.map.gz emd_22332_half_map_2.map.gz | 442.2 MB 442.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-22332 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-22332 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_22332.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 476.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Phage SPN3US glutaraldehyde-fixed mottled capsid | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 3.512 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_22332_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half-volume 1
ファイル | emd_22332_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half-volume 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half-volume 2
ファイル | emd_22332_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half-volume 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Salmonella phage SPN3US
全体 | 名称: Salmonella phage SPN3US (ファージ) |
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要素 |
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-超分子 #1: Salmonella phage SPN3US
超分子 | 名称: Salmonella phage SPN3US / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / NCBI-ID: 1090134 / 生物種: Salmonella phage SPN3US / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: OTHER / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No |
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宿主 | 生物種: Salmonella enterica (サルモネラ菌) |
Host system | 生物種: Salmonella enterica (サルモネラ菌) / 組換株: Typhimurium T9079 |
分子量 | 理論値: 364 MDa |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: Capsid / 直径: 1460.0 Å / T番号(三角分割数): 27 |
ウイルス殻 | Shell ID: 2 / 名称: Inner shell / 直径: 1300.0 Å / T番号(三角分割数): 1 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 2 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 |
グリッド | モデル: Homemade / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: LACEY / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING 詳細: Grids were from Ted Pella; Lacey carbon with a thin, continuous carbon film |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: LEICA EM GP |
詳細 | Mottled capsid isolated from a cell lysate and purified using sucrose density gradient centrifugation in the presence of glutaraldehyde. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-100 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2244 / 平均露光時間: 10.0 sec. / 平均電子線量: 29.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 3.1 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 0.57 µm / 倍率(補正後): 28400 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |