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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-21050 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of an active human histone pre-mRNA 3'-end processing machinery at 3.2 Angstrom resolution | |||||||||
![]() | active human histone pre-mRNA 3'-end processing machinery | |||||||||
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![]() | endonuclease / active CPSF73 / U7 snRNP / 3'-end processing / RIBONUCLEASE / RNA BINDING PROTEIN-RNA complex | |||||||||
機能・相同性 | ![]() cytoplasmic U snRNP body / mRNA 3'-end processing by stem-loop binding and cleavage / co-transcriptional mRNA 3'-end processing, cleavage and polyadenylation pathway / Processing of Intronless Pre-mRNAs / 5'-3' RNA exonuclease activity / mRNA cleavage and polyadenylation specificity factor complex / nuclear stress granule / U2 snRNP binding / regulation of chromatin organization / U7 snRNA binding ...cytoplasmic U snRNP body / mRNA 3'-end processing by stem-loop binding and cleavage / co-transcriptional mRNA 3'-end processing, cleavage and polyadenylation pathway / Processing of Intronless Pre-mRNAs / 5'-3' RNA exonuclease activity / mRNA cleavage and polyadenylation specificity factor complex / nuclear stress granule / U2 snRNP binding / regulation of chromatin organization / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / U7 snRNP / histone pre-mRNA 3'end processing complex / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / protein methylation / U12-type spliceosomal complex / 7-methylguanosine cap hypermethylation / U1 snRNP binding / mRNA 3'-end processing / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 3'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ / methylosome / Transport of Mature mRNA Derived from an Intronless Transcript / pICln-Sm protein complex / snRNP binding / small nuclear ribonucleoprotein complex / mRNA 3'-end processing / SMN-Sm protein complex / P granule / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type precatalytic spliceosome / telomerase holoenzyme complex / U2-type spliceosomal complex / telomerase RNA binding / commitment complex / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U4 snRNP / U2 snRNP / RNA Polymerase II Transcription Termination / U1 snRNP / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / spliceosomal complex assembly / mRNA Splicing - Minor Pathway / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / U5 snRNP / bicellular tight junction / positive regulation of G1/S transition of mitotic cell cycle / spliceosomal snRNP assembly / Cajal body / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / negative regulation of protein binding / catalytic step 2 spliceosome / RNA endonuclease activity / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / spliceosomal complex / mRNA splicing, via spliceosome / mRNA processing / snRNP Assembly / SARS-CoV-2 modulates host translation machinery / cytoskeleton / postsynapse / cell adhesion / nuclear body / ribonucleoprotein complex / glutamatergic synapse / enzyme binding / RNA binding / nucleoplasm / metal ion binding / nucleus / membrane / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | |||||||||
![]() | Sun Y / Zhang Y / Walz T / Tong L | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structure of an active human histone pre-mRNA 3'-end processing machinery. 著者: Yadong Sun / Yixiao Zhang / Wei Shen Aik / Xiao-Cui Yang / William F Marzluff / Thomas Walz / Zbigniew Dominski / Liang Tong / ![]() 要旨: The 3'-end processing machinery for metazoan replication-dependent histone precursor messenger RNAs (pre-mRNAs) contains the U7 small nuclear ribonucleoprotein and shares the key cleavage module with ...The 3'-end processing machinery for metazoan replication-dependent histone precursor messenger RNAs (pre-mRNAs) contains the U7 small nuclear ribonucleoprotein and shares the key cleavage module with the canonical cleavage and polyadenylation machinery. We reconstituted an active human histone pre-mRNA processing machinery using 13 recombinant proteins and two RNAs and determined its structure by cryo-electron microscopy. The overall structure is highly asymmetrical and resembles an amphora with one long handle. We captured the pre-mRNA in the active site of the endonuclease, the 73-kilodalton subunit of the cleavage and polyadenylation specificity factor, poised for cleavage. The endonuclease and the entire cleavage module undergo extensive rearrangements for activation, triggered through the recognition of the duplex between the authentic pre-mRNA and U7 small nuclear RNA (snRNA). Our study also has notable implications for understanding canonical and snRNA 3'-end processing. | |||||||||
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
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-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 133.2 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 30.2 KB 30.2 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 138.9 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 9.3 KB | ||
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-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 544 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 543.6 KB | 表示 | |
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CIF形式データ | ![]() | 7.6 KB | 表示 | |
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-関連構造データ
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リンク
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
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注釈 | active human histone pre-mRNA 3'-end processing machinery | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.07 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
+全体 : The core of metazoan replication-dependent histone pre-mRNA 3'-en...
+超分子 #1: The core of metazoan replication-dependent histone pre-mRNA 3'-en...
+分子 #1: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D3
+分子 #2: Small nuclear ribonucleoprotein-associated proteins B and B'
+分子 #3: Small nuclear ribonucleoprotein F
+分子 #4: Small nuclear ribonucleoprotein E
+分子 #5: Small nuclear ribonucleoprotein G
+分子 #6: U7 snRNA-associated Sm-like protein LSm10
+分子 #7: U7 snRNA-associated Sm-like protein LSm11
+分子 #8: Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 3
+分子 #9: Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 2
+分子 #10: Symplekin
+分子 #11: U7 snRNA
+分子 #12: modified H2a pre-mRNA
+分子 #13: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.3 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 / 構成要素 - 濃度: 100.0 mM / 構成要素 - 式: NaCl / 構成要素 - 名称: sodium chloride |
グリッド | 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 詳細: unspecified |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | #0 - Image recording ID: 1 #0 - フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) #0 - 検出モード: COUNTING / #0 - 平均電子線量: 70.0 e/Å2 / #1 - Image recording ID: 2 #1 - フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) #1 - 平均電子線量: 73.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm 最大 デフォーカス(補正後): 2.8000000000000003 µm 最小 デフォーカス(補正後): 0.9 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 倍率(公称値): 22500 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |