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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-2088 | |||||||||
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タイトル | Structures from COPI-coated vesicles: paired two-corner connection | |||||||||
マップデータ | Reconstruction of a paired two-corner connection | |||||||||
試料 |
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キーワード | COPI-coated vesicles / subtomogram averaging / membrane trafficking / protein coat / coatomer / COPI | |||||||||
生物種 | unidentified (未定義) / Mus musculus (ハツカネズミ) / Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 34.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Faini M / Prinz S / Beck R / Schorb M / Riches JD / Bacia K / Brugger B / Wieland FT / Briggs JAG | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2012 タイトル: The structures of COPI-coated vesicles reveal alternate coatomer conformations and interactions. 著者: Marco Faini / Simone Prinz / Rainer Beck / Martin Schorb / James D Riches / Kirsten Bacia / Britta Brügger / Felix T Wieland / John A G Briggs / 要旨: Transport between compartments of eukaryotic cells is mediated by coated vesicles. The archetypal protein coats COPI, COPII, and clathrin are conserved from yeast to human. Structural studies of ...Transport between compartments of eukaryotic cells is mediated by coated vesicles. The archetypal protein coats COPI, COPII, and clathrin are conserved from yeast to human. Structural studies of COPII and clathrin coats assembled in vitro without membranes suggest that coat components assemble regular cages with the same set of interactions between components. Detailed three-dimensional structures of coated membrane vesicles have not been obtained. Here, we solved the structures of individual COPI-coated membrane vesicles by cryoelectron tomography and subtomogram averaging of in vitro reconstituted budding reactions. The coat protein complex, coatomer, was observed to adopt alternative conformations to change the number of other coatomers with which it interacts and to form vesicles with variable sizes and shapes. This represents a fundamentally different basis for vesicle coat assembly. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_2088.map.gz | 2.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-2088-v30.xml emd-2088.xml | 10.8 KB 10.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_2088.tif | 241.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2088 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2088 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_2088_validation.pdf.gz | 214.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_2088_full_validation.pdf.gz | 213.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_2088_validation.xml.gz | 4.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2088 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2088 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_2088.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 10.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Reconstruction of a paired two-corner connection | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.94 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : paired two-corner connection
全体 | 名称: paired two-corner connection |
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要素 |
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-超分子 #1000: paired two-corner connection
超分子 | 名称: paired two-corner connection / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 3 |
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-超分子 #1: liposome membrane
超分子 | 名称: liposome membrane / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: unidentified (未定義) |
-分子 #1: Coatomer complex
分子 | 名称: Coatomer complex / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: COPI / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) / 別称: Mouse |
分子量 | 理論値: 560 KDa |
組換発現 | 生物種: unidentified baculovirus (ウイルス) |
-分子 #2: Arf1
分子 | 名称: Arf1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 別称: Baker's Yeast |
分子量 | 理論値: 20 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 50mM Hepes , 50 mM KOAc, 1 mM MgCl2 |
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グリッド | 詳細: 300 mesh copper grid with holey carbon support, glow discharged |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 90 K / 装置: OTHER / 手法: Hand plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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温度 | 最低: 90 K |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: Gatan GIF 2000 |
日付 | 2011年5月6日 |
撮影 | カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: GENERIC CCD / 平均電子線量: 60 e/Å2 / ビット/ピクセル: 16 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.3 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.3 µm / 倍率(公称値): 27500 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN / Tilt series - Axis1 - Min angle: -60 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 60 ° |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | CTF correction was performed. Average number of tilts used in the 3D reconstructions: 41. Average tomographic tilt angle increment: 3. |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 34.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: IMOD, TOM, package, Matlab |
CTF補正 | 詳細: CTF multiplication |