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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-2057 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of HBV T=4 empty Cp183 capsid | |||||||||
マップデータ | Reconstruction of HBV T=4 empty Cp183 capsid | |||||||||
試料 |
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キーワード | HBV / Cp183 | |||||||||
生物種 | Hepatitis B virus (B 型肝炎ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Wang JC-Y / Dhasan RS / Zlotnick A | |||||||||
引用 | ジャーナル: PLoS Pathog / 年: 2012 タイトル: Structural organization of pregenomic RNA and the carboxy-terminal domain of the capsid protein of hepatitis B virus. 著者: Joseph C-Y Wang / Mary S Dhason / Adam Zlotnick / 要旨: The Hepatitis B Virus (HBV) double-stranded DNA genome is reverse transcribed from its RNA pregenome (pgRNA) within the virus core (or capsid). Phosphorylation of the arginine-rich carboxy-terminal ...The Hepatitis B Virus (HBV) double-stranded DNA genome is reverse transcribed from its RNA pregenome (pgRNA) within the virus core (or capsid). Phosphorylation of the arginine-rich carboxy-terminal domain (CTD) of the HBV capsid protein (Cp183) is essential for pgRNA encapsidation and reverse transcription. However, the structure of the CTD remains poorly defined. Here we report sub-nanometer resolution cryo-EM structures of in vitro assembled empty and pgRNA-filled Cp183 capsids in unphosphorylated and phosphorylation-mimic states. In empty capsids, we found unexpected evidence of surface accessible CTD density partially occluding pores in the capsid surface. We also observed that CTD organization changed substantively as a function of phosphorylation. In RNA-filled capsids, unphosphorylated CTDs favored thick ropes of RNA, while the phosphorylation-mimic favored a mesh of thin, high-density strands suggestive of single stranded RNA. These results demonstrate that the CTD can regulate nucleic acid structure, supporting the hypothesis that the HBV capsid has a functional role as a nucleic acid chaperone. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_2057.map.gz | 17.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-2057-v30.xml emd-2057.xml | 11 KB 11 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_2057.jpg | 312.7 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2057 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2057 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_2057_validation.pdf.gz | 239.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_2057_full_validation.pdf.gz | 238.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_2057_validation.xml.gz | 6.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2057 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2057 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_2057.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 101.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Reconstruction of HBV T=4 empty Cp183 capsid | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.4836 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : HBV T=4 empty Cp183 capsid
全体 | 名称: HBV T=4 empty Cp183 capsid |
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要素 |
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-超分子 #1000: HBV T=4 empty Cp183 capsid
超分子 | 名称: HBV T=4 empty Cp183 capsid / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1 |
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分子量 | 実験値: 5 MDa / 理論値: 5 MDa |
-超分子 #1: Hepatitis B virus
超分子 | 名称: Hepatitis B virus / タイプ: virus / ID: 1 / Name.synonym: HBV Cp183 詳細: Reassembled HBV T=4 empty Cp183 capsid (from E. coli) NCBI-ID: 10407 / 生物種: Hepatitis B virus / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: Yes / ウイルス・中空状態: Yes / Syn species name: HBV Cp183 |
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宿主 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: VERTEBRATES |
分子量 | 実験値: 5 MDa / 理論値: 5 MDa |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: Cp183 / T番号(三角分割数): 4 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.24 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 250 mM NaCl, 50 mM HEPES, 2 mM DTT |
グリッド | 詳細: Quantifoil R 2/2 holey carbon 200 mesh copper grids |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III / 手法: Blot for 4 seconds before plunging |
-電子顕微鏡法 #1
Microscopy ID | 1 |
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顕微鏡 | JEOL 3200FS |
温度 | 平均: 97 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: objective lens astigmatism was corrected at 80,000 times magnification |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: Omega filter |
日付 | 2010年12月17日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 実像数: 594 / 平均電子線量: 14 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 1.1 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.1 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.16 µm / 倍率(公称値): 80000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Side entry liquid nitrogen-cooled cryo specimen holder 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-電子顕微鏡法 #2
Microscopy ID | 2 |
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顕微鏡 | JEOL 3200FS |
温度 | 平均: 97 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: objective lens astigmatism was corrected at 80,000 times magnification |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: Omega filter |
日付 | 2011年2月15日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 実像数: 594 / 平均電子線量: 14 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 1.1 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.1 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.16 µm / 倍率(公称値): 80000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Side entry liquid nitrogen-cooled cryo specimen holder 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: Each particle phase-flipping |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 5.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Auto3dem / 使用した粒子像数: 27489 |