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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-19722 | |||||||||
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タイトル | RNA polymerase II initially transcribing complex with an ordered RNA of 10 nt | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | RNA polymerase II / promoter escape / de novo initiation / TRANSCRIPTION | |||||||||
生物種 | Sus scrofa (ブタ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Zhan Y / Grabbe F / Oberbeckmann E / Dienemann C / Cramer P | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2024 タイトル: Three-step mechanism of promoter escape by RNA polymerase II. 著者: Yumeng Zhan / Frauke Grabbe / Elisa Oberbeckmann / Christian Dienemann / Patrick Cramer / 要旨: The transition from transcription initiation to elongation is highly regulated in human cells but remains incompletely understood at the structural level. In particular, it is unclear how ...The transition from transcription initiation to elongation is highly regulated in human cells but remains incompletely understood at the structural level. In particular, it is unclear how interactions between RNA polymerase II (RNA Pol II) and initiation factors are broken to enable promoter escape. Here, we reconstitute RNA Pol II promoter escape in vitro and determine high-resolution structures of initially transcribing complexes containing 8-, 10-, and 12-nt ordered RNAs and two elongation complexes containing 14-nt RNAs. We suggest that promoter escape occurs in three major steps. First, the growing RNA displaces the B-reader element of the initiation factor TFIIB without evicting TFIIB. Second, the rewinding of the transcription bubble coincides with the eviction of TFIIA, TFIIB, and TBP. Third, the binding of DSIF and NELF facilitates TFIIE and TFIIH dissociation, establishing the paused elongation complex. This three-step model for promoter escape fills a gap in our understanding of the initiation-elongation transition of RNA Pol II transcription. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_19722.map.gz | 140.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-19722-v30.xml emd-19722.xml | 12.3 KB 12.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_19722.png | 110.9 KB | ||
マスクデータ | emd_19722_msk_1.map | 244.1 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-19722.cif.gz | 3.7 KB | ||
その他 | emd_19722_half_map_1.map.gz emd_19722_half_map_2.map.gz | 194.2 MB 194.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-19722 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-19722 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_19722_validation.pdf.gz | 942.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_19722_full_validation.pdf.gz | 942.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_19722_validation.xml.gz | 15.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_19722_validation.cif.gz | 18.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-19722 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-19722 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_19722.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.05 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_19722_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_19722_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_19722_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : mammalian RNA polymerase II general transcription factor IIA gene...
全体 | 名称: mammalian RNA polymerase II general transcription factor IIA general transcription factor IIB general transcription factor IIE general transcription factor IIF general transcription factor ...名称: mammalian RNA polymerase II general transcription factor IIA general transcription factor IIB general transcription factor IIE general transcription factor IIF general transcription factor IIH TATA-box binding protein DNA |
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要素 |
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-超分子 #1: mammalian RNA polymerase II general transcription factor IIA gene...
超分子 | 名称: mammalian RNA polymerase II general transcription factor IIA general transcription factor IIB general transcription factor IIE general transcription factor IIF general transcription factor ...名称: mammalian RNA polymerase II general transcription factor IIA general transcription factor IIB general transcription factor IIE general transcription factor IIF general transcription factor IIH TATA-box binding protein DNA タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
-超分子 #2: RNA polymerase II
超分子 | 名称: RNA polymerase II / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.7 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: EMDB MAP EMDB ID: |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 27543 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |