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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-16896 | ||||||||||||
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タイトル | 39S mammalian mitochondrial large ribosomal subunit with mtRF1 and P-site tRNA | ||||||||||||
マップデータ | 39S mammalian mitochondrial large ribosomal subunit with mtRF1 and P-site tRNA | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | mammalian mitochondrial ribosome / release factor mtRF1 / non-canonical stop codon / RIBOSOME | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / translation release factor activity / mitochondrial translational termination / mitochondrial translational elongation / translation release factor activity, codon nonspecific / ribonuclease III activity / microprocessor complex / translation release factor activity, codon specific / ribosomal subunit ...Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / translation release factor activity / mitochondrial translational termination / mitochondrial translational elongation / translation release factor activity, codon nonspecific / ribonuclease III activity / microprocessor complex / translation release factor activity, codon specific / ribosomal subunit / Mitochondrial protein degradation / mitochondrial large ribosomal subunit / peptidyl-tRNA hydrolase / mitochondrial ribosome / mitochondrial translation / aminoacyl-tRNA hydrolase activity / organelle membrane / RNA processing / rescue of stalled ribosome / cellular response to leukemia inhibitory factor / double-stranded RNA binding / large ribosomal subunit / cell junction / negative regulation of translation / nuclear body / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / protein domain specific binding / mRNA binding / nucleotide binding / synapse / mitochondrion / RNA binding / nucleoplasm / nucleus / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Sus scrofa (ブタ) / Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Saurer M / Leibundgut M / Scaiola A / Schoenhut T / Ban N | ||||||||||||
資金援助 | スイス, European Union, 3件
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引用 | ジャーナル: Science / 年: 2023 タイトル: Molecular basis of translation termination at noncanonical stop codons in human mitochondria. 著者: Martin Saurer / Marc Leibundgut / Hima Priyanka Nadimpalli / Alain Scaiola / Tanja Schönhut / Richard G Lee / Stefan J Siira / Oliver Rackham / René Dreos / Tea Lenarčič / Eva Kummer / ...著者: Martin Saurer / Marc Leibundgut / Hima Priyanka Nadimpalli / Alain Scaiola / Tanja Schönhut / Richard G Lee / Stefan J Siira / Oliver Rackham / René Dreos / Tea Lenarčič / Eva Kummer / David Gatfield / Aleksandra Filipovska / Nenad Ban / 要旨: The genetic code that specifies the identity of amino acids incorporated into proteins during protein synthesis is almost universally conserved. Mitochondrial genomes feature deviations from the ...The genetic code that specifies the identity of amino acids incorporated into proteins during protein synthesis is almost universally conserved. Mitochondrial genomes feature deviations from the standard genetic code, including the reassignment of two arginine codons to stop codons. The protein required for translation termination at these noncanonical stop codons to release the newly synthesized polypeptides is not currently known. In this study, we used gene editing and ribosomal profiling in combination with cryo-electron microscopy to establish that mitochondrial release factor 1 (mtRF1) detects noncanonical stop codons in human mitochondria by a previously unknown mechanism of codon recognition. We discovered that binding of mtRF1 to the decoding center of the ribosome stabilizes a highly unusual conformation in the messenger RNA in which the ribosomal RNA participates in specific recognition of the noncanonical stop codons. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_16896.map.gz | 450.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-16896-v30.xml emd-16896.xml | 86.9 KB 86.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_16896_fsc.xml | 16.6 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_16896.png | 195.1 KB | ||
Filedesc metadata | emd-16896.cif.gz | 18.9 KB | ||
その他 | emd_16896_half_map_1.map.gz emd_16896_half_map_2.map.gz | 443 MB 443 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16896 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16896 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_16896_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_16896_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_16896_validation.xml.gz | 26 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_16896_validation.cif.gz | 34.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16896 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16896 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_16896.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 476.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | 39S mammalian mitochondrial large ribosomal subunit with mtRF1 and P-site tRNA | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.065 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: half map A
ファイル | emd_16896_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map B
ファイル | emd_16896_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half map B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : 39S mammalian mitochondrial ribosome with mtRF1 and P-site tRNAMet
+超分子 #1: 39S mammalian mitochondrial ribosome with mtRF1 and P-site tRNAMet
+分子 #1: Mitochondrial ribosomal protein L12
+分子 #5: Large ribosomal subunit protein uL22m
+分子 #6: 39S ribosomal protein L23, mitochondrial
+分子 #7: uL24m
+分子 #8: 39S ribosomal protein L27, mitochondrial
+分子 #9: Mitochondrial ribosomal protein L28
+分子 #10: Mitochondrial ribosomal protein L47
+分子 #11: Large ribosomal subunit protein uL30m
+分子 #12: Mitochondrial ribosomal protein L32
+分子 #13: Large ribosomal subunit protein bL33m
+分子 #14: Large ribosomal subunit protein bL34m
+分子 #15: 39S ribosomal protein L35, mitochondrial
+分子 #16: Mitochondrial ribosomal protein L2
+分子 #17: ICT1
+分子 #18: Mitochondrial ribosomal protein L4
+分子 #19: Mitochondrial ribosomal protein L9
+分子 #20: Mitochondrial ribosomal protein L10
+分子 #21: Mitochondrial ribosomal protein L11
+分子 #22: 39S ribosomal protein L13, mitochondrial
+分子 #23: Mitochondrial ribosomal protein L14
+分子 #24: 39S ribosomal protein L15, mitochondrial
+分子 #25: uL16m
+分子 #26: bL17m
+分子 #27: Mitochondrial ribosomal protein L18
+分子 #28: 39S ribosomal protein L19, mitochondrial
+分子 #29: Mitochondrial ribosomal protein L20
+分子 #30: Mitochondrial ribosomal protein L21
+分子 #31: 39S ribosomal protein L52, mitochondrial
+分子 #32: Mitochondrial ribosomal protein L53
+分子 #33: mL54
+分子 #34: Mitochondrial ribosomal protein L55
+分子 #35: Mitochondrial ribosomal protein L57
+分子 #36: mL62 (ICT1)
+分子 #37: mL64
+分子 #38: Mitochondrial ribosomal protein S18A
+分子 #39: 39S ribosomal protein S30, mitochondrial
+分子 #40: 39S ribosomal protein L1, mitochondrial
+分子 #41: Ribosomal protein
+分子 #42: Mitochondrial ribosomal protein L37
+分子 #43: Mitochondrial ribosomal protein L38
+分子 #44: Mitochondrial ribosomal protein L39
+分子 #45: Mitochondrial ribosomal protein L40
+分子 #46: 39S ribosomal protein L41, mitochondrial
+分子 #47: mL42
+分子 #48: Large ribosomal subunit protein mL43
+分子 #49: mL44
+分子 #50: Mitochondrial ribosomal protein L45
+分子 #51: Mitochondrial ribosomal protein L46
+分子 #52: 39S ribosomal protein L48, mitochondrial
+分子 #53: 39S ribosomal protein L49, mitochondrial
+分子 #54: Mitochondrial ribosomal protein L50
+分子 #55: Large ribosomal subunit protein mL51
+分子 #57: Peptide chain release factor 1, mitochondrial
+分子 #2: E-site tRNA
+分子 #3: 16S rRNA
+分子 #4: CP Phe-tRNA
+分子 #56: P-site Met-tRNA(fMet)
+分子 #58: MAGNESIUM ION
+分子 #59: POTASSIUM ION
+分子 #60: PHENYLALANINE
+分子 #61: ZINC ION
+分子 #62: FE2/S2 (INORGANIC) CLUSTER
+分子 #63: N-FORMYLMETHIONINE
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: 20mM HEPES-KOH pH=7.5, 100mM KCl, 20mM MgCl2, ~1% sucrose (from mtRF1 storage buffer) | ||||||||||||
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / 支持フィルム - #0 - Film type ID: 1 / 支持フィルム - #0 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #0 - トポロジー: HOLEY / 支持フィルム - #1 - Film type ID: 2 / 支持フィルム - #1 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #1 - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV | ||||||||||||
詳細 | In vitro reconstituted complex (55S). Focused refinement on large subunit. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 6973 / 平均電子線量: 60.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT | ||||||||||||
得られたモデル | PDB-8oiq: |