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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-2914 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM reconstruction of the mammalian 55S mitoribosome | |||||||||
![]() | Reconstruction of the 55S mammalian mitoribosome | |||||||||
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![]() | mammalian mitochondrial ribosome / 55S mitoribosome / translation / ribosomal proteins / rRNA / tRNA / mRNA / decoding / exit tunnel | |||||||||
機能・相同性 | ![]() Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / rRNA import into mitochondrion / mitochondrial translational termination / mitochondrial ribosome assembly / mitochondrial translational elongation / ribonuclease III activity / translation release factor activity, codon nonspecific / Mitochondrial protein degradation / mitochondrial large ribosomal subunit ...Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / rRNA import into mitochondrion / mitochondrial translational termination / mitochondrial ribosome assembly / mitochondrial translational elongation / ribonuclease III activity / translation release factor activity, codon nonspecific / Mitochondrial protein degradation / mitochondrial large ribosomal subunit / peptidyl-tRNA hydrolase / mitochondrial ribosome / mitochondrial small ribosomal subunit / peptidyl-tRNA hydrolase activity / mitochondrial translation / organelle membrane / ribosomal small subunit binding / RNA processing / cell junction / regulation of translation / large ribosomal subunit / double-stranded RNA binding / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / rRNA binding / nuclear body / ribosome / structural constituent of ribosome / protein domain specific binding / translation / ribonucleoprotein complex / intracellular membrane-bounded organelle / mitochondrion / RNA binding / nucleoplasm / nucleus / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | |||||||||
![]() | Greber BJ / Bieri P / Leibundgut M / Leitner A / Aebersold R / Boehringer D / Ban N | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Ribosome. The complete structure of the 55S mammalian mitochondrial ribosome. 著者: Basil J Greber / Philipp Bieri / Marc Leibundgut / Alexander Leitner / Ruedi Aebersold / Daniel Boehringer / Nenad Ban / ![]() 要旨: Mammalian mitochondrial ribosomes (mitoribosomes) synthesize mitochondrially encoded membrane proteins that are critical for mitochondrial function. Here we present the complete atomic structure of ...Mammalian mitochondrial ribosomes (mitoribosomes) synthesize mitochondrially encoded membrane proteins that are critical for mitochondrial function. Here we present the complete atomic structure of the porcine 55S mitoribosome at 3.8 angstrom resolution by cryo-electron microscopy and chemical cross-linking/mass spectrometry. The structure of the 28S subunit in the complex was resolved at 3.6 angstrom resolution by focused alignment, which allowed building of a detailed atomic structure including all of its 15 mitoribosomal-specific proteins. The structure reveals the intersubunit contacts in the 55S mitoribosome, the molecular architecture of the mitoribosomal messenger RNA (mRNA) binding channel and its interaction with transfer RNAs, and provides insight into the highly specialized mechanism of mRNA recruitment to the 28S subunit. Furthermore, the structure contributes to a mechanistic understanding of aminoglycoside ototoxicity. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 14.2 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 12.7 KB 12.7 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 360.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
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注釈 | Reconstruction of the 55S mammalian mitoribosome | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.39 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : 55S mammalian mitochondrial ribosome
全体 | 名称: 55S mammalian mitochondrial ribosome |
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要素 |
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-超分子 #1000: 55S mammalian mitochondrial ribosome
超分子 | 名称: 55S mammalian mitochondrial ribosome / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: monomer / Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 2.7 MDa |
-超分子 #1: 28S small subunit of the mitochondrial ribosome
超分子 | 名称: 28S small subunit of the mitochondrial ribosome / タイプ: complex / ID: 1 / 組換発現: No Ribosome-details: ribosome-eukaryote: SSU mitochondrial 28S, SSU mitochondrial RNA 12S |
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Ref GO | 0: GO:0005761 |
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 1.1 MDa |
-超分子 #2: 39S large subunit of the mitochondrial ribosome
超分子 | 名称: 39S large subunit of the mitochondrial ribosome / タイプ: complex / ID: 2 / 組換発現: No Ribosome-details: ribosome-eukaryote: LSU mitochondrial 39S, LSU mitochondrial RNA 16S |
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Ref GO | 0: GO:0005761 |
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 1.6 MDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 20 mM HEPES-KOH, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 40 mM MgCl2 |
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グリッド | 詳細: 200 mesh Quantifoil R 2/2 holey carbon grids with a thin continuous carbon support film applied |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE MIXTURE / 装置: HOMEMADE PLUNGER |
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電子顕微鏡法 #1
Microscopy ID | 1 |
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顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
詳細 | movie mode readout in FEI EPU: 7 frames per exposure |
日付 | 2014年5月3日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 14 µm / 平均電子線量: 20 e/Å2 詳細: movie mode readout in FEI EPU: 7 frames per exposure |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 倍率(補正後): 100720 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 59000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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電子顕微鏡法 #2
Microscopy ID | 2 |
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顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
詳細 | movie mode readout in FEI EPU: 7 frames per exposure |
日付 | 2014年5月30日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 14 µm / 平均電子線量: 20 e/Å2 詳細: movie mode readout in FEI EPU: 7 frames per exposure |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 倍率(補正後): 100720 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 59000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
詳細 | Particles were selected in batchboxer (EMAN 1.9) and extracted using RELION 1.2. |
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CTF補正 | 詳細: per detector frame |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: CTFFIND3, RELION, 1.2, 1.3 / 使用した粒子像数: 60872 |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: |
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ソフトウェア | 名称: ![]() |
詳細 | The coordinate model of the 39S subunit was fitted into the cryo-EM density using Chimera. The model was then adjusted using COOT (RNA) and O (proteins). |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
得られたモデル | ![]() PDB-5aj4: |