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- EMDB-14334: Structure of the human CCAN CENP-A alpha-satellite complex -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-14334
タイトルStructure of the human CCAN CENP-A alpha-satellite complex
マップデータ
試料
  • 複合体: Human CCAN complex with bound alpha-satellite DNA
    • タンパク質・ペプチド: Histone H3-like centromeric protein A
    • タンパク質・ペプチド: Histone H4
    • タンパク質・ペプチド: Histone H2A type 1-C
    • タンパク質・ペプチド: Histone H2B type 1-C/E/F/G/I
    • DNA: DNA (171-MER)
    • DNA: DNA (171-MER)
    • タンパク質・ペプチド: Centromere protein C
キーワードChromosome / kinetochore / cell division / centromere / CELL CYCLE
機能・相同性
機能・相同性情報


spindle attachment to meiosis I kinetochore / centromeric DNA binding / CENP-A containing chromatin assembly / protein localization to chromosome, centromeric region / kinetochore assembly / attachment of mitotic spindle microtubules to kinetochore / inner kinetochore / condensed chromosome, centromeric region / establishment of mitotic spindle orientation / mitotic cytokinesis ...spindle attachment to meiosis I kinetochore / centromeric DNA binding / CENP-A containing chromatin assembly / protein localization to chromosome, centromeric region / kinetochore assembly / attachment of mitotic spindle microtubules to kinetochore / inner kinetochore / condensed chromosome, centromeric region / establishment of mitotic spindle orientation / mitotic cytokinesis / chromosome, centromeric region / negative regulation of megakaryocyte differentiation / protein localization to CENP-A containing chromatin / Amplification of signal from unattached kinetochores via a MAD2 inhibitory signal / pericentric heterochromatin / Replacement of protamines by nucleosomes in the male pronucleus / CENP-A containing nucleosome / Packaging Of Telomere Ends / Mitotic Prometaphase / EML4 and NUDC in mitotic spindle formation / Recognition and association of DNA glycosylase with site containing an affected purine / Cleavage of the damaged purine / Deposition of new CENPA-containing nucleosomes at the centromere / nucleosomal DNA binding / Recognition and association of DNA glycosylase with site containing an affected pyrimidine / Cleavage of the damaged pyrimidine / Inhibition of DNA recombination at telomere / Resolution of Sister Chromatid Cohesion / telomere organization / Meiotic synapsis / RNA Polymerase I Promoter Opening / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / SUMOylation of chromatin organization proteins / Regulation of endogenous retroelements by the Human Silencing Hub (HUSH) complex / DNA methylation / Condensation of Prophase Chromosomes / SIRT1 negatively regulates rRNA expression / Chromatin modifications during the maternal to zygotic transition (MZT) / ERCC6 (CSB) and EHMT2 (G9a) positively regulate rRNA expression / HCMV Late Events / innate immune response in mucosa / PRC2 methylates histones and DNA / Regulation of endogenous retroelements by KRAB-ZFP proteins / Defective pyroptosis / chromosome segregation / Regulation of endogenous retroelements by Piwi-interacting RNAs (piRNAs) / HDACs deacetylate histones / Nonhomologous End-Joining (NHEJ) / RHO GTPases Activate Formins / RNA Polymerase I Promoter Escape / Transcriptional regulation by small RNAs / Formation of the beta-catenin:TCF transactivating complex / RUNX1 regulates genes involved in megakaryocyte differentiation and platelet function / NoRC negatively regulates rRNA expression / Activated PKN1 stimulates transcription of AR (androgen receptor) regulated genes KLK2 and KLK3 / G2/M DNA damage checkpoint / HDMs demethylate histones / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / DNA Damage/Telomere Stress Induced Senescence / heterochromatin formation / PKMTs methylate histone lysines / Metalloprotease DUBs / Meiotic recombination / kinetochore / Pre-NOTCH Transcription and Translation / RMTs methylate histone arginines / Activation of anterior HOX genes in hindbrain development during early embryogenesis / HCMV Early Events / Transcriptional regulation of granulopoiesis / structural constituent of chromatin / Separation of Sister Chromatids / UCH proteinases / antimicrobial humoral immune response mediated by antimicrobial peptide / nucleosome / nucleosome assembly / E3 ubiquitin ligases ubiquitinate target proteins / antibacterial humoral response / Recruitment and ATM-mediated phosphorylation of repair and signaling proteins at DNA double strand breaks / chromatin organization / mitotic cell cycle / RUNX1 regulates transcription of genes involved in differentiation of HSCs / HATs acetylate histones / Processing of DNA double-strand break ends / midbody / Senescence-Associated Secretory Phenotype (SASP) / Oxidative Stress Induced Senescence / Estrogen-dependent gene expression / chromosome, telomeric region / nuclear body / Ub-specific processing proteases / defense response to Gram-positive bacterium / protein heterodimerization activity / Amyloid fiber formation / negative regulation of cell population proliferation / cell division / chromatin binding / protein-containing complex / DNA binding / RNA binding / extracellular space
類似検索 - 分子機能
CENP-C, middle DNMT3B-binding domain / Centromere assembly component CENP-C middle DNMT3B-binding region / Kinetochore assembly subunit CENP-C, N-terminal domain / Kinetochore assembly subunit CENP-C N-terminal / Mif2/CENP-C cupin domain / Centromere protein C/Mif2/cnp3 / Mif2/CENP-C like / RmlC-like cupin domain superfamily / Histone H2B signature. / Histone H2B ...CENP-C, middle DNMT3B-binding domain / Centromere assembly component CENP-C middle DNMT3B-binding region / Kinetochore assembly subunit CENP-C, N-terminal domain / Kinetochore assembly subunit CENP-C N-terminal / Mif2/CENP-C cupin domain / Centromere protein C/Mif2/cnp3 / Mif2/CENP-C like / RmlC-like cupin domain superfamily / Histone H2B signature. / Histone H2B / Histone H2B / Histone H2A conserved site / Histone H2A signature. / Histone H2A, C-terminal domain / C-terminus of histone H2A / Histone H4, conserved site / Histone H4 signature. / Histone H4 / Histone H4 / RmlC-like jelly roll fold / Histone H2A / Histone 2A / CENP-T/Histone H4, histone fold / Centromere kinetochore component CENP-T histone fold / TATA box binding protein associated factor / TATA box binding protein associated factor (TAF), histone-like fold domain / Histone H3 signature 2. / Histone H3 / Histone H3/CENP-A / Histone H2A/H2B/H3 / Core histone H2A/H2B/H3/H4 / Histone-fold
類似検索 - ドメイン・相同性
Histone H3-like centromeric protein A / Histone H4 / Histone H2B type 1-C/E/F/G/I / Centromere protein C / Histone H2A type 1-C
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.44 Å
データ登録者Yatskevich S / Muir KW
資金援助 英国, ドイツ, 3件
OrganizationGrant number
Cancer Research UK 英国
Boehringer Ingelheim Fonds (BIF) ドイツ
Medical Research Council (MRC, United Kingdom) 英国
引用ジャーナル: Science / : 2022
タイトル: Structure of the human inner kinetochore bound to a centromeric CENP-A nucleosome.
著者: Stanislau Yatskevich / Kyle W Muir / Dom Bellini / Ziguo Zhang / Jing Yang / Thomas Tischer / Masa Predin / Tom Dendooven / Stephen H McLaughlin / David Barford /
要旨: Kinetochores assemble onto specialized centromeric CENP-A (centromere protein A) nucleosomes (CENP-A) to mediate attachments between chromosomes and the mitotic spindle. We describe cryo-electron ...Kinetochores assemble onto specialized centromeric CENP-A (centromere protein A) nucleosomes (CENP-A) to mediate attachments between chromosomes and the mitotic spindle. We describe cryo-electron microscopy structures of the human inner kinetochore constitutive centromere associated network (CCAN) complex bound to CENP-A reconstituted onto α-satellite DNA. CCAN forms edge-on contacts with CENP-A, and a linker DNA segment of the α-satellite repeat emerges from the fully wrapped end of the nucleosome to thread through the central CENP-LN channel that tightly grips the DNA. The CENP-TWSX histone-fold module further augments DNA binding and partially wraps the linker DNA in a manner reminiscent of canonical nucleosomes. Our study suggests that the topological entrapment of the linker DNA by CCAN provides a robust mechanism by which kinetochores withstand both pushing and pulling forces exerted by the mitotic spindle.
履歴
登録2022年2月11日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年4月27日-
マップ公開2022年4月27日-
更新2024年7月17日-
現状2024年7月17日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_14334.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

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その他
Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.85 Å/pix.
x 360 pix.
= 307.08 Å
0.85 Å/pix.
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= 307.08 Å
0.85 Å/pix.
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= 307.08 Å

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投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

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画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.853 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.2
最小 - 最大-1.2446439 - 2.8596215
平均 (標準偏差)-0.0008152532 (±0.049154703)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ360360360
Spacing360360360
セルA=B=C: 307.08 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Human CCAN complex with bound alpha-satellite DNA

全体名称: Human CCAN complex with bound alpha-satellite DNA
要素
  • 複合体: Human CCAN complex with bound alpha-satellite DNA
    • タンパク質・ペプチド: Histone H3-like centromeric protein A
    • タンパク質・ペプチド: Histone H4
    • タンパク質・ペプチド: Histone H2A type 1-C
    • タンパク質・ペプチド: Histone H2B type 1-C/E/F/G/I
    • DNA: DNA (171-MER)
    • DNA: DNA (171-MER)
    • タンパク質・ペプチド: Centromere protein C

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超分子 #1: Human CCAN complex with bound alpha-satellite DNA

超分子名称: Human CCAN complex with bound alpha-satellite DNA / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#7

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分子 #1: Histone H3-like centromeric protein A

分子名称: Histone H3-like centromeric protein A / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 16.02363 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MGPRRRSRKP EAPRRRSPSP TPTPGPSRRG PSLGASSHQH SRRRQGWLKE IRKLQKSTHL LIRKLPFSRL AREICVKFTR GVDFNWQAQ ALLALQEAAE AFLVHLFEDA YLLTLHAGRV TLFPKDVQLA RRIRGLEEGL G

UniProtKB: Histone H3-like centromeric protein A

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分子 #2: Histone H4

分子名称: Histone H4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 11.394426 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MSGRGKGGKG LGKGGAKRHR KVLRDNIQGI TKPAIRRLAR RGGVKRISGL IYEETRGVLK VFLENVIRDA VTYTEHAKRK TVTAMDVVY ALKRQGRTLY GFGG

UniProtKB: Histone H4

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分子 #3: Histone H2A type 1-C

分子名称: Histone H2A type 1-C / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 14.135523 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MSGRGKQGGK ARAKAKSRSS RAGLQFPVGR VHRLLRKGNY AERVGAGAPV YLAAVLEYLT AEILELAGNA ARDNKKTRII PRHLQLAIR NDEELNKLLG RVTIAQGGVL PNIQAVLLPK KTESHHKAKG K

UniProtKB: Histone H2A type 1-C

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分子 #4: Histone H2B type 1-C/E/F/G/I

分子名称: Histone H2B type 1-C/E/F/G/I / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 13.937213 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MPEPAKSAPA PKKGSKKAVT KAQKKDGKKR KRSRKESYSV YVYKVLKQVH PDTGISSKAM GIMNSFVNDI FERIAGEASR LAHYNKRST ITSREIQTAV RLLLPGELAK HAVSEGTKAV TKYTSSK

UniProtKB: Histone H2B type 1-C/E/F/G/I

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分子 #7: Centromere protein C

分子名称: Centromere protein C / タイプ: protein_or_peptide / ID: 7 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 61.724816 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: AASGLDHLKN GYRRRFCRPS RARDINTEQG QNVLEILQDC FEEKSLANDF STNSTKSVPN STRKIKDTCI QSPSKECQKS HPKSVPVSS KKKEASLQFV VEPSEATNRS VQAHEVHQKI LATDVSSKNT PDSKKISSRN INDHHSEADE EFYLSVGSPS V LLDAKTSV ...文字列:
AASGLDHLKN GYRRRFCRPS RARDINTEQG QNVLEILQDC FEEKSLANDF STNSTKSVPN STRKIKDTCI QSPSKECQKS HPKSVPVSS KKKEASLQFV VEPSEATNRS VQAHEVHQKI LATDVSSKNT PDSKKISSRN INDHHSEADE EFYLSVGSPS V LLDAKTSV SQNVIPSSAQ KRETYTFENS VNMLPSSTEV SVKTKKRLNF DDKVMLKKIE IDNKVSDEED KTSEGQERKP SG SSQNRIR DSEYEIQRQA KKSFSTLFLE TVKRKSESSP IVRHAATAPP HSCPPDDTKL IEDEFIIDES DQSFASRSWI TIP RKAGSL KQRTISPAES TALLQGRKSR EKHHNILPKT LANDKHSHKP HPVETSQPSD KTVLDTSYAL IGETVNNYRS TKYE MYSKN AEKPSRSKRT IKQKQRRKFM AKPAEEQLDV GQSKDENIHT SHITQDEFQR NSDRNMEEHE EMGNDCVSKK QMPPV GSKK SSTRKDKEES KKKRFSSESK NKLVPEEVTS TVTKSRRISR RPSDWWVVKS EESPVYSNS

UniProtKB: Centromere protein C

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分子 #5: DNA (171-MER)

分子名称: DNA (171-MER) / タイプ: dna / ID: 5 / コピー数: 1 / 分類: DNA
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 52.725812 KDa
配列文字列: (DT)(DC)(DC)(DA)(DA)(DA)(DT)(DG)(DT)(DC) (DC)(DA)(DA)(DT)(DT)(DC)(DC)(DA)(DG)(DA) (DT)(DA)(DC)(DT)(DA)(DC)(DA)(DA)(DA) (DA)(DA)(DG)(DA)(DG)(DT)(DG)(DT)(DT)(DT) (DC) (DA)(DA)(DA)(DA)(DC) ...文字列:
(DT)(DC)(DC)(DA)(DA)(DA)(DT)(DG)(DT)(DC) (DC)(DA)(DA)(DT)(DT)(DC)(DC)(DA)(DG)(DA) (DT)(DA)(DC)(DT)(DA)(DC)(DA)(DA)(DA) (DA)(DA)(DG)(DA)(DG)(DT)(DG)(DT)(DT)(DT) (DC) (DA)(DA)(DA)(DA)(DC)(DT)(DG)(DC) (DT)(DC)(DT)(DA)(DT)(DG)(DA)(DA)(DA)(DA) (DG)(DG) (DA)(DA)(DT)(DG)(DT)(DT)(DC) (DA)(DA)(DC)(DT)(DC)(DT)(DA)(DT)(DG)(DA) (DG)(DT)(DT) (DG)(DA)(DA)(DT)(DG)(DC) (DA)(DA)(DA)(DC)(DA)(DT)(DC)(DA)(DC)(DA) (DT)(DA)(DG)(DA) (DA)(DG)(DT)(DT)(DT) (DC)(DT)(DG)(DA)(DG)(DA)(DA)(DT)(DG)(DC) (DT)(DT)(DC)(DT)(DG) (DT)(DC)(DT)(DA) (DG)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DA)(DT)(DG)(DT) (DG)(DA)(DA)(DC)(DA)(DT) (DA)(DT)(DT) (DC)(DC)(DC)(DG)(DT)(DT)(DT)(DC)(DC)(DA) (DA)(DC)(DG)(DA)(DA)(DG)(DG) (DC)(DC) (DT)(DC)(DA)(DA)(DA)(DG)(DC)(DG)(DG)

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分子 #6: DNA (171-MER)

分子名称: DNA (171-MER) / タイプ: dna / ID: 6 / コピー数: 1 / 分類: DNA
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 52.822809 KDa
配列文字列: (DC)(DC)(DG)(DC)(DT)(DT)(DT)(DG)(DA)(DG) (DG)(DC)(DC)(DT)(DT)(DC)(DG)(DT)(DT)(DG) (DG)(DA)(DA)(DA)(DC)(DG)(DG)(DG)(DA) (DA)(DT)(DA)(DT)(DG)(DT)(DT)(DC)(DA)(DC) (DA) (DT)(DA)(DA)(DA)(DA) ...文字列:
(DC)(DC)(DG)(DC)(DT)(DT)(DT)(DG)(DA)(DG) (DG)(DC)(DC)(DT)(DT)(DC)(DG)(DT)(DT)(DG) (DG)(DA)(DA)(DA)(DC)(DG)(DG)(DG)(DA) (DA)(DT)(DA)(DT)(DG)(DT)(DT)(DC)(DA)(DC) (DA) (DT)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DC)(DT) (DA)(DG)(DA)(DC)(DA)(DG)(DA)(DA)(DG)(DC) (DA)(DT) (DT)(DC)(DT)(DC)(DA)(DG)(DA) (DA)(DA)(DC)(DT)(DT)(DC)(DT)(DA)(DT)(DG) (DT)(DG)(DA) (DT)(DG)(DT)(DT)(DT)(DG) (DC)(DA)(DT)(DT)(DC)(DA)(DA)(DC)(DT)(DC) (DA)(DT)(DA)(DG) (DA)(DG)(DT)(DT)(DG) (DA)(DA)(DC)(DA)(DT)(DT)(DC)(DC)(DT)(DT) (DT)(DT)(DC)(DA)(DT) (DA)(DG)(DA)(DG) (DC)(DA)(DG)(DT)(DT)(DT)(DT)(DG)(DA)(DA) (DA)(DC)(DA)(DC)(DT)(DC) (DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DG)(DT)(DA)(DG)(DT)(DA)(DT)(DC) (DT)(DG)(DG)(DA)(DA)(DT)(DT) (DG)(DG) (DA)(DC)(DA)(DT)(DT)(DT)(DG)(DG)(DA)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.8
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 40.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.44 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 189204
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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