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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-13116 | ||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Dimeric form of SARS-CoV-2 RNA-dependent RNA polymerase | ||||||||||||||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||||||||||||||
試料 |
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キーワード | SARS-CoV-2 / Polymerase / Transcription / Replication / RNA / Dimer / VIRAL PROTEIN | ||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein guanylyltransferase activity / RNA endonuclease activity, producing 3'-phosphomonoesters / mRNA guanylyltransferase activity / 5'-3' RNA helicase activity / 付加脱離酵素(リアーゼ); P-Oリアーゼ類; - / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of TBK1 activity / Assembly of the SARS-CoV-2 Replication-Transcription Complex (RTC) / Maturation of replicase proteins / ISG15-specific peptidase activity / Transcription of SARS-CoV-2 sgRNAs ...protein guanylyltransferase activity / RNA endonuclease activity, producing 3'-phosphomonoesters / mRNA guanylyltransferase activity / 5'-3' RNA helicase activity / 付加脱離酵素(リアーゼ); P-Oリアーゼ類; - / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of TBK1 activity / Assembly of the SARS-CoV-2 Replication-Transcription Complex (RTC) / Maturation of replicase proteins / ISG15-specific peptidase activity / Transcription of SARS-CoV-2 sgRNAs / TRAF3-dependent IRF activation pathway / Translation of Replicase and Assembly of the Replication Transcription Complex / Replication of the SARS-CoV-2 genome / snRNP Assembly / double membrane vesicle viral factory outer membrane / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エキソリボヌクレアーゼ / SARS coronavirus main proteinase / host cell endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment / 3'-5'-RNA exonuclease activity / 5'-3' DNA helicase activity / symbiont-mediated suppression of host NF-kappaB cascade / host cell endosome / symbiont-mediated suppression of host toll-like receptor signaling pathway / symbiont-mediated degradation of host mRNA / mRNA guanylyltransferase / symbiont-mediated suppression of host ISG15-protein conjugation / G-quadruplex RNA binding / mRNA (guanine-N7)-methyltransferase / omega peptidase activity / methyltransferase cap1 / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of IRF3 activity / SARS-CoV-2 modulates host translation machinery / host cell Golgi apparatus / symbiont-mediated perturbation of host ubiquitin-like protein modification / DNA helicase / mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase activity / mRNA 5'-cap (guanine-N7-)-methyltransferase activity / ubiquitinyl hydrolase 1 / cysteine-type deubiquitinase activity / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; システインプロテアーゼ / host cell perinuclear region of cytoplasm / single-stranded RNA binding / host cell endoplasmic reticulum membrane / viral protein processing / lyase activity / RNA helicase / symbiont-mediated suppression of host type I interferon-mediated signaling pathway / induction by virus of host autophagy / copper ion binding / RNA-directed RNA polymerase / viral translational frameshifting / viral RNA genome replication / cysteine-type endopeptidase activity / RNA-dependent RNA polymerase activity / virus-mediated perturbation of host defense response / lipid binding / DNA-templated transcription / host cell nucleus / SARS-CoV-2 activates/modulates innate and adaptive immune responses / ATP hydrolysis activity / proteolysis / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||||||||
生物種 | Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) | ||||||||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.5 Å | ||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Jochheim FA / Tegunov D | ||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ドイツ, 7件
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引用 | ジャーナル: Commun Biol / 年: 2021 タイトル: The structure of a dimeric form of SARS-CoV-2 polymerase. 著者: Florian A Jochheim / Dimitry Tegunov / Hauke S Hillen / Jana Schmitzová / Goran Kokic / Christian Dienemann / Patrick Cramer / 要旨: The coronavirus SARS-CoV-2 uses an RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) to replicate and transcribe its genome. Previous structures of the RdRp revealed a monomeric enzyme composed of the catalytic ...The coronavirus SARS-CoV-2 uses an RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) to replicate and transcribe its genome. Previous structures of the RdRp revealed a monomeric enzyme composed of the catalytic subunit nsp12, two copies of subunit nsp8, and one copy of subunit nsp7. Here we report an alternative, dimeric form of the enzyme and resolve its structure at 5.5 Å resolution. In this structure, the two RdRps contain only one copy of nsp8 each and dimerize via their nsp7 subunits to adopt an antiparallel arrangement. We speculate that the RdRp dimer facilitates template switching during production of sub-genomic RNAs. | ||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_13116.map.gz | 29.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-13116-v30.xml emd-13116.xml | 22 KB 22 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_13116_fsc.xml | 8.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_13116.png | 53 KB | ||
マスクデータ | emd_13116_msk_1.map | 59.6 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-13116.cif.gz | 6.8 KB | ||
その他 | emd_13116_half_map_1.map.gz emd_13116_half_map_2.map.gz | 55.2 MB 55.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-13116 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-13116 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_13116_validation.pdf.gz | 903 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_13116_full_validation.pdf.gz | 902.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_13116_validation.xml.gz | 15.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_13116_validation.cif.gz | 20 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-13116 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-13116 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7oygMC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10741 (タイトル: Single particle cryo-EM dataset of Sars-CoV2 Rna dependent RNA polymerase Data size: 2.7 TB Data #1: Unaligned TIF movies of SARS-CoV2 RdRp in complex with nsp7, nsp8 and RNA [micrographs - multiframe]) |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_13116.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 59.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.20096 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_13116_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half Map B
ファイル | emd_13116_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half Map B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half Map A
ファイル | emd_13116_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half Map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Dimeric form of SARS-CoV-2 RNA-dependent RNA polymerase complex (...
全体 | 名称: Dimeric form of SARS-CoV-2 RNA-dependent RNA polymerase complex (nsp12, nsp7, nsp8) |
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要素 |
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-超分子 #1: Dimeric form of SARS-CoV-2 RNA-dependent RNA polymerase complex (...
超分子 | 名称: Dimeric form of SARS-CoV-2 RNA-dependent RNA polymerase complex (nsp12, nsp7, nsp8) タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#5 |
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由来(天然) | 生物種: Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) |
-分子 #1: SARS-CoV-2 RNA-dependent RNA polymerase (nsp12)
分子 | 名称: SARS-CoV-2 RNA-dependent RNA polymerase (nsp12) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ubiquitinyl hydrolase 1 |
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由来(天然) | 生物種: Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) |
分子量 | 理論値: 107.053227 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: SNASADAQSF LNRVCGVSAA RLTPCGTGTS TDVVYRAFDI YNDKVAGFAK FLKTNCCRFQ EKDEDDNLID SYFVVKRHTF SNYQHEETI YNLLKDCPAV AKHDFFKFRI DGDMVPHISR QRLTKYTMAD LVYALRHFDE GNCDTLKEIL VTYNCCDDDY F NKKDWYDF ...文字列: SNASADAQSF LNRVCGVSAA RLTPCGTGTS TDVVYRAFDI YNDKVAGFAK FLKTNCCRFQ EKDEDDNLID SYFVVKRHTF SNYQHEETI YNLLKDCPAV AKHDFFKFRI DGDMVPHISR QRLTKYTMAD LVYALRHFDE GNCDTLKEIL VTYNCCDDDY F NKKDWYDF VENPDILRVY ANLGERVRQA LLKTVQFCDA MRNAGIVGVL TLDNQDLNGN WYDFGDFIQT TPGSGVPVVD SY YSLLMPI LTLTRALTAE SHVDTDLTKP YIKWDLLKYD FTEERLKLFD RYFKYWDQTY HPNCVNCLDD RCILHCANFN VLF STVFPP TSFGPLVRKI FVDGVPFVVS TGYHFRELGV VHNQDVNLHS SRLSFKELLV YAADPAMHAA SGNLLLDKRT TCFS VAALT NNVAFQTVKP GNFNKDFYDF AVSKGFFKEG SSVELKHFFF AQDGNAAISD YDYYRYNLPT MCDIRQLLFV VEVVD KYFD CYDGGCINAN QVIVNNLDKS AGFPFNKWGK ARLYYDSMSY EDQDALFAYT KRNVIPTITQ MNLKYAISAK NRARTV AGV SICSTMTNRQ FHQKLLKSIA ATRGATVVIG TSKFYGGWHN MLKTVYSDVE NPHLMGWDYP KCDRAMPNML RIMASLV LA RKHTTCCSLS HRFYRLANEC AQVLSEMVMC GGSLYVKPGG TSSGDATTAY ANSVFNICQA VTANVNALLS TDGNKIAD K YVRNLQHRLY ECLYRNRDVD TDFVNEFYAY LRKHFSMMIL SDDAVVCFNS TYASQGLVAS IKNFKSVLYY QNNVFMSEA KCWTETDLTK GPHEFCSQHT MLVKQGDDYV YLPYPDPSRI LGAGCFVDDI VKTDGTLMIE RFVSLAIDAY PLTKHPNQEY ADVFHLYLQ YIRKLHDELT GHMLDMYSVM LTNDNTSRYW EPEFYEAMYT PHTVLQ UniProtKB: Replicase polyprotein 1ab |
-分子 #2: SARS-CoV-2 nsp8
分子 | 名称: SARS-CoV-2 nsp8 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ubiquitinyl hydrolase 1 |
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由来(天然) | 生物種: Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) |
分子量 | 理論値: 22.175309 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: SNAAIASEFS SLPSYAAFAT AQEAYEQAVA NGDSEVVLKK LKKSLNVAKS EFDRDAAMQR KLEKMADQAM TQMYKQARSE DKRAKVTSA MQTMLFTMLR KLDNDALNNI INNARDGCVP LNIIPLTTAA KLMVVIPDYN TYKNTCDGTT FTYASALWEI Q QVVDADSK ...文字列: SNAAIASEFS SLPSYAAFAT AQEAYEQAVA NGDSEVVLKK LKKSLNVAKS EFDRDAAMQR KLEKMADQAM TQMYKQARSE DKRAKVTSA MQTMLFTMLR KLDNDALNNI INNARDGCVP LNIIPLTTAA KLMVVIPDYN TYKNTCDGTT FTYASALWEI Q QVVDADSK IVQLSEISMD NSPNLAWPLI VTALRANSAV KLQ UniProtKB: Replicase polyprotein 1ab |
-分子 #3: SARS-CoV-2 nsp7
分子 | 名称: SARS-CoV-2 nsp7 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ubiquitinyl hydrolase 1 |
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由来(天然) | 生物種: Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) |
分子量 | 理論値: 9.521062 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: SNASKMSDVK CTSVVLLSVL QQLRVESSSK LWAQCVQLHN DILLAKDTTE AFEKMVSLLS VLLSMQGAVD INKLCEEMLD NRATLQ UniProtKB: Replicase polyprotein 1ab |
-分子 #4: RNA (5'-R(P*CP*UP*AP*CP*GP*CP*AP*GP*UP*G)-3')
分子 | 名称: RNA (5'-R(P*CP*UP*AP*CP*GP*CP*AP*GP*UP*G)-3') / タイプ: rna / ID: 4 / コピー数: 2 |
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由来(天然) | 生物種: Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) |
分子量 | 理論値: 4.807914 KDa |
配列 | 文字列: UGAGCCUACG CAGUG |
-分子 #5: RNA (5'-R(P*UP*GP*CP*AP*CP*UP*GP*CP*GP*UP*AP*G)-3')
分子 | 名称: RNA (5'-R(P*UP*GP*CP*AP*CP*UP*GP*CP*GP*UP*AP*G)-3') / タイプ: rna / ID: 5 / コピー数: 2 |
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由来(天然) | 生物種: Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) |
分子量 | 理論値: 18.138658 KDa |
配列 | 文字列: UUUUCAUGCA CUGCGUAGGC UCAUACCGUA UUGAGACCUU UUGGUCUCAA UACGGUA |
-分子 #6: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 4 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 2 mg/mL | ||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
詳細 | 30 deg tilt |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 60.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 0.0014 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 0.0004 µm / 照射モード: OTHER / 撮影モード: OTHER / Cs: 2.7 mm / 倍率(公称値): 105000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |