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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-12484 | |||||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the folate-specific ECF transporter complex in MSP2N2 lipid nanodiscs | |||||||||||||||
マップデータ | Inward-facing apo conformation of the folate-specific ECF transporter complex in MSP2N2 lipid nanodiscs at 2.7 A resolution sharpened at -44 A^2. | |||||||||||||||
試料 |
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キーワード | ABC Transporter / Type III ABC Transporter / ECF transporter complex / Folate transporter / Membrane protein / TRANSPORT PROTEIN | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 トランスロカーゼ / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・物質の膜輸送を触媒する / transmembrane transporter activity / ATPase-coupled transmembrane transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / ATP hydrolysis activity / ATP binding / membrane / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (strain ATCC 11842 / DSM 20081 / JCM 1002 / NBRC 13953 / NCIMB 11778) (乳酸菌) | |||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.7 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Thangaratnarajah C / Rheinberger J | |||||||||||||||
資金援助 | オランダ, 4件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2021 タイトル: Insights into the bilayer-mediated toppling mechanism of a folate-specific ECF transporter by cryo-EM. 著者: Chancievan Thangaratnarajah / Jan Rheinberger / Cristina Paulino / Dirk J Slotboom / 要旨: Energy-coupling factor (ECF)-type transporters are small, asymmetric membrane protein complexes (∼115 kDa) that consist of a membrane-embedded, substrate-binding protein (S component) and a ...Energy-coupling factor (ECF)-type transporters are small, asymmetric membrane protein complexes (∼115 kDa) that consist of a membrane-embedded, substrate-binding protein (S component) and a tripartite ATP-hydrolyzing module (ECF module). They import micronutrients into bacterial cells and have been proposed to use a highly unusual transport mechanism, in which the substrate is dragged across the membrane by a toppling motion of the S component. However, it remains unclear how the lipid bilayer could accommodate such a movement. Here, we used cryogenic electron microscopy at 200 kV to determine structures of a folate-specific ECF transporter in lipid nanodiscs and detergent micelles at 2.7- and 3.4-Å resolution, respectively. The structures reveal an irregularly shaped bilayer environment around the membrane-embedded complex and suggest that toppling of the S component is facilitated by protein-induced membrane deformations. In this way, structural remodeling of the lipid bilayer environment is exploited to guide the transport process. | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_12484.map.gz | 202.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-12484-v30.xml emd-12484.xml | 27.6 KB 27.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_12484_fsc.xml | 13.6 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_12484.png | 149.5 KB | ||
マスクデータ | emd_12484_msk_1.map | 216 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-12484.cif.gz | 7.4 KB | ||
その他 | emd_12484_additional_1.map.gz emd_12484_half_map_1.map.gz emd_12484_half_map_2.map.gz | 171.3 MB 172 MB 172 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12484 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12484 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_12484_validation.pdf.gz | 962.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_12484_full_validation.pdf.gz | 961.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_12484_validation.xml.gz | 21.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_12484_validation.cif.gz | 28 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12484 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12484 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7nnuMC 7nntC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10942 (タイトル: Cryo-EM structure of the folate-specific ECF transporter complex in MSP2N2 lipid nanodiscs (200 kV) Data size: 1.1 TB Data #1: Unaligned movie frames of ECF-FolT2 in MSP2N2 lipid nanodiscs (Dataset 1) [micrographs - multiframe] Data #2: Unaligned movie frames of ECF-FolT2 in MSP2N2 lipid nanodiscs (Dataset 2) [micrographs - multiframe] Data #3: Unaligned movie frames of ECF-FolT2 in MSP2N2 lipid nanodiscs (Dataset 3) [micrographs - multiframe] Data #4: Unaligned movie frames of ECF-FolT2 in MSP2N2 lipid nanodiscs (Dataset 3) [micrographs - multiframe]) |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_12484.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Inward-facing apo conformation of the folate-specific ECF transporter complex in MSP2N2 lipid nanodiscs at 2.7 A resolution sharpened at -44 A^2. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.771 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_12484_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Sharpened map obtained with LocalDeblur used for model...
ファイル | emd_12484_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Sharpened map obtained with LocalDeblur used for model building and figures. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map 1 used during refinement and FSC...
ファイル | emd_12484_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map 1 used during refinement and FSC gold-standard resolution calculation. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map 2 used during refinement and FSC...
ファイル | emd_12484_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map 2 used during refinement and FSC gold-standard resolution calculation. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Folate-specific ECF transporter complex
全体 | 名称: Folate-specific ECF transporter complex |
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要素 |
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-超分子 #1: Folate-specific ECF transporter complex
超分子 | 名称: Folate-specific ECF transporter complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#4 |
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由来(天然) | 生物種: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (strain ATCC 11842 / DSM 20081 / JCM 1002 / NBRC 13953 / NCIMB 11778) (乳酸菌) 株: ATCC 11842 / DSM 20081 / JCM 1002 / NBRC 13953 / NCIMB 11778 |
-分子 #1: Energy-coupling factor transporter ATP-binding protein EcfA1
分子 | 名称: Energy-coupling factor transporter ATP-binding protein EcfA1 タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: トランスロカーゼ |
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由来(天然) | 生物種: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (strain ATCC 11842 / DSM 20081 / JCM 1002 / NBRC 13953 / NCIMB 11778) (乳酸菌) 株: ATCC 11842 / DSM 20081 / JCM 1002 / NBRC 13953 / NCIMB 11778 |
分子量 | 理論値: 33.166418 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli MC1061 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MHHHHHHHHH HGENLYFQGS DNIISFDHVT FTYPDSPRPA LSDLSFAIER GSWTALIGHN GSGKSTVSKL INGLLAPDDL DKSSITVDG VKLGADTVWE VREKVGIVFQ NPDNQFVGAT VSDDVAFGLE NRAVPRPEML KIVAQAVADV GMADYADSEP S NLSGGQKQ ...文字列: MHHHHHHHHH HGENLYFQGS DNIISFDHVT FTYPDSPRPA LSDLSFAIER GSWTALIGHN GSGKSTVSKL INGLLAPDDL DKSSITVDG VKLGADTVWE VREKVGIVFQ NPDNQFVGAT VSDDVAFGLE NRAVPRPEML KIVAQAVADV GMADYADSEP S NLSGGQKQ RVAIAGILAV KPQVIILDES TSMLDPEGKE QILDLVRKIK EDNNLTVISI THDLEEAAGA DQVLVLDDGQ LL DQGKPEE IFPKVEMLKR IGLDIPFVYR LKQLLKERGI VLPDEIDDDE KLVQSLWQLN SKM UniProtKB: Energy-coupling factor transporter ATP-binding protein EcfA1 |
-分子 #2: Energy-coupling factor transporter ATP-binding protein EcfA2
分子 | 名称: Energy-coupling factor transporter ATP-binding protein EcfA2 タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO EC番号: 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・物質の膜輸送を触媒する |
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由来(天然) | 生物種: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (strain ATCC 11842 / DSM 20081 / JCM 1002 / NBRC 13953 / NCIMB 11778) (乳酸菌) 株: ATCC 11842 / DSM 20081 / JCM 1002 / NBRC 13953 / NCIMB 11778 |
分子量 | 理論値: 31.672156 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli MC1061 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MAIKFENVSY VYSPGSPLEA IGLDQLNFSL EEGKFIALVG HTGSGKSTLM QHFNALLKPT SGKIEIAGYT ITPETGNKGL KDLRRKVSL AFQFSEAQLF ENTVLKDVEY GPRNFGFSED EAREAALKWL KKVGLKDDLI EHSPFDLSGG QMRRVALAGV L AYEPEIIC ...文字列: MAIKFENVSY VYSPGSPLEA IGLDQLNFSL EEGKFIALVG HTGSGKSTLM QHFNALLKPT SGKIEIAGYT ITPETGNKGL KDLRRKVSL AFQFSEAQLF ENTVLKDVEY GPRNFGFSED EAREAALKWL KKVGLKDDLI EHSPFDLSGG QMRRVALAGV L AYEPEIIC LDEPAAGLDP MGRLEMMQLF KDYQAAGHTV ILVTHNMDDV ADYADDVLAL EHGRLIKHAS PKEVFKDSEW LQ KHHLAEP RSARFAAKLE AAGLKLPGQP LTMPELADAI KQSLKGGEHE UniProtKB: Energy-coupling factor transporter ATP-binding protein EcfA2 |
-分子 #3: Conserved hypothetical membrane protein
分子 | 名称: Conserved hypothetical membrane protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (strain ATCC 11842 / DSM 20081 / JCM 1002 / NBRC 13953 / NCIMB 11778) (乳酸菌) 株: ATCC 11842 / DSM 20081 / JCM 1002 / NBRC 13953 / NCIMB 11778 |
分子量 | 理論値: 20.483604 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli MC1061 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MKSESKVSSK LELRELVLLA MVIAIKVILG QFKVGNATLQ VGLGFIGSVM LGYLFGPWWG FAGGALSDLV SSVIFGNLGG FFIGFTLTA ALGPMIYGFF LYKQPIQIWR VIASVICVTV ICNIGLNTLW VSMMYGINFM VALSSRILKE MITPWIQMVA V WFILEGLS RVKLSRKFWS HPQFEK UniProtKB: Conserved hypothetical membrane protein |
-分子 #4: Energy-coupling factor transporter transmembrane protein EcfT
分子 | 名称: Energy-coupling factor transporter transmembrane protein EcfT タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (strain ATCC 11842 / DSM 20081 / JCM 1002 / NBRC 13953 / NCIMB 11778) (乳酸菌) 株: ATCC 11842 / DSM 20081 / JCM 1002 / NBRC 13953 / NCIMB 11778 |
分子量 | 理論値: 30.290283 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli MC1061 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MSKIIIGRYL PGTTFVYRVD PRAKLLTTFY FIIMIFLANN WVSYLVISIF GLAYVFATGL KARVFWDGVK PMIWMIVFTS LLQTFFMAG GKVYWHWWIF TLSSEGLING LYVFIRFAMI ILVSTVMTVT TKPLEIADAM EWMLTPLKLF KVNVGMISLV I SIALRFVP ...文字列: MSKIIIGRYL PGTTFVYRVD PRAKLLTTFY FIIMIFLANN WVSYLVISIF GLAYVFATGL KARVFWDGVK PMIWMIVFTS LLQTFFMAG GKVYWHWWIF TLSSEGLING LYVFIRFAMI ILVSTVMTVT TKPLEIADAM EWMLTPLKLF KVNVGMISLV I SIALRFVP TLFDQTVKIM NAQRSRGADF NDGGLVKRAK SVVPMLVPLF IDSLEVALDL STAMESRGYK GSEGRTRYRI LE WSKVDLI PVAYCLLLTI LMITTRKH UniProtKB: Energy-coupling factor transporter transmembrane protein EcfT |
-分子 #5: water
分子 | 名称: water / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 35 / 式: HOH |
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分子量 | 理論値: 18.015 Da |
Chemical component information | ChemComp-HOH: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 7.9 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 20 mM Tris, pH 8.0, 150 mM NaCl |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 詳細: 5 mA |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 288 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV 詳細: 2.9 mM fluorinated Fos-choline 8 was added prior to sample application onto grids. Grids were blotted for 3-4 sec.. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - サイズ - 横: 7676 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 7420 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-60 / 撮影したグリッド数: 3 / 実像数: 4722 / 平均露光時間: 9.0 sec. / 平均電子線量: 51.1 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 倍率(公称値): 165000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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精密化 | 空間: REAL | ||||||||||
得られたモデル | PDB-7nnu: |