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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-11732 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of human ER membrane protein complex in lipid nanodiscs | |||||||||
マップデータ | Consensus map of hEMC in nanodiscs | |||||||||
試料 |
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キーワード | ER membrane protein / EMC / Membrane protein biogenesis / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 extrinsic component of endoplasmic reticulum membrane / inorganic cation transmembrane transporter activity / EMC complex / omegasome membrane / protein insertion into ER membrane by stop-transfer membrane-anchor sequence / magnesium ion transport / cobalt ion transmembrane transporter activity / tail-anchored membrane protein insertion into ER membrane / Miscellaneous transport and binding events / ferrous iron transmembrane transporter activity ...extrinsic component of endoplasmic reticulum membrane / inorganic cation transmembrane transporter activity / EMC complex / omegasome membrane / protein insertion into ER membrane by stop-transfer membrane-anchor sequence / magnesium ion transport / cobalt ion transmembrane transporter activity / tail-anchored membrane protein insertion into ER membrane / Miscellaneous transport and binding events / ferrous iron transmembrane transporter activity / magnesium ion transmembrane transporter activity / copper ion transport / autophagosome assembly / RHOA GTPase cycle / positive regulation of endothelial cell proliferation / positive regulation of endothelial cell migration / positive regulation of angiogenesis / early endosome membrane / carbohydrate binding / angiogenesis / early endosome / Golgi membrane / endoplasmic reticulum membrane / apoptotic process / Golgi apparatus / endoplasmic reticulum / protein-containing complex / extracellular region / membrane / plasma membrane / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.39 Å | |||||||||
データ登録者 | Braeuning B / Prabu JR | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 2件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2020 タイトル: Structural and mechanistic basis of the EMC-dependent biogenesis of distinct transmembrane clients. 著者: Lakshmi E Miller-Vedam / Bastian Bräuning / Katerina D Popova / Nicole T Schirle Oakdale / Jessica L Bonnar / Jesuraj R Prabu / Elizabeth A Boydston / Natalia Sevillano / Matthew J Shurtleff ...著者: Lakshmi E Miller-Vedam / Bastian Bräuning / Katerina D Popova / Nicole T Schirle Oakdale / Jessica L Bonnar / Jesuraj R Prabu / Elizabeth A Boydston / Natalia Sevillano / Matthew J Shurtleff / Robert M Stroud / Charles S Craik / Brenda A Schulman / Adam Frost / Jonathan S Weissman / 要旨: Membrane protein biogenesis in the endoplasmic reticulum (ER) is complex and failure-prone. The ER membrane protein complex (EMC), comprising eight conserved subunits, has emerged as a central player ...Membrane protein biogenesis in the endoplasmic reticulum (ER) is complex and failure-prone. The ER membrane protein complex (EMC), comprising eight conserved subunits, has emerged as a central player in this process. Yet, we have limited understanding of how EMC enables insertion and integrity of diverse clients, from tail-anchored to polytopic transmembrane proteins. Here, yeast and human EMC cryo-EM structures reveal conserved intricate assemblies and human-specific features associated with pathologies. Structure-based functional studies distinguish between two separable EMC activities, as an insertase regulating tail-anchored protein levels and a broader role in polytopic membrane protein biogenesis. These depend on mechanistically coupled yet spatially distinct regions including two lipid-accessible membrane cavities which confer client-specific regulation, and a non-insertase EMC function mediated by the EMC lumenal domain. Our studies illuminate the structural and mechanistic basis of EMC's multifunctionality and point to its role in differentially regulating the biogenesis of distinct client protein classes. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_11732.map.gz | 227.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-11732-v30.xml emd-11732.xml | 36.8 KB 36.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_11732_fsc.xml | 18.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_11732.png | 104.3 KB | ||
マスクデータ | emd_11732_msk_1.map | 244.1 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-11732.cif.gz | 8.7 KB | ||
その他 | emd_11732_additional_1.map.gz emd_11732_additional_2.map.gz emd_11732_additional_3.map.gz emd_11732_additional_4.map.gz emd_11732_half_map_1.map.gz emd_11732_half_map_2.map.gz | 2.1 MB 3.1 MB 5.6 MB 227.2 MB 226.6 MB 226.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11732 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11732 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_11732_validation.pdf.gz | 1012.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_11732_full_validation.pdf.gz | 1012.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_11732_validation.xml.gz | 21.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_11732_validation.cif.gz | 28.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11732 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11732 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_11732.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Consensus map of hEMC in nanodiscs | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.8512 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_11732_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Focused cytoplasm map of hEMC in nanodiscs
ファイル | emd_11732_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Focused cytoplasm map of hEMC in nanodiscs | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Focused lumen map of hEMC in nanodiscs
ファイル | emd_11732_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Focused lumen map of hEMC in nanodiscs | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Sidesplitter map of hEMC in nanodiscs
ファイル | emd_11732_additional_3.map | ||||||||||||
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注釈 | Sidesplitter map of hEMC in nanodiscs | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Consensus map of hEMC in nanodiscs - subclassified...
ファイル | emd_11732_additional_4.map | ||||||||||||
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注釈 | Consensus map of hEMC in nanodiscs - subclassified on EMC7 lumenal domain. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Consensus map of hEMC in nanodiscs - Halfmap 1
ファイル | emd_11732_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Consensus map of hEMC in nanodiscs - Halfmap 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Consensus map of hEMC in nanodiscs - Halfmap 2
ファイル | emd_11732_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Consensus map of hEMC in nanodiscs - Halfmap 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Human endoplasmic reticulum membrane protein complex (EMC) in POP...
+超分子 #1: Human endoplasmic reticulum membrane protein complex (EMC) in POP...
+分子 #1: ER membrane protein complex subunit 1
+分子 #2: ER membrane protein complex subunit 2
+分子 #3: ER membrane protein complex subunit 3
+分子 #4: ER membrane protein complex subunit 4
+分子 #5: Membrane magnesium transporter 1
+分子 #6: ER membrane protein complex subunit 6
+分子 #7: ER membrane protein complex subunit 7
+分子 #8: ER membrane protein complex subunit 8
+分子 #9: ER membrane protein complex subunit 10
+分子 #10: Unassigned helix
+分子 #11: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
+分子 #12: 1,2-DIOLEOYL-SN-GLYCERO-3-PHOSPHOCHOLINE
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 2 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 6 詳細: 10 mM ammonium citrate pH 6.0, 100 mM sodium chloride, 0.25 mM TCEP |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 30 sec. |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均露光時間: 3.0 sec. / 平均電子線量: 72.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: AB INITIO MODEL |
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得られたモデル | PDB-7ado: |