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万見
- EMDB-10714: Apoferritin from horse spleen, prepared using standard Vitrobot w... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-10714
タイトルApoferritin from horse spleen, prepared using standard Vitrobot workflow
マップデータApoferritin from horse spleen, preparation by Vitrobot
試料
  • 複合体: Apoferritin from horse spleen
機能・相同性
機能・相同性情報


ferritin complex / autolysosome / ferric iron binding / autophagosome / ferrous iron binding / iron ion transport / cytoplasmic vesicle / intracellular iron ion homeostasis / iron ion binding / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Ferritin iron-binding regions signature 1. / Ferritin iron-binding regions signature 2. / Ferritin, conserved site / Ferritin / Ferritin-like diiron domain / Ferritin-like diiron domain profile. / Ferritin/DPS protein domain / Ferritin-like domain / Ferritin-like / Ferritin-like superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
Ferritin light chain
類似検索 - 構成要素
生物種Equus caballus (ウマ)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.89 Å
データ登録者Maeots ME / Lee B / Nans A / Jeong SG / Esfahani MNM / Smith D / Lee CS / Lee SS / Peter M / Enchev RI
資金援助 韓国, スイス, 英国, 7件
OrganizationGrant number国
National Research Foundation (NRF, Korea)NRF-2015K1A1A2033054 韓国
European Research Council (ERC) スイス
Swiss National Science Foundation スイス
Cancer Research UK 英国
The Francis Crick Institute 英国
Wellcome Trust 英国
Medical Research Council (MRC, United Kingdom) 英国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2020
タイトル: Modular microfluidics enables kinetic insight from time-resolved cryo-EM.
著者: Märt-Erik Mäeots / Byungjin Lee / Andrea Nans / Seung-Geun Jeong / Mohammad M N Esfahani / Shan Ding / Daniel J Smith / Chang-Soo Lee / Sung Sik Lee / Matthias Peter / Radoslav I Enchev /
要旨: Mechanistic understanding of biochemical reactions requires structural and kinetic characterization of the underlying chemical processes. However, no single experimental technique can provide this ...Mechanistic understanding of biochemical reactions requires structural and kinetic characterization of the underlying chemical processes. However, no single experimental technique can provide this information in a broadly applicable manner and thus structural studies of static macromolecules are often complemented by biophysical analysis. Moreover, the common strategy of utilizing mutants or crosslinking probes to stabilize intermediates is prone to trapping off-pathway artefacts and precludes determining the order of molecular events. Here we report a time-resolved sample preparation method for cryo-electron microscopy (trEM) using a modular microfluidic device, featuring a 3D-mixing unit and variable delay lines that enables automated, fast, and blot-free sample vitrification. This approach not only preserves high-resolution structural detail but also substantially improves sample integrity and protein distribution across the vitreous ice. We validate the method by visualising reaction intermediates of early RecA filament growth across three orders of magnitude on sub-second timescales. The trEM method reported here is versatile, reproducible, and readily adaptable to a broad spectrum of fundamental questions in biology.
履歴
登録2020年2月28日-
ヘッダ(付随情報) 公開2020年7月22日-
マップ公開2020年7月22日-
更新2020年7月22日-
現状2020年7月22日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.0511
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.0511
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_10714.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_10714.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 59.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Apoferritin from horse spleen, preparation by Vitrobot
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸X (Sec.)Y (Row.)Z (Col.)
0.85 Å/pix.
x 250 pix.
= 211.25 Å		0.85 Å/pix.
x 250 pix.
= 211.25 Å		0.85 Å/pix.
x 250 pix.
= 211.25 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.845 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.0511 / ムービー #1: 0.0511
最小 - 最大-0.11404661 - 0.20769644
平均 (標準偏差)0.00000000000 (±0.011240054)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderZYX
Origin000
サイズ250250250
Spacing250250250
セルA=B=C: 211.25 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z0.8450.8450.845
M x/y/z250250250
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z211.250211.250211.250
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ000
NX/NY/NZ250250250
MAP C/R/S321
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS250250250
D min/max/mean-0.1140.2080.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Apoferritin from horse spleen

全体名称: Apoferritin from horse spleen
要素
  • 複合体: Apoferritin from horse spleen

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超分子 #1: Apoferritin from horse spleen

超分子名称: Apoferritin from horse spleen / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 詳細: commercial apoferritin from Sigma Aldrich
由来(天然)生物種: Equus caballus (ウマ) / 器官: spleen
分子量理論値: 443 KDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度2 mg/mL
緩衝液pH: 7.4 / 構成要素 - 名称: PBSA
グリッドモデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内温度: 294 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: 4C, 100% humidity.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 33.6 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成想定した対称性 - 点群: O (正8面体型対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.89 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 19845
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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