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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-10022 | |||||||||
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タイトル | Structure of human mitochondrial 28S ribosome in complex with mitochondrial IF2 and IF3 | |||||||||
マップデータ | Composite map, local resolution filtered | |||||||||
試料 |
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キーワード | ribosomal small subunit / initiation complex / initiation factor / RIBOSOME | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 mitochondrial translational initiation / mitochondrial ribosome binding / translation factor activity, RNA binding / mitochondrial ribosome assembly / ribosome disassembly / Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / Mitochondrial translation initiation / positive regulation of mitochondrial translation / negative regulation of mitotic nuclear division ...mitochondrial translational initiation / mitochondrial ribosome binding / translation factor activity, RNA binding / mitochondrial ribosome assembly / ribosome disassembly / Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / Mitochondrial translation initiation / positive regulation of mitochondrial translation / negative regulation of mitotic nuclear division / mitochondrial ribosome / mitochondrial small ribosomal subunit / mitochondrial translation / regulation of translational initiation / positive regulation of proteolysis / ribosomal small subunit binding / Mitochondrial protein degradation / translation initiation factor activity / apoptotic signaling pathway / fibrillar center / small ribosomal subunit rRNA binding / cell junction / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / nuclear membrane / cell population proliferation / tRNA binding / mitochondrial inner membrane / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / mitochondrial matrix / translation / protein domain specific binding / intracellular membrane-bounded organelle / GTPase activity / mRNA binding / nucleolus / GTP binding / mitochondrion / RNA binding / nucleoplasm / nucleus / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.14 Å | |||||||||
データ登録者 | Itoh Y / Khawaja A | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2020 タイトル: Distinct pre-initiation steps in human mitochondrial translation. 著者: Anas Khawaja / Yuzuru Itoh / Cristina Remes / Henrik Spåhr / Olessya Yukhnovets / Henning Höfig / Alexey Amunts / Joanna Rorbach / 要旨: Translation initiation in human mitochondria relies upon specialized mitoribosomes and initiation factors, mtIF2 and mtIF3, which have diverged from their bacterial counterparts. Here we report two ...Translation initiation in human mitochondria relies upon specialized mitoribosomes and initiation factors, mtIF2 and mtIF3, which have diverged from their bacterial counterparts. Here we report two distinct mitochondrial pre-initiation assembly steps involving those factors. Single-particle cryo-EM revealed that in the first step, interactions between mitochondria-specific protein mS37 and mtIF3 keep the small mitoribosomal subunit in a conformation favorable for a subsequent accommodation of mtIF2 in the second step. Combination with fluorescence cross-correlation spectroscopy analyses suggests that mtIF3 promotes complex assembly without mRNA or initiator tRNA binding, where exclusion is achieved by the N-terminal and C-terminal domains of mtIF3. Finally, the association of large mitoribosomal subunit is required for initiator tRNA and leaderless mRNA recruitment to form a stable initiation complex. These data reveal fundamental aspects of mammalian protein synthesis that are specific to mitochondria. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_10022.map.gz | 15.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-10022-v30.xml emd-10022.xml | 66.5 KB 66.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_10022_fsc.xml | 17.1 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_10022.png | 129.1 KB | ||
マスクデータ | emd_10022_msk_1.map | 421.9 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-10022.cif.gz | 14.7 KB | ||
その他 | emd_10022_additional.map.gz emd_10022_half_map_1.map.gz emd_10022_half_map_2.map.gz | 390.7 MB 339.6 MB 339.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10022 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10022 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_10022_validation.pdf.gz | 885.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_10022_full_validation.pdf.gz | 885 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_10022_validation.xml.gz | 24.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_10022_validation.cif.gz | 31.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10022 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10022 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_10022.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 421.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Composite map, local resolution filtered | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.83 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_10022_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Overall map without sharpening
ファイル | emd_10022_additional.map | ||||||||||||
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注釈 | Overall map without sharpening | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_10022_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_10022_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : IF2 and IF3 bound mitochondrial translation pre-initiation complex
+超分子 #1: IF2 and IF3 bound mitochondrial translation pre-initiation complex
+超分子 #2: Ribosome
+超分子 #3: IF2
+超分子 #4: IF3
+分子 #1: 12S mitochondrial rRNA
+分子 #2: 28S ribosomal protein S2, mitochondrial
+分子 #3: 28S ribosomal protein S24, mitochondrial
+分子 #4: 28S ribosomal protein S5, mitochondrial
+分子 #5: 28S ribosomal protein S6, mitochondrial
+分子 #6: 28S ribosomal protein S7, mitochondrial
+分子 #7: 28S ribosomal protein S9, mitochondrial
+分子 #8: 28S ribosomal protein S10, mitochondrial
+分子 #9: 28S ribosomal protein S11, mitochondrial
+分子 #10: 28S ribosomal protein S12, mitochondrial
+分子 #11: 28S ribosomal protein S14, mitochondrial
+分子 #12: 28S ribosomal protein S15, mitochondrial
+分子 #13: 28S ribosomal protein S16, mitochondrial
+分子 #14: 28S ribosomal protein S17, mitochondrial
+分子 #15: 28S ribosomal protein S18b, mitochondrial
+分子 #16: 28S ribosomal protein S18c, mitochondrial
+分子 #17: 28S ribosomal protein S21, mitochondrial
+分子 #18: 28S ribosomal protein S22, mitochondrial
+分子 #19: 28S ribosomal protein S23, mitochondrial
+分子 #20: 28S ribosomal protein S25, mitochondrial
+分子 #21: 28S ribosomal protein S26, mitochondrial
+分子 #22: 28S ribosomal protein S27, mitochondrial
+分子 #23: 28S ribosomal protein S28, mitochondrial
+分子 #24: 28S ribosomal protein S29, mitochondrial
+分子 #25: 28S ribosomal protein S31, mitochondrial
+分子 #26: 28S ribosomal protein S33, mitochondrial
+分子 #27: 28S ribosomal protein S34, mitochondrial
+分子 #28: 28S ribosomal protein S35, mitochondrial
+分子 #29: Coiled-coil-helix-coiled-coil-helix domain-containing protein 1
+分子 #30: Aurora kinase A-interacting protein
+分子 #31: Pentatricopeptide repeat domain-containing protein 3, mitochondrial
+分子 #32: Translation initiation factor IF-2, mitochondrial
+分子 #33: Translation initiation factor IF-3, mitochondrial
+分子 #34: NICOTINAMIDE-ADENINE-DINUCLEOTIDE
+分子 #35: SPERMINE
+分子 #36: STREPTOMYCIN
+分子 #37: MAGNESIUM ION
+分子 #38: POTASSIUM ION
+分子 #39: ZINC ION
+分子 #40: FE2/S2 (INORGANIC) CLUSTER
+分子 #41: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #42: PHOSPHOAMINOPHOSPHONIC ACID-GUANYLATE ESTER
+分子 #43: water
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.7 mg/mL | ||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 40 sec. / 詳細: Grid was coated with 3 nm carbon film | ||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - サイズ - 横: 3838 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3710 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 2-20 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 13831 / 平均露光時間: 4.0 sec. / 平均電子線量: 1.5 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 0.25 µm / 倍率(補正後): 165000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |