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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6rw5 | ||||||
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タイトル | Structure of human mitochondrial 28S ribosome in complex with mitochondrial IF2 and IF3 | ||||||
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![]() | RIBOSOME / ribosomal small subunit / initiation complex / initiation factor | ||||||
機能・相同性 | ![]() mitochondrial translational initiation / translation factor activity, RNA binding / mitochondrial ribosome assembly / Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / Mitochondrial translation initiation / negative regulation of mitotic nuclear division / mitochondrial ribosome / ribosome disassembly / mitochondrial small ribosomal subunit ...mitochondrial translational initiation / translation factor activity, RNA binding / mitochondrial ribosome assembly / Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / Mitochondrial translation initiation / negative regulation of mitotic nuclear division / mitochondrial ribosome / ribosome disassembly / mitochondrial small ribosomal subunit / regulation of translational initiation / mitochondrial translation / positive regulation of proteolysis / ribosomal small subunit binding / translation initiation factor activity / Mitochondrial protein degradation / apoptotic signaling pathway / fibrillar center / cell junction / regulation of translation / ribosome binding / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / small ribosomal subunit rRNA binding / nuclear membrane / tRNA binding / cell population proliferation / mitochondrial inner membrane / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / mitochondrial matrix / protein domain specific binding / translation / GTPase activity / intracellular membrane-bounded organelle / mRNA binding / GTP binding / nucleolus / mitochondrion / RNA binding / nucleoplasm / nucleus / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.14 Å | ||||||
Model details | Ribosome small subunit with initiation factors | ||||||
![]() | Itoh, Y. / Khawaja, A. / Rorbach, J. / Amunts, A. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: Distinct pre-initiation steps in human mitochondrial translation. 著者: Anas Khawaja / Yuzuru Itoh / Cristina Remes / Henrik Spåhr / Olessya Yukhnovets / Henning Höfig / Alexey Amunts / Joanna Rorbach / ![]() ![]() 要旨: Translation initiation in human mitochondria relies upon specialized mitoribosomes and initiation factors, mtIF2 and mtIF3, which have diverged from their bacterial counterparts. Here we report two ...Translation initiation in human mitochondria relies upon specialized mitoribosomes and initiation factors, mtIF2 and mtIF3, which have diverged from their bacterial counterparts. Here we report two distinct mitochondrial pre-initiation assembly steps involving those factors. Single-particle cryo-EM revealed that in the first step, interactions between mitochondria-specific protein mS37 and mtIF3 keep the small mitoribosomal subunit in a conformation favorable for a subsequent accommodation of mtIF2 in the second step. Combination with fluorescence cross-correlation spectroscopy analyses suggests that mtIF3 promotes complex assembly without mRNA or initiator tRNA binding, where exclusion is achieved by the N-terminal and C-terminal domains of mtIF3. Finally, the association of large mitoribosomal subunit is required for initiator tRNA and leaderless mRNA recruitment to form a stable initiation complex. These data reveal fundamental aspects of mammalian protein synthesis that are specific to mitochondria. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 2.8 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.9 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.9 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 181.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 294.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-RNA鎖 , 1種, 1分子 A
#1: RNA鎖 | 分子量: 306547.531 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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+28S ribosomal protein ... , 27種, 27分子 BCDEFGHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ01
-タンパク質 , 3種, 3分子 234
#29: タンパク質 | 分子量: 13409.661 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#30: タンパク質 | 分子量: 22395.326 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#31: タンパク質 | 分子量: 78648.547 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-Translation initiation factor IF- ... , 2種, 2分子 78
#32: タンパク質 | 分子量: 77944.203 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() |
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#33: タンパク質 | 分子量: 32545.461 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
-非ポリマー , 10種, 148分子 


















#34: 化合物 | ChemComp-NAD / | ||||||||||||
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#35: 化合物 | ChemComp-SPM / | ||||||||||||
#36: 化合物 | ChemComp-SRY / | ||||||||||||
#37: 化合物 | ChemComp-MG / #38: 化合物 | ChemComp-K / #39: 化合物 | ChemComp-ZN / | #40: 化合物 | #41: 化合物 | ChemComp-ATP / | #42: 化合物 | #43: 水 | ChemComp-HOH / | |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 |
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分子量 | 値: 1.1 MDa / 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.5 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.7 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | 詳細: Grid was coated with 3 nm carbon film / グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 倍率(補正後): 165000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3200 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Calibrated defocus min: 250 nm / 最大 デフォーカス(補正後): 5000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 4 sec. / 電子線照射量: 1.5 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 13831 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
画像スキャン | 横: 3838 / 縦: 3710 / 動画フレーム数/画像: 20 / 利用したフレーム数/画像: 2-20 |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1103314 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.14 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 103165 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 42 / プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL / Target criteria: Cross-correlation coefficient | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 3J9M Accession code: 3J9M / Source name: PDB / タイプ: experimental model |