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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9g3x | |||||||||
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タイトル | Structure of the Partially-assembled gamma-Tubulin Ring Complex from Pig Brain | |||||||||
要素 |
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キーワード | STRUCTURAL PROTEIN / Tubulin Complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 microtubule minus-end binding / microtubule nucleation by interphase microtubule organizing center / gamma-tubulin complex localization / Recruitment of mitotic centrosome proteins and complexes / equatorial microtubule organizing center / gamma-tubulin ring complex / interphase microtubule organizing center / polar microtubule / gamma-tubulin complex / microtubule nucleation ...microtubule minus-end binding / microtubule nucleation by interphase microtubule organizing center / gamma-tubulin complex localization / Recruitment of mitotic centrosome proteins and complexes / equatorial microtubule organizing center / gamma-tubulin ring complex / interphase microtubule organizing center / polar microtubule / gamma-tubulin complex / microtubule nucleation / gamma-tubulin binding / Recruitment of NuMA to mitotic centrosomes / pericentriolar material / cytoplasmic microtubule / mitotic spindle assembly / spindle assembly / cytoplasmic microtubule organization / centriole / meiotic cell cycle / spindle microtubule / neuron migration / brain development / spindle pole / spindle / mitotic cell cycle / microtubule binding / microtubule / centrosome / GTP binding / nucleoplasm / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Sus scrofa (ブタ) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Munoz-Hernandez, H. / Wieczorek, M. | |||||||||
資金援助 | スイス, 2件
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引用 | ジャーナル: Dev Cell / 年: 2024 タイトル: Partial closure of the γ-tubulin ring complex by CDK5RAP2 activates microtubule nucleation. 著者: Yixin Xu / Hugo Muñoz-Hernández / Rościsław Krutyhołowa / Florina Marxer / Ferdane Cetin / Michal Wieczorek / 要旨: Microtubule nucleation is templated by the γ-tubulin ring complex (γ-TuRC), but its structure deviates from the geometry of α-/β-tubulin in the microtubule, explaining the complex's poor ...Microtubule nucleation is templated by the γ-tubulin ring complex (γ-TuRC), but its structure deviates from the geometry of α-/β-tubulin in the microtubule, explaining the complex's poor nucleating activity. Several proteins may activate the γ-TuRC, but the mechanisms underlying activation are not known. Here, we determined the structure of the porcine γ-TuRC purified using CDK5RAP2's centrosomin motif 1 (CM1). We identified an unexpected conformation of the γ-TuRC bound to multiple protein modules containing MZT2, GCP2, and CDK5RAP2, resulting in a long-range constriction of the γ-tubulin ring that brings it in closer agreement with the 13-protofilament microtubule. Additional CDK5RAP2 promoted γ-TuRC decoration and stimulated the microtubule-nucleating activities of the porcine γ-TuRC and a reconstituted, CM1-free human complex in single-molecule assays. Our results provide a structural mechanism for the control of microtubule nucleation by CM1 proteins and identify conformational transitions in the γ-TuRC that prime it for microtubule nucleation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 9g3x.cif.gz | 972.9 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb9g3x.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 9g3x.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 9g3x_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 9g3x_full_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | |
XML形式データ | 9g3x_validation.xml.gz | 97.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 9g3x_validation.cif.gz | 164.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/g3/9g3x ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/g3/9g3x | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-タンパク質 , 2種, 6分子 RPghij
#1: タンパク質 | 分子量: 8285.489 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Sus scrofa (ブタ) / 遺伝子: MZT1 / 発現宿主: Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1VBW8 #6: タンパク質 | 分子量: 51135.562 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Sus scrofa (ブタ) / 遺伝子: TUBG2 / 発現宿主: Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A287BRH5 |
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-Gamma-tubulin complex ... , 4種, 4分子 GHIJ
#2: タンパク質 | 分子量: 102609.703 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Sus scrofa (ブタ) / 発現宿主: Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A8D1IGH3 |
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#3: タンパク質 | 分子量: 103172.477 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Sus scrofa (ブタ) / 遺伝子: TUBGCP3 / 発現宿主: Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: F1RN46 |
#4: タンパク質 | 分子量: 76104.867 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Sus scrofa (ブタ) / 遺伝子: TUBGCP4 / 発現宿主: Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A8D1V2H0 |
#5: タンパク質 | 分子量: 122040.344 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Sus scrofa (ブタ) / 遺伝子: TUBGCP5 / 発現宿主: Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3L738 |
-詳細
Has protein modification | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Gamma-Tubulin Ring Complex in native pig brain / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2900 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 900 nm |
撮影 | 電子線照射量: 55 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||
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3次元再構成 | 解像度: 4.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 29893 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: BACKBONE TRACE / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 441.41 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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