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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8oiq | ||||||||||||
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タイトル | 39S mammalian mitochondrial large ribosomal subunit with mtRF1 and P-site tRNA | ||||||||||||
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![]() | RIBOSOME / mammalian mitochondrial ribosome / release factor mtRF1 / non-canonical stop codon | ||||||||||||
機能・相同性 | ![]() Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / translation release factor activity / mitochondrial translational elongation / mitochondrial translational termination / ribonuclease III activity / microprocessor complex / translation release factor activity, codon nonspecific / translation release factor activity, codon specific / Mitochondrial protein degradation ...Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / translation release factor activity / mitochondrial translational elongation / mitochondrial translational termination / ribonuclease III activity / microprocessor complex / translation release factor activity, codon nonspecific / translation release factor activity, codon specific / Mitochondrial protein degradation / mitochondrial large ribosomal subunit / peptidyl-tRNA hydrolase / mitochondrial small ribosomal subunit / aminoacyl-tRNA hydrolase activity / mitochondrial ribosome / mitochondrial translation / organelle membrane / RNA processing / rescue of stalled ribosome / cellular response to leukemia inhibitory factor / double-stranded RNA binding / cell junction / small ribosomal subunit rRNA binding / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / nuclear body / rRNA binding / negative regulation of translation / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / cell cycle / protein domain specific binding / nucleotide binding / mRNA binding / synapse / mitochondrion / RNA binding / nucleoplasm / nucleus / plasma membrane / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | ||||||||||||
![]() | Saurer, M. / Leibundgut, M. / Scaiola, A. / Schoenhut, T. / Ban, N. | ||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Molecular basis of translation termination at noncanonical stop codons in human mitochondria. 著者: Martin Saurer / Marc Leibundgut / Hima Priyanka Nadimpalli / Alain Scaiola / Tanja Schönhut / Richard G Lee / Stefan J Siira / Oliver Rackham / René Dreos / Tea Lenarčič / Eva Kummer / ...著者: Martin Saurer / Marc Leibundgut / Hima Priyanka Nadimpalli / Alain Scaiola / Tanja Schönhut / Richard G Lee / Stefan J Siira / Oliver Rackham / René Dreos / Tea Lenarčič / Eva Kummer / David Gatfield / Aleksandra Filipovska / Nenad Ban / ![]() ![]() ![]() 要旨: The genetic code that specifies the identity of amino acids incorporated into proteins during protein synthesis is almost universally conserved. Mitochondrial genomes feature deviations from the ...The genetic code that specifies the identity of amino acids incorporated into proteins during protein synthesis is almost universally conserved. Mitochondrial genomes feature deviations from the standard genetic code, including the reassignment of two arginine codons to stop codons. The protein required for translation termination at these noncanonical stop codons to release the newly synthesized polypeptides is not currently known. In this study, we used gene editing and ribosomal profiling in combination with cryo-electron microscopy to establish that mitochondrial release factor 1 (mtRF1) detects noncanonical stop codons in human mitochondria by a previously unknown mechanism of codon recognition. We discovered that binding of mtRF1 to the decoding center of the ribosome stabilizes a highly unusual conformation in the messenger RNA in which the ribosomal RNA participates in specific recognition of the noncanonical stop codons. | ||||||||||||
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 2.1 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 2.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 251 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 410.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 16896MC ![]() 8oinC ![]() 8oipC ![]() 8oirC ![]() 8oisC ![]() 8oitC C: 同じ文献を引用 ( M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
+Mitochondrial ribosomal protein ... , 24種, 29分子 B1B2B3B4B5B6BEBFBHBLBNBOBPBQBSBWBYBZBbBdBeBhBmBnBoBpBuBvBy
-RNA鎖 , 4種, 4分子 B7B8B9AG
#2: RNA鎖 | 分子量: 894.612 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: likely the CCA-end of a tRNA / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#3: RNA鎖 | 分子量: 504908.156 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 詳細: Corresponds to GenBank sequence ID NC_012095.1 (positions 1099-2669) 由来: (天然) ![]() ![]() |
#4: RNA鎖 | 分子量: 23516.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#56: RNA鎖 | 分子量: 22664.498 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 詳細: Corresponds to GenBank sequence ID LC530718.1 (positions 1-71). In vitro transcribed human tRNA with formyl-methionine attached to the CCA-end of the tRNA. 由来: (合成) ![]() |
-Large ribosomal subunit protein ... , 6種, 6分子 BABGBIBJBsBz
#5: タンパク質 | 分子量: 24313.357 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#11: タンパク質 | 分子量: 18921.100 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#13: タンパク質 | 分子量: 7508.097 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#14: タンパク質 | 分子量: 10871.729 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#48: タンパク質 | 分子量: 17622.951 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#55: タンパク質 | 分子量: 15249.048 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-39S ribosomal protein ... , 12種, 12分子 BBBDBKBRBTBXBaBiBjBqBwBx
#6: タンパク質 | 分子量: 17685.244 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#8: タンパク質 | 分子量: 15943.688 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#15: タンパク質 | 分子量: 21548.543 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#22: タンパク質 | 分子量: 22988.566 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#24: タンパク質 | 分子量: 33481.723 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#28: タンパク質 | 分子量: 34528.809 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#31: タンパク質 | 分子量: 17989.559 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#39: タンパク質 | 分子量: 49100.504 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#40: タンパク質 | 分子量: 34372.883 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#46: タンパク質 | 分子量: 15073.404 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#52: タンパク質 | 分子量: 29942.523 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#53: タンパク質 | 分子量: 18957.779 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: NCBI Reference Sequence: NP_001231942.1 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-タンパク質 , 11種, 11分子 BCBMBUBVBcBfBgBlBrBtAa
#7: タンパク質 | 分子量: 24893.529 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#17: タンパク質 | 分子量: 43708.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#25: タンパク質 | 分子量: 28680.531 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: NCBI Reference Sequence: NP_001231896.1 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#26: タンパク質 | 分子量: 19268.178 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#33: タンパク質 | 分子量: 15957.357 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: NCBI Reference Sequence: XP_003123104.1 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#36: タンパク質 | 分子量: 23545.873 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#37: タンパク質 | 分子量: 25815.031 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#41: タンパク質 | 分子量: 10841.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#47: タンパク質 | 分子量: 16680.178 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#49: タンパク質 | 分子量: 37527.195 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#57: タンパク質 | 分子量: 55569.742 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: Human mitochondrial release factor 1 (mtRF1), with a C-terminal linker (GGSGGSG) and a 3xFLAG-tag (DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK), expressed from a pcDNA3.1(+) plasmid in HEK293 EBNA cells. 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
-非ポリマー , 6種, 240分子 ![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/K.gif)
![](data/chem/img/PHE.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/FES.gif)
![](data/chem/img/FME.gif)
![](data/chem/img/K.gif)
![](data/chem/img/PHE.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/FES.gif)
![](data/chem/img/FME.gif)
#58: 化合物 | ChemComp-MG / #59: 化合物 | ChemComp-K / #60: 化合物 | ChemComp-PHE / | #61: 化合物 | #62: 化合物 | ChemComp-FES / | #63: 化合物 | ChemComp-FME / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: 39S mammalian mitochondrial ribosome with mtRF1 and P-site tRNAMet タイプ: RIBOSOME 詳細: Mammalian mitochondrial translation termination complex, in vitro reconstituted from porcine mitoribosomal subunits, human mtRF1-3xFLAG, human methionine-tRNA(formyl-methionine), and a ...詳細: Mammalian mitochondrial translation termination complex, in vitro reconstituted from porcine mitoribosomal subunits, human mtRF1-3xFLAG, human methionine-tRNA(formyl-methionine), and a synthetic mRNA (5'-A AUG AGA CAA-3') containing the non-canonical stop codon AGA. Refined with focus on the large subunit. Entity ID: #1-#47, #49-#57 / 由来: NATURAL | ||||||||||||||||||||
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分子量 | 値: 1.5 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() | ||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 20mM HEPES-KOH pH=7.5, 100mM KCl, 20mM MgCl2, ~1% sucrose (from mtRF1 storage buffer) | ||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: In vitro reconstituted complex (55S). Focused refinement on large subunit. | ||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 | ||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE-PROPANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 81000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 600 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 60 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 6973 |
電子光学装置 | エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
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解析
EMソフトウェア |
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画像処理 | 詳細: Micrographs were motion corrected and CTF parameters were estimated using Cryosparc live v4. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1471587 詳細: Particles were picked with blob picker in Cryosparc live v4. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 50622 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 3D fitting-ID: 1
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