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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7aho | ||||||||||||
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タイトル | RUVBL1-RUVBL2 heterohexameric ring after binding of RNA helicase DHX34 | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSLATION / RUVBL1-RUVBL2 / DHX34 / Nonsense-Mediated mRNA Decay / RNA degradation / Cryo-EM | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 promoter-enhancer loop anchoring activity / regulation of DNA strand elongation / positive regulation of telomere maintenance in response to DNA damage / establishment of protein localization to chromatin / R2TP complex / dynein axonemal particle / RPAP3/R2TP/prefoldin-like complex / Swr1 complex / positive regulation of telomerase RNA localization to Cajal body / regulation of double-strand break repair ...promoter-enhancer loop anchoring activity / regulation of DNA strand elongation / positive regulation of telomere maintenance in response to DNA damage / establishment of protein localization to chromatin / R2TP complex / dynein axonemal particle / RPAP3/R2TP/prefoldin-like complex / Swr1 complex / positive regulation of telomerase RNA localization to Cajal body / regulation of double-strand break repair / Ino80 complex / Telomere Extension By Telomerase / protein folding chaperone complex / box C/D snoRNP assembly / regulation of chromosome organization / NuA4 histone acetyltransferase complex / regulation of DNA replication / TFIID-class transcription factor complex binding / regulation of embryonic development / MLL1 complex / positive regulation of double-strand break repair via homologous recombination / positive regulation of DNA repair / RNA polymerase II core promoter sequence-specific DNA binding / regulation of DNA repair / Deposition of new CENPA-containing nucleosomes at the centromere / cellular response to estradiol stimulus / TBP-class protein binding / DNA helicase activity / telomere maintenance / Formation of the beta-catenin:TCF transactivating complex / DNA Damage Recognition in GG-NER / negative regulation of canonical Wnt signaling pathway / euchromatin / chromatin DNA binding / ADP binding / nuclear matrix / beta-catenin binding / positive regulation of canonical Wnt signaling pathway / transcription corepressor activity / UCH proteinases / cellular response to UV / nucleosome / unfolded protein binding / protein folding / ATPase binding / HATs acetylate histones / spermatogenesis / DNA helicase / DNA recombination / regulation of apoptotic process / transcription coactivator activity / chromatin remodeling / protein stabilization / regulation of cell cycle / Ub-specific processing proteases / cadherin binding / ribonucleoprotein complex / RNA polymerase II cis-regulatory region sequence-specific DNA binding / cell division / DNA repair / centrosome / regulation of transcription by RNA polymerase II / positive regulation of DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / protein homodimerization activity / ATP hydrolysis activity / extracellular exosome / nucleoplasm / ATP binding / identical protein binding / membrane / nucleus / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.18 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Lopez-Perrote, A. / Rodriguez, C.F. / Llorca, O. | ||||||||||||
資金援助 | スペイン, 3件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2020 タイトル: Regulation of RUVBL1-RUVBL2 AAA-ATPases by the nonsense-mediated mRNA decay factor DHX34, as evidenced by Cryo-EM. 著者: Andres López-Perrote / Nele Hug / Ana González-Corpas / Carlos F Rodríguez / Marina Serna / Carmen García-Martín / Jasminka Boskovic / Rafael Fernandez-Leiro / Javier F Caceres / Oscar Llorca / 要旨: Nonsense-mediated mRNA decay (NMD) is a surveillance pathway that degrades aberrant mRNAs and also regulates the expression of a wide range of physiological transcripts. RUVBL1 and RUVBL2 AAA-ATPases ...Nonsense-mediated mRNA decay (NMD) is a surveillance pathway that degrades aberrant mRNAs and also regulates the expression of a wide range of physiological transcripts. RUVBL1 and RUVBL2 AAA-ATPases form an hetero-hexameric ring that is part of several macromolecular complexes such as INO80, SWR1, and R2TP. Interestingly, RUVBL1-RUVBL2 ATPase activity is required for NMD activation by an unknown mechanism. Here, we show that DHX34, an RNA helicase regulating NMD initiation, directly interacts with RUVBL1-RUVBL2 in vitro and in cells. Cryo-EM reveals that DHX34 induces extensive changes in the N-termini of every RUVBL2 subunit in the complex, stabilizing a conformation that does not bind nucleotide and thereby down-regulates ATP hydrolysis of the complex. Using ATPase-deficient mutants, we find that DHX34 acts exclusively on the RUVBL2 subunits. We propose a model, where DHX34 acts to couple RUVBL1-RUVBL2 ATPase activity to the assembly of factors required to initiate the NMD response. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7aho.cif.gz | 315.8 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7aho.ent.gz | 256.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7aho.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7aho_validation.pdf.gz | 926 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7aho_full_validation.pdf.gz | 942.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | 7aho_validation.xml.gz | 56.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7aho_validation.cif.gz | 84.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ah/7aho ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ah/7aho | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 52710.406 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RUVBL1, INO80H, NMP238, TIP49, TIP49A / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q9Y265, DNA helicase #2: タンパク質 | 分子量: 53047.488 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RUVBL2, INO80J, TIP48, TIP49B, CGI-46 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q9Y230, DNA helicase #3: 化合物 | 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: RUVBL1-RUVBL2 heterohexameric ring after binding of RNA helicase DHX34 タイプ: COMPLEX 詳細: Structure of the RUVBL1-RUVBL2 hetero-hexameric ring region after the interaction of RNA helicase DHX34 Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 0.44928 kDa/nm / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 株: BL21 (DE3) |
緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 50 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM NaCl |
緩衝液成分 | 単位: mM / 名称: TBS / 式: Tris-NaCl |
試料 | 濃度: 0.35 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(補正後): 47756 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 nm / Cs: 2.7 mm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 48.1 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 3047 |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 40 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.14_3260: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 353057 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.18 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 101774 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 2XSZ | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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