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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6wti | ||||||
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タイトル | The Cryo-EM structure of the ubiquinol oxidase from Escherichia coli | ||||||
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機能・相同性 | ![]() cytochrome bo3 ubiquinol oxidase activity => GO:0009486 / cytochrome o ubiquinol oxidase complex / oxidoreduction-driven active transmembrane transporter activity / ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | ||||||
手法 | ![]() ![]() ![]() | ||||||
![]() | Su, C.-C. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: A 'Build and Retrieve' methodology to simultaneously solve cryo-EM structures of membrane proteins. 著者: Chih-Chia Su / Meinan Lyu / Christopher E Morgan / Jani Reddy Bolla / Carol V Robinson / Edward W Yu / ![]() ![]() 要旨: Single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM) has become a powerful technique in the field of structural biology. However, the inability to reliably produce pure, homogeneous membrane protein ...Single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM) has become a powerful technique in the field of structural biology. However, the inability to reliably produce pure, homogeneous membrane protein samples hampers the progress of their structural determination. Here, we develop a bottom-up iterative method, Build and Retrieve (BaR), that enables the identification and determination of cryo-EM structures of a variety of inner and outer membrane proteins, including membrane protein complexes of different sizes and dimensions, from a heterogeneous, impure protein sample. We also use the BaR methodology to elucidate structural information from Escherichia coli K12 crude membrane and raw lysate. The findings demonstrate that it is possible to solve high-resolution structures of a number of relatively small (<100 kDa) and less abundant (<10%) unidentified membrane proteins within a single, heterogeneous sample. Importantly, these results highlight the potential of cryo-EM for systems structural proteomics. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 236.5 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 183.2 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-Cytochrome o ubiquinol oxidase, subunit ... , 2種, 2分子 AD
#1: タンパク質 | 分子量: 74424.469 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() 参照: UniProt: H4KCU1, UniProt: P0ABI8*PLUS, ![]() |
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#4: タンパク質 | 分子量: 12037.402 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() 参照: UniProt: I2RK84, UniProt: P0ABJ6*PLUS, ![]() |
-タンパク質 , 2種, 2分子 BC
#2: タンパク質 | ![]() 分子量: 34947.203 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() |
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#3: タンパク質 | 分子量: 22642.566 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() |
-非ポリマー , 6種, 14分子 ![](data/chem/img/HEM.gif)
![](data/chem/img/HEO.gif)
![](data/chem/img/CU.gif)
![](data/chem/img/UQ8.gif)
![](data/chem/img/3PE.gif)
![](data/chem/img/U9V.gif)
![](data/chem/img/HEO.gif)
![](data/chem/img/CU.gif)
![](data/chem/img/UQ8.gif)
![](data/chem/img/3PE.gif)
![](data/chem/img/U9V.gif)
#5: 化合物 | ChemComp-HEM / ![]() | ||
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#6: 化合物 | ChemComp-HEO / ![]() | ||
#7: 化合物 | ChemComp-CU / ![]() | ||
#8: 化合物 | ChemComp-UQ8 / | ||
#9: 化合物 | ChemComp-3PE / ![]() #10: 化合物 | ChemComp-U9V / | |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: ![]() |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: ![]() |
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試料調製
構成要素 | 名称: ubiquinol oxidase![]() |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 濃度: 0.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色![]() ![]() |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結![]() | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源![]() ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD![]() |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
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解析
CTF補正![]() | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
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3次元再構成![]() | 解像度: 2.38 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 334222 / 対称性のタイプ: POINT |