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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6vz4 | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of Sth1-Arp7-Arp9-Rtt102 bound to the nucleosome in ADP Beryllium Fluoride state | ||||||
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![]() | MOTOR PROTEIN / Chromatin remodeling / Nucleosome / Gene Regulation | ||||||
機能・相同性 | ![]() RHO GTPases activate IQGAPs / RHO GTPases Activate WASPs and WAVEs / Regulation of actin dynamics for phagocytic cup formation / chromatin remodeling at centromere / Platelet degranulation / DNA translocase activity / nucleosome disassembly / RSC-type complex / ATP-dependent chromatin remodeler activity / SWI/SNF complex ...RHO GTPases activate IQGAPs / RHO GTPases Activate WASPs and WAVEs / Regulation of actin dynamics for phagocytic cup formation / chromatin remodeling at centromere / Platelet degranulation / DNA translocase activity / nucleosome disassembly / RSC-type complex / ATP-dependent chromatin remodeler activity / SWI/SNF complex / NuA4 histone acetyltransferase complex / chromosome, centromeric region / anatomical structure morphogenesis / ATP-dependent activity, acting on DNA / cytoskeleton organization / helicase activity / meiotic cell cycle / chromosome segregation / transcription elongation by RNA polymerase II / lysine-acetylated histone binding / base-excision repair / structural constituent of chromatin / nucleosome / double-strand break repair / nucleosome assembly / chromatin organization / DNA helicase / chromatin remodeling / protein heterodimerization activity / chromatin binding / regulation of DNA-templated transcription / chromatin / regulation of transcription by RNA polymerase II / structural molecule activity / ATP hydrolysis activity / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / DNA binding / ATP binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() synthetic construct (人工物) ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | ||||||
![]() | Leschziner, A.E. / Baker, R.W. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural insights into assembly and function of the RSC chromatin remodeling complex. 著者: Richard W Baker / Janice M Reimer / Peter J Carman / Bengi Turegun / Tsutomu Arakawa / Roberto Dominguez / Andres E Leschziner / ![]() 要旨: SWI/SNF chromatin remodelers modify the position and spacing of nucleosomes and, in humans, are linked to cancer. To provide insights into the assembly and regulation of this protein family, we ...SWI/SNF chromatin remodelers modify the position and spacing of nucleosomes and, in humans, are linked to cancer. To provide insights into the assembly and regulation of this protein family, we focused on a subcomplex of the Saccharomyces cerevisiae RSC comprising its ATPase (Sth1), the essential actin-related proteins (ARPs) Arp7 and Arp9 and the ARP-binding protein Rtt102. Cryo-EM and biochemical analyses of this subcomplex shows that ARP binding induces a helical conformation in the helicase-SANT-associated (HSA) domain of Sth1. Surprisingly, the ARP module is rotated 120° relative to the full RSC about a pivot point previously identified as a regulatory hub in Sth1, suggesting that large conformational changes are part of Sth1 regulation and RSC assembly. We also show that a conserved interaction between Sth1 and the nucleosome acidic patch enhances remodeling. As some cancer-associated mutations dysregulate rather than inactivate SWI/SNF remodelers, our insights into RSC complex regulation advance a mechanistic understanding of chromatin remodeling in disease states. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 4.7 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 4.1 MB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.7 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.9 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 465.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 754.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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モデル数 | 10 |
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要素
-タンパク質 , 8種, 12分子 AEBFCGDHKLMN
#1: タンパク質 | 分子量: 15407.075 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: hist1h3g, h3c8, H3l / 発現宿主: ![]() ![]() #2: タンパク質 | 分子量: 11394.426 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() #3: タンパク質 | 分子量: 14109.436 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: hist1h2aj, LOC494591, XELAEV_18003602mg / 発現宿主: ![]() ![]() #4: タンパク質 | 分子量: 13810.048 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: H2B, XELAEV_18028547mg / 発現宿主: ![]() ![]() #7: タンパク質 | | 分子量: 95105.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: STH1, NPS1, YIL126W / 発現宿主: ![]() ![]() #8: タンパク質 | | 分子量: 53863.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: ARP7, SWP61, YPR034W, YP9367.14 / 発現宿主: ![]() ![]() #9: タンパク質 | | 分子量: 53131.930 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: ARP9 / 発現宿主: ![]() ![]() #10: タンパク質 | | 分子量: 17817.615 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RTT102, YGR275W, G9378 / 発現宿主: ![]() ![]() |
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-DNA鎖 , 2種, 2分子 IJ
#5: DNA鎖 | 分子量: 56840.203 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: ![]() ![]() |
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#6: DNA鎖 | 分子量: 57400.555 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: ![]() ![]() |
-非ポリマー , 4種, 4分子 ![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/ADP.gif)
![](data/chem/img/BEF.gif)
![](data/chem/img/ATP.gif)
![](data/chem/img/ADP.gif)
![](data/chem/img/BEF.gif)
![](data/chem/img/ATP.gif)
#11: 化合物 | ChemComp-MG / |
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#12: 化合物 | ChemComp-ADP / |
#13: 化合物 | ChemComp-BEF / |
#14: 化合物 | ChemComp-ATP / |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 |
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分子量 | 値: 0.44 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: Sample was crosslinked using the GRAFIX protocol | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | 詳細: Glow discharge for 30 seconds at 25 mAmp / グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: UltrAuFoil | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K / 詳細: 4 second blot time, blot force 20 |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TALOS ARCTICA |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 36000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN |
撮影 | 平均露光時間: 7 sec. / 電子線照射量: 53 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 45 |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 293940 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL 詳細: Initial model docking was done in Chimera. Phenix.real_space_refine was used to refine the nucleosome model. Sth1-Arp7-Arp9-Rtt102 were refined in Rosetta and the top ten models were deposited. | ||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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