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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5352 | |||||||||
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タイトル | Structure of a type III secretion needle | |||||||||
マップデータ | This is an reconstruction of the type III secretion needle | |||||||||
試料 |
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キーワード | type III secretion system / needle / helical filament | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 type III protein secretion system complex / protein secretion by the type III secretion system / cell surface / extracellular region / identical protein binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Shigella flexneri (フレクスナー赤痢菌) | |||||||||
手法 | らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Fujii T / Cheung M / Blanco A / Kato T / Blocker AJ / Namba K | |||||||||
引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2012 タイトル: Structure of a type III secretion needle at 7-Å resolution provides insights into its assembly and signaling mechanisms. 著者: Takashi Fujii / Martin Cheung / Amandine Blanco / Takayuki Kato / Ariel J Blocker / Keiichi Namba / 要旨: Type III secretion systems of Gram-negative bacteria form injection devices that deliver effector proteins into eukaryotic cells during infection. They span both bacterial membranes and the ...Type III secretion systems of Gram-negative bacteria form injection devices that deliver effector proteins into eukaryotic cells during infection. They span both bacterial membranes and the extracellular space to connect with the host cell plasma membrane. Their extracellular portion is a needle-like, hollow tube that serves as a secretion conduit for effector proteins. The needle of Shigella flexneri is approximately 50-nm long and 7-nm thick and is made by the helical assembly of one protein, MxiH. We provide a 7-Å resolution 3D image reconstruction of the Shigella needle by electron cryomicroscopy, which resolves α-helices and a β-hairpin that has never been observed in the crystal and solution structures of needle proteins, including MxiH. An atomic model of the needle based on the 3D-density map, in comparison with that of the bacterial-flagellar filament, provides insights into how such a thin tubular structure is stably assembled by intricate intermolecular interactions. The map also illuminates how the needle-length control protein functions as a ruler within the central channel during export of MxiH for assembly at the distal end of the needle, and how the secretion-activation signal may be transduced through a conformational change of the needle upon host-cell contact. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5352.map.gz | 3.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5352-v30.xml emd-5352.xml | 9.5 KB 9.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_5352_1.jpg | 61.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5352 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5352 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_5352_validation.pdf.gz | 381.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_5352_full_validation.pdf.gz | 381 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_5352_validation.xml.gz | 5.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5352 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5352 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5352.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 3.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | This is an reconstruction of the type III secretion needle | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.68 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Shigella needle
全体 | 名称: Shigella needle |
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要素 |
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-超分子 #1000: Shigella needle
超分子 | 名称: Shigella needle / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: helical assembly of MxiH / Number unique components: 1 |
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-分子 #1: MxiH
分子 | 名称: MxiH / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: MxiH / 組換発現: Yes / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Shigella flexneri (フレクスナー赤痢菌) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | らせん対称体再構成法 |
試料の集合状態 | filament |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 20 mM Tris, pH 7.4, 150 mM NaCl, 2mM MgSO4 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: OTHER / 詳細: Vitrification instrument: Vitrobot / 手法: Blot for 3.5 seconds before plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 3200FSC |
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温度 | 最低: 50 K / 最高: 60 K / 平均: 50 K |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: JEOL Omega filter エネルギーフィルター - エネルギー下限: 0.0 eV エネルギーフィルター - エネルギー上限: 10.0 eV |
日付 | 2008年7月2日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F415 (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 15 µm / 実像数: 330 / 平均電子線量: 20 e/Å2 / ビット/ピクセル: 16 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 89285 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 1.6 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: top entry / 試料ホルダーモデル: OTHER |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 4.30 Å 想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: 64.06 ° アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 7.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPIDER |
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CTF補正 | 詳細: CTFFIND3 Each particle |