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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-51017 | |||||||||
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タイトル | Structure of the Partially-assembled gamma-Tubulin Ring Complex from Pig Brain | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Tubulin Complex / STRUCTURAL PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 microtubule minus-end binding / microtubule nucleation by interphase microtubule organizing center / Recruitment of mitotic centrosome proteins and complexes / gamma-tubulin complex localization / equatorial microtubule organizing center / gamma-tubulin ring complex / interphase microtubule organizing center / polar microtubule / gamma-tubulin complex / microtubule nucleation ...microtubule minus-end binding / microtubule nucleation by interphase microtubule organizing center / Recruitment of mitotic centrosome proteins and complexes / gamma-tubulin complex localization / equatorial microtubule organizing center / gamma-tubulin ring complex / interphase microtubule organizing center / polar microtubule / gamma-tubulin complex / microtubule nucleation / gamma-tubulin binding / Recruitment of NuMA to mitotic centrosomes / pericentriolar material / cytoplasmic microtubule / mitotic spindle assembly / spindle assembly / cytoplasmic microtubule organization / centriole / meiotic cell cycle / spindle microtubule / neuron migration / brain development / spindle / spindle pole / mitotic cell cycle / microtubule binding / microtubule / centrosome / GTP binding / nucleoplasm / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Sus scrofa (ブタ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Munoz-Hernandez H / Wieczorek M | |||||||||
資金援助 | スイス, 2件
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引用 | ジャーナル: Dev Cell / 年: 2024 タイトル: Partial closure of the γ-tubulin ring complex by CDK5RAP2 activates microtubule nucleation. 著者: Yixin Xu / Hugo Muñoz-Hernández / Rościsław Krutyhołowa / Florina Marxer / Ferdane Cetin / Michal Wieczorek / 要旨: Microtubule nucleation is templated by the γ-tubulin ring complex (γ-TuRC), but its structure deviates from the geometry of α-/β-tubulin in the microtubule, explaining the complex's poor ...Microtubule nucleation is templated by the γ-tubulin ring complex (γ-TuRC), but its structure deviates from the geometry of α-/β-tubulin in the microtubule, explaining the complex's poor nucleating activity. Several proteins may activate the γ-TuRC, but the mechanisms underlying activation are not known. Here, we determined the structure of the porcine γ-TuRC purified using CDK5RAP2's centrosomin motif 1 (CM1). We identified an unexpected conformation of the γ-TuRC bound to multiple protein modules containing MZT2, GCP2, and CDK5RAP2, resulting in a long-range constriction of the γ-tubulin ring that brings it in closer agreement with the 13-protofilament microtubule. Additional CDK5RAP2 promoted γ-TuRC decoration and stimulated the microtubule-nucleating activities of the porcine γ-TuRC and a reconstituted, CM1-free human complex in single-molecule assays. Our results provide a structural mechanism for the control of microtubule nucleation by CM1 proteins and identify conformational transitions in the γ-TuRC that prime it for microtubule nucleation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_51017.map.gz | 108.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-51017-v30.xml emd-51017.xml | 22.5 KB 22.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_51017_fsc.xml | 12.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_51017.png | 71 KB | ||
Filedesc metadata | emd-51017.cif.gz | 8 KB | ||
その他 | emd_51017_half_map_1.map.gz emd_51017_half_map_2.map.gz | 200.2 MB 200.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-51017 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-51017 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_51017_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_51017_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_51017_validation.xml.gz | 21.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_51017_validation.cif.gz | 28.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-51017 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-51017 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_51017.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.4133 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_51017_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_51017_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Gamma-Tubulin Ring Complex in native pig brain
全体 | 名称: Gamma-Tubulin Ring Complex in native pig brain |
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要素 |
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-超分子 #1: Gamma-Tubulin Ring Complex in native pig brain
超分子 | 名称: Gamma-Tubulin Ring Complex in native pig brain / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
-分子 #1: Mitotic spindle organizing protein 1
分子 | 名称: Mitotic spindle organizing protein 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
分子量 | 理論値: 8.285489 KDa |
組換発現 | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
配列 | 文字列: MAGNSGSGAA AAANLNAVRE TMDVLLEISR ILNTGLDMET LSICVRLCEQ GINPEALSSV IKELRKATEA LKAAENMTS UniProtKB: Mitotic spindle organizing protein 1 |
-分子 #2: Gamma-tubulin complex component
分子 | 名称: Gamma-tubulin complex component / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
分子量 | 理論値: 102.609703 KDa |
組換発現 | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
配列 | 文字列: MSEFRIHHDV NELLSLLRVH GGDGAEVYID LLQKNRTPYV TTTVSAHSAK VKIAEFSRTP EDFLKKYDEL KSKNTRNLDP LVYLLSKLM EDRETLQYLQ QNAKERAELA ASAAASSTAS FGASATASKI SMQELEELRK QLGSVATGPT WQQSLELTRK M LRDKQSKK ...文字列: MSEFRIHHDV NELLSLLRVH GGDGAEVYID LLQKNRTPYV TTTVSAHSAK VKIAEFSRTP EDFLKKYDEL KSKNTRNLDP LVYLLSKLM EDRETLQYLQ QNAKERAELA ASAAASSTAS FGASATASKI SMQELEELRK QLGSVATGPT WQQSLELTRK M LRDKQSKK NSGQRLPVLP AWVYERPALL GDFLPGTGGS ADTAVPIGSL PLASQEAAVV EDLLYVLVGV DGRYISAQPL TG RQGRTFL VDPNLDLSIR ELVSRILPVA ASYSTVTRFI EEKSSFEYGQ VNHALAAAMR TLVKEYLVLV TQLEQLQRQG LLS LQKLWF YIQPAMRSLD ILASLATSVD KGECIGGATL SLLHDRSFSY TGDSQAQELC LHLTKAASTP YFEILEKWIY RGII DDPYS EFMVEEHELR KEKIQEDYND KYWDQRYTVV QRQIPSFLQK MAGKVLSTGK YLNVVRECGH DVTCPVAKEV VYTLK ERAY VEQIEKAFSY ASKVLLDFLM GEKELLAHLR SIKRYFLMDQ GDFFVHFMDL TEEELKKPVD DITPTRLEAL LELALR MST ANTDPFKDDL KIDLMPHDLI TQLLRVLAIE TQQEKAMVHA DPTELTLSGL EAFSFDYVVT WPLSLIINRK ALTRYQM LF RHMFYCKHVE RQLCSVWISN KAAKRFSLHS AKWFAGAFTL RQRMLNFVQN IQSYMMFEVM EPTWHVLEQN LRSASNID D VLGHHASFLD NCLKDCMLTN PELLRVFSKL MSVCVMFTNC LQRFTQSMKL DSELGHPALE PGAMLGPPTE AERAEERAR KELARKCLAE HVDAPQLASS FEATITKFDK NFSAHLLDLL ARLSIYSTSD CEHGMASVIS RLDFNGFYTE RLERLSAERS QKAAPPVPG PRGPPALVPR VAVTAQ UniProtKB: Gamma-tubulin complex component |
-分子 #3: Gamma-tubulin complex component 3
分子 | 名称: Gamma-tubulin complex component 3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
分子量 | 理論値: 103.172477 KDa |
組換発現 | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
配列 | 文字列: MATPDQKSPN VLLQNLCCRI LGKSEADVAQ QFQYAVRVIG SNFAPTVERD EFLVAEKIKK ELTRQRREAD AALFSELHRK LHSQGVLKN KWSILYLLLS LSEDPRKQPS KVSGYAALFA QALPRDAHST PYYYARPQSL PLNYQERGAP SAQSAGSAGS S GVSSLGTY ...文字列: MATPDQKSPN VLLQNLCCRI LGKSEADVAQ QFQYAVRVIG SNFAPTVERD EFLVAEKIKK ELTRQRREAD AALFSELHRK LHSQGVLKN KWSILYLLLS LSEDPRKQPS KVSGYAALFA QALPRDAHST PYYYARPQSL PLNYQERGAP SAQSAGSAGS S GVSSLGTY ALNGPTPPPP PPALLPGQPL PAPGVGDGLR QQLGSRLAWT LTASQPSLPS TTSKAVPSSG SRGAARPRRE GD AAAGAVE VTEAALVRDI LYVFQGIDGK HVKMSNADNC YTVEGKANLS KSLRDTAVRL AELGWLHNKI RKYTDQRSLD RSF GLVGQS FCAALHQELR EYYRLLSVLH SQLQLEDDQG VNLGLESSLT LRRLLVWTYD PKMRLKTLAA LVDHCQGRKG GELA SAVHA YTKTGDPYAR SLVQHILSLV SHPVLSFLYR WIYDGELEDT YHEFFVASDP AVKADRLWHD KYALRKPMIP SFMTM DQCR KVLLIGKSIN FLHQVCHDQT PTTKMIAVTK SAESPQDAAD LFTDLENAFQ GKIDAAYFET SKYLLDVLNK KYSLLD HMQ AMRRYLLLGQ GDFIRHLMDL LKPELVRPAT TLYQHNLTGI LETAVRATNA QFDSPEILKR LDVRLLEVSP GDTGWDV FS LDYHVDGPIA TVFTRECMSH YLRAFNFLWR AKRVEYILTD IRKGHMCNAR LLRSMPEFSG VLHHCHILAS EMVHFIHQ M QYYVTFEVLE CSWDELWNRV QRAQDLDHII AAHEAFLGTV ISRCLLDSDS RALLNQLRAV FDQIIELQNT QDAIYRAAL EELQRRLQFE EKKKQREAEG QWGVSAAEEE QEKRRVQEFQ ESIPKMCSQL RILTHFYQGV VQQFLVSLTT SSDESLRFLS FRLDFNEHY RAREPRLRVS LGTRGRRSSH T UniProtKB: Gamma-tubulin complex component 3 |
-分子 #4: Gamma-tubulin complex component
分子 | 名称: Gamma-tubulin complex component / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
分子量 | 理論値: 76.104867 KDa |
組換発現 | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
配列 | 文字列: MIHELLLALS GYPGSIFTWN KRGGLQVSQD FPFLHPSETS VLNRLCRLGT DYIRFTEFIE QYTGHVQQQD HHPSQQGQGG LHGIYLRAF CTGLDSVLQP YRQALLDLEQ EFLADPHLSI SHINYSLDQF QLLFPSVMVV VEQIKSQKIH GCQILETVYK H SCGGLPPV ...文字列: MIHELLLALS GYPGSIFTWN KRGGLQVSQD FPFLHPSETS VLNRLCRLGT DYIRFTEFIE QYTGHVQQQD HHPSQQGQGG LHGIYLRAF CTGLDSVLQP YRQALLDLEQ EFLADPHLSI SHINYSLDQF QLLFPSVMVV VEQIKSQKIH GCQILETVYK H SCGGLPPV RSALEKILAV CHGVMYKQLS AWMLHGLLLD QHEEFFIKQG PSSGNVSAQP EEDEEDLGIG GLTGKQLREL QD LRLIEEE NMLAPSLKQF SLRVEILPSY IPVRVAEKIL FVGESVQMFE NQNVNLTRKG SILKDQEDTF AAELHRLKQQ PLF SLVDFE QVVDRIRSTV AEHLWKLMVE ESDLLGQLKI IKDFYLLGRG ELFQAFIDTA QHMLKTPPTA VTEHDVNVAF QQSA HKVLL DDDNLLPLLH LTIEYHGKEH KADATQAREG PSRETSPREA PASGWAALGL SYKVQWPLHI LFTPAVLEKY NVVFK YLLS VRRVQAELQH CWALQMQRKH LKSNQTDAVK WRLRNHMAFL VDNLQYYLQV DVLESQFSQL LHQINSTRDF ESIRLA HDH FLSNLLAQSF ILLKPVFHCL NEILDLCHSF CSLVSQNLGP LDERGAAQLS ILVKGFSRQS SLLFKILSSV RNHQINS DL AQLLLRLDYN KYYTQAGGTL GSFGM UniProtKB: Gamma-tubulin complex component |
-分子 #5: Gamma-tubulin complex component
分子 | 名称: Gamma-tubulin complex component / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
分子量 | 理論値: 122.040344 KDa |
組換発現 | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
配列 | 文字列: MASPAPSWTR LDPQQERDVR ELIRLVSGVQ DEADPNFQLA LHFAWSNFRF HRFLDVNSHK VEKTIEGIYE KFIIHSDLSK AASWKRLTD EFLNASLPSI KEIKTDAHYS ILSLLLCLSD SPSNSNYVET PRNKEVEKKD DFDWGKYLME GEEIDLGPNV D TPNWSEES ...文字列: MASPAPSWTR LDPQQERDVR ELIRLVSGVQ DEADPNFQLA LHFAWSNFRF HRFLDVNSHK VEKTIEGIYE KFIIHSDLSK AASWKRLTD EFLNASLPSI KEIKTDAHYS ILSLLLCLSD SPSNSNYVET PRNKEVEKKD DFDWGKYLME GEEIDLGPNV D TPNWSEES EDEDDPQPLS REDSGIQVDR TPLEEQDQSR KPASRVSWKV DEPDARSWLE QHVVRQYWTT RSSKFPHSLH LH SNLAAVW DQHLYSSDPL YVPDDRVSVT ETQVIRETLW LLSGVKKLFI FQLIDGKVAV RNNIMVTHLT HSCLRSVLEQ IAA YGQVVF RLQEFIDEVM GHSSESTLPG NGSVPKKSTD APFRTYQAFM WALYKYFISF KEELSEIEKC IINNDTTVTL AIVV DKLSP RLAQLKVLHK VFSTGVAEVP PDTRNVVRAS HLLNTLYKAI LEYDNVGEAS EQTVSLLFSL WVETVRPYLQ IVDEW IVHG HLCDGAREFI IQRNKNVPVN HRDFWYATYT LYSVSEKTEN EEKMSDNASA SSGSDQGPSS RQHTMVSFLK PVLKQI IMA GKSMQLLKNL QCAESTTCQA MARDAERKSL YTLFLESVQS RLRHGEDATA QALTEQQATR ETLIKMQSIA ERHLELD DV HDPLLAINFA RLYLEQSDFH EKFAGGDICV DRSSESVTCQ TFELTLRSCL YPHIDKQYLD CCGNLMRTLK KDYRLVEY L QAMRNFFLME GGDTMYDFYT SIFDKIREKE TWQNVSFLNV QLQEAVGQRY PEDSSRLSIS FENTDTAKKK LPVHTLDGL TLSYKVPWPV DIVISLECQK IYNQVFLLLL QIKWAKYSLD VLLFGELASS AEKPQSKEGL LSGQDTAAQF GPQKEPVRQQ IHRMFLLRV KLMHFVNSLH NYIMTRILHS TGLEFQHQVE EAKDLDQLIK IHYRYLSTIH DRCLLREKVS FVKEAIMKVL N LALMFADG WQAGLGAWQM ESIEKMESDF KNCHMFLVTI LNKAVCRGSF PHLESLALSL MAGMEQKRED DLFNHTWGQG DL PNYTCAV RLLGVRKGGG TRPK UniProtKB: Gamma-tubulin complex component |
-分子 #6: Tubulin gamma chain
分子 | 名称: Tubulin gamma chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
分子量 | 理論値: 51.135562 KDa |
組換発現 | 生物種: Sus scrofa (ブタ) |
配列 | 文字列: MPREIITLQL GQCGNQIGFE FWKQLCAEHG ISPEGIVEEF ATEGTDRKDV FFYQADDEHY IPRAVLLDLE PRVIHSILNS PYAKLYNPE NIYLSEHGGG AGNNWASGFS QGEKIHEDIF DIIDREADGS DSLEGFVLCH SIAGGTGSGL GSYLLERLND R YPKKLVQT ...文字列: MPREIITLQL GQCGNQIGFE FWKQLCAEHG ISPEGIVEEF ATEGTDRKDV FFYQADDEHY IPRAVLLDLE PRVIHSILNS PYAKLYNPE NIYLSEHGGG AGNNWASGFS QGEKIHEDIF DIIDREADGS DSLEGFVLCH SIAGGTGSGL GSYLLERLND R YPKKLVQT YSVFPNQDEM SDVVVQPYNS LLTLKRLTQN ADCVVVLDNT ALNRIATDRL HIQNPSFSQI NQLVSTIMSA ST TTLRYPG YMNNDLIGLI ASLIPTPRLH FLMTGYTPLT TDQSVASVRK TTVLDVMRRL LQPKNVMVST GRDRQTNHCY IAI LNIIQG EVDPTQVHKS LQRIRERKLA NFIPWGPASI QVALSRKSPY LPSAHRVSGL MMANHTSISS LFESSCQQYD KLRK REAFL EQFRKEDIFK ENFDELDRSR EVVQELIDEY HAATRPDYIS WGTQEQ UniProtKB: Tubulin gamma chain |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 55.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.9 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.9 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: BACKBONE TRACE |
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得られたモデル | PDB-9g3x: |