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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-23070 | |||||||||
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タイトル | Structure of the S. cerevisiae phosphatidylcholine flippase Dnf2-Lem3 complex in the apo E1 state | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | P4 ATPase / Phosphatidylcholine Flippases / TRANSLOCASE | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 regulation of vacuole organization / glycosylceramide flippase activity / mating projection tip membrane / aminophospholipid translocation / Ion transport by P-type ATPases / aminophospholipid flippase activity / phosphatidylserine flippase activity / ceramide translocation / ATPase-coupled intramembrane lipid transporter activity / phospholipid-translocating ATPase complex ...regulation of vacuole organization / glycosylceramide flippase activity / mating projection tip membrane / aminophospholipid translocation / Ion transport by P-type ATPases / aminophospholipid flippase activity / phosphatidylserine flippase activity / ceramide translocation / ATPase-coupled intramembrane lipid transporter activity / phospholipid-translocating ATPase complex / phosphatidylserine floppase activity / phosphatidylethanolamine flippase activity / phosphatidylcholine floppase activity / cellular bud neck / P-type phospholipid transporter / phospholipid translocation / establishment or maintenance of cell polarity / cell periphery / endocytosis / protein transport / cell surface receptor signaling pathway / Golgi apparatus / magnesium ion binding / endoplasmic reticulum / ATP hydrolysis activity / ATP binding / plasma membrane / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.08 Å | |||||||||
データ登録者 | Bai L / You Q / Jain BK / Duan HD / Kovach A / Graham TR / Li H | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2020 タイトル: Transport mechanism of P4 ATPase phosphatidylcholine flippases. 著者: Lin Bai / Qinglong You / Bhawik K Jain / H Diessel Duan / Amanda Kovach / Todd R Graham / Huilin Li / 要旨: The P4 ATPases use ATP hydrolysis to transport large lipid substrates across lipid bilayers. The structures of the endosome- and Golgi-localized phosphatidylserine flippases-such as the yeast Drs2 ...The P4 ATPases use ATP hydrolysis to transport large lipid substrates across lipid bilayers. The structures of the endosome- and Golgi-localized phosphatidylserine flippases-such as the yeast Drs2 and human ATP8A1-have recently been reported. However, a substrate-binding site on the cytosolic side has not been found, and the transport mechanisms of P4 ATPases with other substrates are unknown. Here, we report structures of the Dnf1-Lem3 and Dnf2-Lem3 complexes. We captured substrate phosphatidylcholine molecules on both the exoplasmic and cytosolic sides and found that they have similar structures. Unexpectedly, Lem3 contributes to substrate binding. The conformational transitions of these phosphatidylcholine transporters match those of the phosphatidylserine transporters, suggesting a conserved mechanism among P4 ATPases. Dnf1/Dnf2 have a unique P domain helix-turn-helix insertion that is important for function. Therefore, P4 ATPases may have retained an overall transport mechanism while evolving distinct features for different lipid substrates. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_23070.map.gz | 6.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-23070-v30.xml emd-23070.xml | 14.4 KB 14.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_23070.png | 45.3 KB | ||
Filedesc metadata | emd-23070.cif.gz | 6.7 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23070 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23070 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_23070_validation.pdf.gz | 382.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_23070_full_validation.pdf.gz | 382 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_23070_validation.xml.gz | 5.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_23070_validation.cif.gz | 6.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23070 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23070 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_23070.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 52.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.029 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : S. cerevisiae phosphatidylcholine flippase Dnf2-Lem3 complex in t...
全体 | 名称: S. cerevisiae phosphatidylcholine flippase Dnf2-Lem3 complex in the apo E1 state |
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要素 |
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-超分子 #1: S. cerevisiae phosphatidylcholine flippase Dnf2-Lem3 complex in t...
超分子 | 名称: S. cerevisiae phosphatidylcholine flippase Dnf2-Lem3 complex in the apo E1 state タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2 |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c |
-分子 #1: Phospholipid-transporting ATPase DNF2
分子 | 名称: Phospholipid-transporting ATPase DNF2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: P-type phospholipid transporter |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c |
分子量 | 理論値: 182.834469 KDa |
組換発現 | 生物種: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) |
配列 | 文字列: MSSPSKPTSP FVDDIEHESG SASNGLSSMS PFDDSFQFEK PSSAHGNIEV AKTGGSVLKR QSKPMKDIST PDLSKVTFDG IDDYSNDND INDDDELNGK KTEIHEHENE VDDDLHSFQA TPMPNTGGFE DVELDNNEGS NNDSQADHKL KRVRFGTRRN K SGRIDINR ...文字列: MSSPSKPTSP FVDDIEHESG SASNGLSSMS PFDDSFQFEK PSSAHGNIEV AKTGGSVLKR QSKPMKDIST PDLSKVTFDG IDDYSNDND INDDDELNGK KTEIHEHENE VDDDLHSFQA TPMPNTGGFE DVELDNNEGS NNDSQADHKL KRVRFGTRRN K SGRIDINR SKTLKWAKKN FHNAIDEFST KEDSLENSAL QNRSDELRTV YYNLPLPEDM LDEDGLPLAV YPRNKIRTTK YT PLTFFPK NILFQFHNFA NIYFLILLIL GAFQIFGVTN PGFASVPLIV IVIITAIKDG IEDSRRTVLD LEVNNTRTHI LSG VKNENV AVDNVSLWRR FKKANTRALI KIFEYFSENL TAAGREKKLQ KKREELRRKR NSRSFGPRGS LDSIGSYRMS ADFG RPSLD YENLNQTMSQ ANRYNDGENL VDRTLQPNPE CRFAKDYWKN VKVGDIVRVH NNDEIPADMI LLSTSDVDGA CYVET KNLD GETNLKVRQS LKCSKIIKSS RDITRTKFWV ESEGPHANLY SYQGNFKWQD TQNGNIRNEP VNINNLLLRG CTLRNT KWA MGMVIFTGDD TKIMINAGVT PTKKSRISRE LNFSVILNFV LLFILCFTAG IVNGVYYKQK PRSRDYFEFG TIGGSAS TN GFVSFWVAVI LYQSLVPISL YISVEIIKTA QAIFIYTDVL LYNAKLDYPC TPKSWNISDD LGQIEYIFSD KTGTLTQN V MEFKKCTING VSYGRAYTEA LAGLRKRQGV DVESEGRREK EEIAKDRETM IDELRSMSDN TQFCPEDLTF VSKEIVEDL KGSSGDHQQK CCEHFLLALA LCHSVLVEPN KDDPKKLDIK AQSPDESALV STARQLGYSF VGSSKSGLIV EIQGVQKEFQ VLNVLEFNS SRKRMSCIIK IPGSTPKDEP KALLICKGAD SVIYSRLDRT QNDATLLEKT ALHLEEYATE GLRTLCLAQR E LTWSEYER WVKTYDVAAA SVTNREEELD KVTDVIEREL ILLGGTAIED RLQDGVPDSI ALLAEAGIKL WVLTGDKVET AI NIGFSCN VLNNDMELLV VKASGEDVEE FGSDPIQVVN NLVTKYLREK FGMSGSEEEL KEAKREHGLP QGNFAVIIDG DAL KVALNG EEMRRKFLLL CKNCKAVLCC RVSPAQKAAV VKLVKKTLDV MTLAIGDGSN DVAMIQSADV GVGIAGEEGR QAVM CSDYA IGQFRYVTRL VLVHGKWCYK RLAEMIPQFF YKNVIFTLSL FWYGIYNNFD GSYLFEYTYL TFYNLAFTSV PVILL AVLD QDVSDTVSML VPQLYRVGIL RKEWNQTKFL WYMLDGVYQS VICFFFPYLA YHKNMVVTEN GLGLDHRYFV GVFVTA IAV TSCNFYVFME QYRWDWFCGL FICLSLAVFY GWTGIWTSSS SSNEFYKGAA RVFAQPAYWA VLFVGVLFCL LPRFTID CI RKIFYPKDIE IVREMWLRGD FDLYPQGYDP TDPSRPRINE IRPLTDFKEP ISLDTHFDGV SHSQETIVTE EIPMSILN G EQGSRKGYRV STTLERRDQL SPVTTTNNLP RRSMASARGN KLRTSLDRTR EEMLANHQLD TRYSVERARA SLDLPGINH AETLLSQRSR DR UniProtKB: Phospholipid-transporting ATPase DNF2 |
-分子 #2: Alkylphosphocholine resistance protein LEM3
分子 | 名称: Alkylphosphocholine resistance protein LEM3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c |
分子量 | 理論値: 47.490395 KDa |
組換発現 | 生物種: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) |
配列 | 文字列: MVNFDLGQVG EVFRRKDKGA IVSGDNPEEE EDVDASEFEE DEVKPVRTKN RRPKEDAFTQ QRLAAINPVL TPRTVLPLYL LIAVVFVIV GGCILAQNSK VDEVTIYYQD CMTNATSSWS DIPSEHWQFV FHKYKTYNTA PQWRFVDDES DDFTKQRGTC Q IRFTTPSD ...文字列: MVNFDLGQVG EVFRRKDKGA IVSGDNPEEE EDVDASEFEE DEVKPVRTKN RRPKEDAFTQ QRLAAINPVL TPRTVLPLYL LIAVVFVIV GGCILAQNSK VDEVTIYYQD CMTNATSSWS DIPSEHWQFV FHKYKTYNTA PQWRFVDDES DDFTKQRGTC Q IRFTTPSD MKNNVYLNYV LEKFAANHRR YVLSFSEDQI RGEDASYETV HDATGINCKP LSKNADGKIY YPCGLIANSM FN DTFPLQL TNVGDTSNNY SLTNKGINWE SDKKRYKKTK YNYTQIAPPP YWEKMYPDGY NETNIPDIQD WEEFQNWMRP GAF DKITKL IRINKNDTLP AGEYQLDIGL HWPVLEFNGK KGIYLTHGSH LGGRNPFLGI VYLIGGCICA AMALILLTFW LFGG RKIAD ASSLSWNMK UniProtKB: Phospholipid-transporting ATPase accessory subunit LEM3 |
-分子 #5: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 1 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-分子 #6: CHOLESTEROL
分子 | 名称: CHOLESTEROL / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 7 / 式: CLR |
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分子量 | 理論値: 386.654 Da |
Chemical component information | ChemComp-CLR: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1.5 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 64.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.08 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 190753 |
初期 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE |
最終 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE |