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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1730 | |||||||||
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タイトル | 4.6 Angstrom Cryo-EM reconstruction of Tobacco Mosaic Virus from images recorded at 300 KeV on a 4kx4k CCD camera | |||||||||
マップデータ | B-factor scaled fully CTF corrected density map of TMV | |||||||||
試料 |
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キーワード | Cryo-EM / single particle processing / TMV / CCD data / 300 KeV electrons | |||||||||
機能・相同性 | Tobacco mosaic virus-like, coat protein / Tobacco mosaic virus-like, coat protein superfamily / Virus coat protein (TMV like) / helical viral capsid / structural molecule activity / Capsid protein 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Tobacco mosaic virus (ウイルス) | |||||||||
手法 | らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 4.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Clare DK / Orlova EV | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Struct Biol / 年: 2010 タイトル: 4.6A Cryo-EM reconstruction of tobacco mosaic virus from images recorded at 300 keV on a 4k x 4k CCD camera. 著者: Daniel K Clare / Elena V Orlova / 要旨: Tobacco mosaic virus (TMV) is a plant virus with a highly ordered organisation and has been described in three different structural states: As stacked disks without RNA (X-ray crystallography), as a ...Tobacco mosaic virus (TMV) is a plant virus with a highly ordered organisation and has been described in three different structural states: As stacked disks without RNA (X-ray crystallography), as a helical form with RNA (X-ray fibre diffraction) and as a second distinct helical form with RNA (cryo-EM). Here we present a structural analysis of TMV as a test object to assess the quality of cryo-EM images recorded at 300 keV on a CCD camera. The 4.6A TMV structure obtained is consistent with the previous cryo-EM structure and confirms that there is a second helical form of TMV. The structure here also shows that with a similar number of TMV segments an equivalent resolution can be achieved with a 4k CCD camera at 300 keV. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1730.map.gz | 16.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1730-v30.xml emd-1730.xml | 12.2 KB 12.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 1730.png | 492.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1730 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1730 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1730_validation.pdf.gz | 337 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1730_full_validation.pdf.gz | 336.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1730_validation.xml.gz | 6.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1730 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1730 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1730.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 29.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | B-factor scaled fully CTF corrected density map of TMV | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.24 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Tobacco Mosaic Virus
全体 | 名称: Tobacco Mosaic Virus (ウイルス) |
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要素 |
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-超分子 #1000: Tobacco Mosaic Virus
超分子 | 名称: Tobacco Mosaic Virus / タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: Monodisperse / 集合状態: Homo-oligomer of TMV coat protein and ssRNA / Number unique components: 2 |
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分子量 | 実験値: 175 KDa / 理論値: 175 KDa |
-超分子 #1: Tobacco mosaic virus
超分子 | 名称: Tobacco mosaic virus / タイプ: virus / ID: 1 / Name.synonym: TMV / NCBI-ID: 12242 / 生物種: Tobacco mosaic virus / データベース: NCBI / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: OTHER / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No / Syn species name: TMV |
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宿主 | 生物種: Nicotiana (ナス科) / 別称: PLANTAE(HIGHER PLANTS) |
分子量 | 実験値: 175 KDa / 理論値: 175 KDa |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: CP / 直径: 180 Å |
-分子 #1: ssRNA
分子 | 名称: ssRNA / タイプ: rna / ID: 1 / Name.synonym: RNA / 分類: OTHER / Structure: SINGLE STRANDED / Synthetic?: No |
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由来(天然) | 生物種: Tobacco mosaic virus (ウイルス) / 別称: TMV |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法, クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | らせん対称体再構成法 |
試料の集合状態 | filament |
-試料調製
濃度 | 3 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 50 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 10 mM MgCl2 |
染色 | タイプ: NEGATIVE 詳細: 3.5ul of TMV was added to R2/2 C-flat grid, blotted, then plunge frozen in liquid ethane |
グリッド | 詳細: 400 mesh R2/2 c-flat grids |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 60 % / チャンバー内温度: 100 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 詳細: Vitrification instrument: Home made plunger 手法: Grids were blotted for around 2 seconds and then rapidly plunged into liquid ethane |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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温度 | 平均: 78 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: Corrected at 115,000 times |
日付 | 2009年2月1日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 15 µm / 実像数: 104 / 平均電子線量: 25 e/Å2 / ビット/ピクセル: 16 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 121000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.3 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.9 µm / 倍率(公称値): 90000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Eucentric / 試料ホルダーモデル: GATAN HELIUM |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | The particle were selected using the helical option in boxer |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 1.408 Å 想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: 22.04 ° 想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C1 (非対称) アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPIDER, IMAGIC / 詳細: BPRP was used for reconstruction |
CTF補正 | 詳細: Each particle was fully CTF corrected |
最終 角度割当 | 詳細: 80-100 in theta and 0-22.04 in phi in 0.5 steps |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: |
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ソフトウェア | 名称: Chimera and Coot |
詳細 | Protocol: Rigid body, real space. The PDB was initially fitted using chimera, the coordinates were then refined using Coot |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT 当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient |
得られたモデル | PDB-2xea: |