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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7ole | ||||||||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the TELO2-TTI1-TTI2-RUVBL1-RUVBL2 complex | ||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | CHAPERONE / R2TP / TTT / TELO2 / TTI1 / TTI2 / RUVBL1 / RUVBL2 / HSP90 chaperone / mTOR / PIKK / STRUCTURAL PROTEIN | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 : / positive regulation of DNA damage checkpoint / TTT Hsp90 cochaperone complex / 'de novo' cotranslational protein folding / promoter-enhancer loop anchoring activity / regulation of DNA strand elongation / positive regulation of telomere maintenance in response to DNA damage / TORC2 complex / establishment of protein localization to chromatin / R2TP complex ...: / positive regulation of DNA damage checkpoint / TTT Hsp90 cochaperone complex / 'de novo' cotranslational protein folding / promoter-enhancer loop anchoring activity / regulation of DNA strand elongation / positive regulation of telomere maintenance in response to DNA damage / TORC2 complex / establishment of protein localization to chromatin / R2TP complex / TORC1 complex / regulation of TOR signaling / dynein axonemal particle / RPAP3/R2TP/prefoldin-like complex / Swr1 complex / positive regulation of telomerase RNA localization to Cajal body / regulation of double-strand break repair / Ino80 complex / protein folding chaperone complex / box C/D snoRNP assembly / NuA4 histone acetyltransferase complex / telomeric DNA binding / regulation of chromosome organization / regulation of DNA replication / TFIID-class transcription factor complex binding / regulation of embryonic development / MLL1 complex / Telomere Extension By Telomerase / positive regulation of double-strand break repair via homologous recombination / RNA polymerase II core promoter sequence-specific DNA binding / regulation of DNA repair / Deposition of new CENPA-containing nucleosomes at the centromere / telomere maintenance / DNA helicase activity / TBP-class protein binding / positive regulation of DNA repair / cellular response to estradiol stimulus / Formation of the beta-catenin:TCF transactivating complex / ADP binding / Hsp90 protein binding / DNA Damage Recognition in GG-NER / negative regulation of canonical Wnt signaling pathway / euchromatin / chromatin DNA binding / beta-catenin binding / nuclear matrix / transcription corepressor activity / cellular response to UV / UCH proteinases / nucleosome / positive regulation of canonical Wnt signaling pathway / unfolded protein binding / protein folding / HATs acetylate histones / ATPase binding / spermatogenesis / regulation of apoptotic process / DNA helicase / DNA recombination / molecular adaptor activity / chromosome, telomeric region / transcription coactivator activity / nuclear body / regulation of cell cycle / protein stabilization / Ub-specific processing proteases / cadherin binding / chromatin remodeling / ribonucleoprotein complex / RNA polymerase II cis-regulatory region sequence-specific DNA binding / cell division / DNA repair / centrosome / protein-containing complex binding / regulation of DNA-templated transcription / regulation of transcription by RNA polymerase II / protein kinase binding / positive regulation of DNA-templated transcription / protein homodimerization activity / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / ATP hydrolysis activity / extracellular exosome / nucleoplasm / ATP binding / identical protein binding / membrane / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.41 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | Pal, M. / Llorca, O. / Pearl, L. | ||||||||||||||||||
資金援助 | 英国, スペイン, 5件
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引用 | ジャーナル: Cell Rep / 年: 2021 タイトル: Structure of the TELO2-TTI1-TTI2 complex and its function in TOR recruitment to the R2TP chaperone. 著者: Mohinder Pal / Hugo Muñoz-Hernandez / Dennis Bjorklund / Lihong Zhou / Gianluca Degliesposti / J Mark Skehel / Emma L Hesketh / Rebecca F Thompson / Laurence H Pearl / Oscar Llorca / Chrisostomos Prodromou / 要旨: The R2TP (RUVBL1-RUVBL2-RPAP3-PIH1D1) complex, in collaboration with heat shock protein 90 (HSP90), functions as a chaperone for the assembly and stability of protein complexes, including RNA ...The R2TP (RUVBL1-RUVBL2-RPAP3-PIH1D1) complex, in collaboration with heat shock protein 90 (HSP90), functions as a chaperone for the assembly and stability of protein complexes, including RNA polymerases, small nuclear ribonucleoprotein particles (snRNPs), and phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)-like kinases (PIKKs) such as TOR and SMG1. PIKK stabilization depends on an additional complex of TELO2, TTI1, and TTI2 (TTT), whose structure and function are poorly understood. The cryoelectron microscopy (cryo-EM) structure of the human R2TP-TTT complex, together with biochemical experiments, reveals the mechanism of TOR recruitment to the R2TP-TTT chaperone. The HEAT-repeat TTT complex binds the kinase domain of TOR, without blocking its activity, and delivers TOR to the R2TP chaperone. In addition, TTT regulates the R2TP chaperone by inhibiting RUVBL1-RUVBL2 ATPase activity and by modulating the conformation and interactions of the PIH1D1 and RPAP3 components of R2TP. Taken together, our results show how TTT couples the recruitment of TOR to R2TP with the regulation of this chaperone system. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
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PDBx/mmCIF形式 | 7ole.cif.gz | 646.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7ole.ent.gz | 499.5 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7ole.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7ole_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7ole_full_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7ole_validation.xml.gz | 114.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7ole_validation.cif.gz | 165 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ol/7ole ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ol/7ole | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-タンパク質 , 3種, 7分子 ACEBDFK
#1: タンパク質 | 分子量: 50296.914 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: ADP / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RUVBL1, INO80H, NMP238, TIP49, TIP49A / プラスミド: pCDF duet1 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: Q9Y265, DNA helicase #2: タンパク質 | 分子量: 51222.465 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: ADP / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RUVBL2, INO80J, TIP48, TIP49B, CGI-46 / プラスミド: pCDF duet / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: Q9Y230, DNA helicase #5: タンパク質 | | 分子量: 53424.195 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: LGEMEPPALPREKEEFASAHF / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: TELO2, KIAA0683, TELO2 / プラスミド: pFastbac 発現宿主: Spodoptera aff. frugiperda 1 BOLD-2017 (蝶・蛾) 参照: UniProt: Q9Y4R8 |
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-TELO2-interacting protein ... , 2種, 2分子 HJ
#3: タンパク質 | 分子量: 176844.344 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: TTI1, KIAA0406, SMG10 / プラスミド: pFastbac 発現宿主: Spodoptera aff. frugiperda 1 BOLD-2017 (蝶・蛾) 参照: UniProt: O43156 |
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#4: タンパク質 | 分子量: 95633.781 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: TTI2, C8orf41 / プラスミド: pFastbac 発現宿主: Spodoptera aff. frugiperda 1 BOLD-2017 (蝶・蛾) 参照: UniProt: Q6NXR4 |
-非ポリマー , 1種, 5分子
#6: 化合物 | ChemComp-ADP / |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: TELO2-TTI1-TTI2-RUVBL1-RUVBL2 complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#5 / 由来: MULTIPLE SOURCES | |||||||||||||||
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分子量 | 値: 0.58 MDa / 実験値: YES | |||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: Solutions were made fresh for protein purification | |||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | |||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | |||||||||||||||
急速凍結 | 装置: LEICA PLUNGER / 凍結剤: ETHANE-PROPANE / 湿度: 90 % / 凍結前の試料温度: 287.15 K / 詳細: 3sec |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm / 最大 デフォーカス(補正後): 3000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: BASIC |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER 最高温度: 100 K / 最低温度: 90 K |
撮影 | 平均露光時間: 9 sec. / 電子線照射量: 60.17 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 10 / 実像数: 6000 |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 5 µm / 横: 1034 / 縦: 1034 / 動画フレーム数/画像: 40 / 利用したフレーム数/画像: 1-40 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1000 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.41 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 267149 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / クラス平均像の数: 200 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 6FO1 |