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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6wuc | ||||||
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タイトル | The yeast Ctf3 complex with Cnn1-Wip1 | ||||||
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![]() | CELL CYCLE / kinetochore / chromosome segregation / CCAN | ||||||
機能・相同性 | ![]() negative regulation of kinetochore assembly / attachment of spindle microtubules to kinetochore / centromeric DNA binding / establishment of mitotic sister chromatid cohesion / mitotic spindle assembly checkpoint signaling / DNA replication initiation / meiotic cell cycle / chromosome segregation / kinetochore / cell division ...negative regulation of kinetochore assembly / attachment of spindle microtubules to kinetochore / centromeric DNA binding / establishment of mitotic sister chromatid cohesion / mitotic spindle assembly checkpoint signaling / DNA replication initiation / meiotic cell cycle / chromosome segregation / kinetochore / cell division / protein-containing complex binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.23 Å | ||||||
![]() | Hinshaw, S.M. / Harrison, S.C. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: The Structural Basis for Kinetochore Stabilization by Cnn1/CENP-T. 著者: Stephen M Hinshaw / Stephen C Harrison / ![]() 要旨: Chromosome segregation depends on a regulated connection between spindle microtubules and centromeric DNA. The kinetochore mediates this connection and ensures it persists during anaphase, when ...Chromosome segregation depends on a regulated connection between spindle microtubules and centromeric DNA. The kinetochore mediates this connection and ensures it persists during anaphase, when sister chromatids must transit into daughter cells uninterrupted. The Ctf19 complex (Ctf19c) forms the centromeric base of the kinetochore in budding yeast. Biochemical experiments show that Ctf19c members associate hierarchically when purified from cell extract [1], an observation that is mostly explained by the structure of the complex [2]. The Ctf3 complex (Ctf3c), which is not required for the assembly of most other Ctf19c factors, disobeys the biochemical assembly hierarchy when observed in dividing cells that lack more basal components [3]. Thus, the biochemical experiments do not completely recapitulate the logic of centromeric Ctf19c assembly. We now present a high-resolution structure of the Ctf3c bound to the Cnn1-Wip1 heterodimer. Associated live-cell imaging experiments provide a mechanism for Ctf3c and Cnn1-Wip1 recruitment to the kinetochore. The mechanism suggests feedback regulation of Ctf19c assembly and unanticipated similarities in kinetochore organization between yeast and vertebrates. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 248.2 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 193.7 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 924.6 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 956.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 46.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 69.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 21438.359 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 発現宿主: ![]() ![]() |
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#2: タンパク質 | 分子量: 84617.891 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 発現宿主: ![]() ![]() |
#3: タンパク質 | 分子量: 27874.799 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 発現宿主: ![]() ![]() |
#4: タンパク質 | 分子量: 10527.717 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: WIP1 / 発現宿主: ![]() |
#5: タンパク質 | 分子量: 41359.785 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: CNN1 / 発現宿主: ![]() |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Single particle reconstruction of the Ctf3c bound to Cnn1-Wip1 タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 8.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 60 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
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解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.17.1_3660: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.23 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 109996 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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