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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 6dff | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | Structure of the cargo bound AP-1:Arf1:tetherin-Nef monomer | ||||||
要素 |
| ||||||
キーワード | TRANSPORT PROTEIN / AP / HIV / Nef / trafficking / VIRAL PROTEIN / PROTEIN TRANSPORT | ||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報negative regulation of plasmacytoid dendritic cell cytokine production / negative regulation of intracellular transport of viral material / response to interferon-beta / basolateral protein secretion / endosome to melanosome transport / AP-1 adaptor complex / Lysosome Vesicle Biogenesis / mitotic cleavage furrow ingression / trans-Golgi Network Vesicle Budding / protein trimerization ...negative regulation of plasmacytoid dendritic cell cytokine production / negative regulation of intracellular transport of viral material / response to interferon-beta / basolateral protein secretion / endosome to melanosome transport / AP-1 adaptor complex / Lysosome Vesicle Biogenesis / mitotic cleavage furrow ingression / trans-Golgi Network Vesicle Budding / protein trimerization / response to interferon-alpha / platelet dense granule organization / negative regulation of glycoprotein biosynthetic process / Glycosphingolipid transport / metalloendopeptidase inhibitor activity / symbiont-mediated suppression of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I / melanosome assembly / regulation of receptor internalization / Intra-Golgi traffic / symbiont-mediated suppression of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class II / regulation of Arp2/3 complex-mediated actin nucleation / Golgi Associated Vesicle Biogenesis / Synthesis of PIPs at the Golgi membrane / symbiont-mediated suppression of host autophagy / clathrin adaptor activity / symbiont-mediated suppression of host apoptosis / positive regulation of leukocyte proliferation / MHC class II antigen presentation / thioesterase binding / Nef Mediated CD4 Down-regulation / CD4 receptor binding / dendritic spine organization / long-term synaptic depression / determination of left/right symmetry / clathrin-coated vesicle / COPI-dependent Golgi-to-ER retrograde traffic / azurophil granule membrane / clathrin binding / negative regulation of viral genome replication / Lysosome Vesicle Biogenesis / Golgi Associated Vesicle Biogenesis / Synthesis of PIPs at the plasma membrane / cell leading edge / B cell activation / MHC class I protein binding / host cell Golgi membrane / intracellular copper ion homeostasis / response to type II interferon / protein targeting / side of membrane / COPI-mediated anterograde transport / vesicle-mediated transport / clathrin-coated pit / viral life cycle / regulation of calcium-mediated signaling / multivesicular body / Neutrophil degranulation / MHC class II antigen presentation / Gene and protein expression by JAK-STAT signaling after Interleukin-12 stimulation / cytoplasmic vesicle membrane / negative regulation of cell migration / Nef mediated downregulation of MHC class I complex cell surface expression / sarcomere / trans-Golgi network membrane / small monomeric GTPase / regulation of actin cytoskeleton organization / intracellular protein transport / kidney development / trans-Golgi network / negative regulation of cell growth / cellular response to virus / SH3 domain binding / virion component / response to virus / SARS-CoV-1 activates/modulates innate immune responses / Interferon alpha/beta signaling / synaptic vesicle / presynapse / heart development / ATPase binding / defense response to virus / early endosome / positive regulation of canonical NF-kappaB signal transduction / neuron projection / postsynaptic density / symbiont-mediated suppression of host innate immune response / apical plasma membrane / membrane raft / Golgi membrane / signaling receptor binding / protein domain specific binding / lysosomal membrane / innate immune response / focal adhesion / intracellular membrane-bounded organelle / GTPase activity / synapse / Neutrophil degranulation / protein kinase binding / GTP binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト)![]() Human immunodeficiency virus 1 (ヒト免疫不全ウイルス)![]() | ||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | ||||||
データ登録者 | Morris, K.L. / Buffalo, C.Z. / Ren, X. / Hurley, J.H. | ||||||
| 資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2018タイトル: HIV-1 Nefs Are Cargo-Sensitive AP-1 Trimerization Switches in Tetherin Downregulation. 著者: Kyle L Morris / Cosmo Z Buffalo / Christina M Stürzel / Elena Heusinger / Frank Kirchhoff / Xuefeng Ren / James H Hurley / ![]() 要旨: The HIV accessory protein Nef counteracts immune defenses by subverting coated vesicle pathways. The 3.7 Å cryo-EM structure of a closed trimer of the clathrin adaptor AP-1, the small GTPase Arf1, ...The HIV accessory protein Nef counteracts immune defenses by subverting coated vesicle pathways. The 3.7 Å cryo-EM structure of a closed trimer of the clathrin adaptor AP-1, the small GTPase Arf1, HIV-1 Nef, and the cytosolic tail of the restriction factor tetherin suggested a mechanism for inactivating tetherin by Golgi retention. The 4.3 Å structure of a mutant Nef-induced dimer of AP-1 showed how the closed trimer is regulated by the dileucine loop of Nef. HDX-MS and mutational analysis were used to show how cargo dynamics leads to alternative Arf1 trimerization, directing Nef targets to be either retained at the trans-Golgi or sorted to lysosomes. Phosphorylation of the NL4-3 M-Nef was shown to regulate AP-1 trimerization, explaining how O-Nefs lacking this phosphosite counteract tetherin but most M-Nefs do not. These observations show how the higher-order organization of a vesicular coat can be allosterically modulated to direct cargoes to distinct fates. | ||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 6dff.cif.gz | 389.4 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb6dff.ent.gz | 304.2 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 6dff.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 6dff_validation.pdf.gz | 903.4 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 6dff_full_validation.pdf.gz | 916.3 KB | 表示 | |
| XML形式データ | 6dff_validation.xml.gz | 57.6 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 6dff_validation.cif.gz | 86 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/df/6dff ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/df/6dff | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 7455MC ![]() 7453C ![]() 7454C ![]() 7456C ![]() 7457C ![]() 7458C ![]() 7563C ![]() 6cm9C ![]() 6criC ![]() 6d83C ![]() 6d84C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
|---|---|
| 類似構造データ | |
| 電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10176 (タイトル: Single particle cryo-EM dataset of the flexible and variable oligomeric state complex AP-1:Arf1:tetherin-HIV-NefData size: 115.4 Data #1: Dose weighted particle stack of AP1:Arf1:tetherin-HIV-Nef [picked particles - multiframe - unprocessed]) EMPIAR-10177 (タイトル: Single particle cryo-EM dataset of the flexible and variable oligomeric state complex AP-1:Arf1:tetherin-HIV-NefData size: 34.0 Data #1: Dose weighted particle stack of AP1:Arf1:tetherin-HIV-Nef closed trimer [picked particles - multiframe - unprocessed]) EMPIAR-10178 (タイトル: Single particle cryo-EM dataset of the flexible and variable oligomeric state complex AP-1:Arf1:tetherin-HIV-NefData size: 10.1 Data #1: Dose weight particle stack of AP1:Arf1:tetherin-HIV-Nef closed trimer after monomeric subunit extraction using LocalRec [picked particles - multiframe - processed]) |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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|---|---|
| 1 |
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要素
-タンパク質 , 2種, 4分子 LTCH
| #1: タンパク質 | 分子量: 29964.326 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト), (組換発現) ![]() Human immunodeficiency virus 1 (ヒト免疫不全ウイルス)遺伝子: BST2, nef / 発現宿主: ![]() #3: タンパク質 | 分子量: 22314.250 Da / 分子数: 2 / Mutation: Q71L / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ARF1 / 発現宿主: ![]() |
|---|
-AP-1 complex subunit ... , 4種, 4分子 BGMS
| #2: タンパク質 | 分子量: 66152.547 Da / 分子数: 1 / Mutation: K359R, E476K / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: AP1B1, ADTB1, BAM22, CLAPB2 / 発現宿主: ![]() |
|---|---|
| #4: タンパク質 | 分子量: 68194.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
| #5: タンパク質 | 分子量: 48606.730 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
| #6: タンパク質 | 分子量: 18321.338 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: AP1S3 / 発現宿主: ![]() |
-非ポリマー , 2種, 4分子 


| #7: 化合物 | | #8: 化合物 | |
|---|
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 |
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|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 由来(天然) |
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| 由来(組換発現) | 生物種: ![]() | ||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液 | pH: 8 | ||||||||||||||||||||||||
| 試料 | 濃度: 0.7 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||
| 試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat-1.2/1.3 | ||||||||||||||||||||||||
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 294 K |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 22500 X / 倍率(補正後): 46849 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 750 nm / Cs: 2.6 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm / アライメント法: COMA FREE |
| 試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 撮影 | 平均露光時間: 9.5 sec. / 電子線照射量: 62.4 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2200 |
| 画像スキャン | 横: 3712 / 縦: 3840 / 動画フレーム数/画像: 38 / 利用したフレーム数/画像: 3-28 |
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解析
| ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.13_2998: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| EMソフトウェア |
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 252212 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 3.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 53123 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / Target criteria: Correlation coefficient / 詳細: Phenix real space refine | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | 3D fitting-ID: 1 / Source name: PDB / タイプ: experimental model
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| 拘束条件 |
|
ムービー
コントローラー
万見について




Homo sapiens (ヒト)
Human immunodeficiency virus 1 (ヒト免疫不全ウイルス)

米国, 1件
引用
UCSF Chimera
















PDBj




































