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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6338 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM study of the Eukaryotic Minichromosome Maintenance Complex | |||||||||
マップデータ | Reconstruction of the Eukaryotic Minichromosome Maintenance Complex | |||||||||
試料 |
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キーワード | Cryo-EM / single particle / MCM2-7 / DNA replication | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 MCM core complex / Assembly of the pre-replicative complex / Switching of origins to a post-replicative state / MCM complex binding / nuclear DNA replication / premeiotic DNA replication / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / mitotic DNA replication / Activation of the pre-replicative complex / CMG complex ...MCM core complex / Assembly of the pre-replicative complex / Switching of origins to a post-replicative state / MCM complex binding / nuclear DNA replication / premeiotic DNA replication / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / mitotic DNA replication / Activation of the pre-replicative complex / CMG complex / nuclear pre-replicative complex / Activation of ATR in response to replication stress / DNA replication preinitiation complex / MCM complex / replication fork protection complex / double-strand break repair via break-induced replication / mitotic DNA replication initiation / single-stranded DNA helicase activity / regulation of DNA-templated DNA replication initiation / DNA strand elongation involved in DNA replication / silent mating-type cassette heterochromatin formation / DNA unwinding involved in DNA replication / nuclear replication fork / DNA replication origin binding / DNA replication initiation / subtelomeric heterochromatin formation / DNA helicase activity / helicase activity / transcription elongation by RNA polymerase II / heterochromatin formation / single-stranded DNA binding / DNA helicase / chromosome, telomeric region / DNA damage response / chromatin binding / ATP hydrolysis activity / nucleoplasm / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Li N / Zhai Y / Zhang Y / Li W / Yang M / Lei J / Tye BK / Gao N | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2015 タイトル: Structure of the eukaryotic MCM complex at 3.8 Å. 著者: Ningning Li / Yuanliang Zhai / Yixiao Zhang / Wanqiu Li / Maojun Yang / Jianlin Lei / Bik-Kwoon Tye / Ning Gao / 要旨: DNA replication in eukaryotes is strictly regulated by several mechanisms. A central step in this replication is the assembly of the heterohexameric minichromosome maintenance (MCM2-7) helicase ...DNA replication in eukaryotes is strictly regulated by several mechanisms. A central step in this replication is the assembly of the heterohexameric minichromosome maintenance (MCM2-7) helicase complex at replication origins during G1 phase as an inactive double hexamer. Here, using cryo-electron microscopy, we report a near-atomic structure of the MCM2-7 double hexamer purified from yeast G1 chromatin. Our structure shows that two single hexamers, arranged in a tilted and twisted fashion through interdigitated amino-terminal domain interactions, form a kinked central channel. Four constricted rings consisting of conserved interior β-hairpins from the two single hexamers create a narrow passageway that tightly fits duplex DNA. This narrow passageway, reinforced by the offset of the two single hexamers at the double hexamer interface, is flanked by two pairs of gate-forming subunits, MCM2 and MCM5. These unusual features of the twisted and tilted single hexamers suggest a concerted mechanism for the melting of origin DNA that requires structural deformation of the intervening DNA. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_6338.map.gz | 3.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-6338-v30.xml emd-6338.xml | 8.8 KB 8.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 400_6338.gif 80_6338.gif | 84.1 KB 5.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6338 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6338 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_6338_validation.pdf.gz | 327 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_6338_full_validation.pdf.gz | 326.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_6338_validation.xml.gz | 6.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6338 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6338 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6338.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 100.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Reconstruction of the Eukaryotic Minichromosome Maintenance Complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.32 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Eukaryotic Minichromosome Maintenance Complex (MCM2-7)
全体 | 名称: Eukaryotic Minichromosome Maintenance Complex (MCM2-7) |
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要素 |
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-超分子 #1000: Eukaryotic Minichromosome Maintenance Complex (MCM2-7)
超分子 | 名称: Eukaryotic Minichromosome Maintenance Complex (MCM2-7) タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Double hexamer / Number unique components: 1 |
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分子量 | 理論値: 1.2 MDa |
-分子 #1: Eukaryotic Minichromosome Maintenance Complex
分子 | 名称: Eukaryotic Minichromosome Maintenance Complex / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 集合状態: hexamer / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) / 別称: Yeast / 細胞中の位置: cytoplasm |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 50mM HEPES-KOH, 100mM K glutamate, 10mM Mg(OAc)2, 0.25% Triton X-100, 3mM ATP, 1mM EDTA |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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日付 | 2015年11月25日 |
撮影 | カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 (4k x 4k) / デジタル化 - サンプリング間隔: 4 µm / 実像数: 2230 / 平均電子線量: 16 e/Å2 詳細: Every image is the average of 14 frames recorded by the direct electron detector |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 22500 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: CTFFIND |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: RELION / 使用した粒子像数: 85365 |