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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 3jcm | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | Cryo-EM structure of the spliceosomal U4/U6.U5 tri-snRNP | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / U4/U6.U5 tri-snRNP / pre-mRNA | ||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報spliceosomal conformational changes to generate catalytic conformation / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease / snoRNA splicing / Lsm1-7-Pat1 complex / U6 snRNP / snoRNA guided rRNA 2'-O-methylation / deadenylation-dependent decapping of nuclear-transcribed mRNA / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / box C/D sno(s)RNA 3'-end processing / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) ...spliceosomal conformational changes to generate catalytic conformation / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease / snoRNA splicing / Lsm1-7-Pat1 complex / U6 snRNP / snoRNA guided rRNA 2'-O-methylation / deadenylation-dependent decapping of nuclear-transcribed mRNA / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / box C/D sno(s)RNA 3'-end processing / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / box C/D methylation guide snoRNP complex / U4/U6 snRNP / 7-methylguanosine cap hypermethylation / pICln-Sm protein complex / snRNP binding / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / small nuclear ribonucleoprotein complex / splicing factor binding / SMN-Sm protein complex / U4 snRNA binding / spliceosomal tri-snRNP complex / commitment complex / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U2 snRNP / U1 snRNP / P-body assembly / U4 snRNP / U2-type prespliceosome / poly(U) RNA binding / tRNA processing / U3 snoRNA binding / precatalytic spliceosome / generation of catalytic spliceosome for second transesterification step / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / mRNA 5'-splice site recognition / spliceosomal complex assembly / mRNA 3'-splice site recognition / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / Prp19 complex / U5 snRNA binding / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / U5 snRNP / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / pre-mRNA intronic binding / spliceosomal snRNP assembly / U1 snRNA binding / cellular response to glucose starvation / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / spliceosomal complex / maturation of SSU-rRNA / P-body / small-subunit processome / mRNA splicing, via spliceosome / metallopeptidase activity / rRNA processing / nucleic acid binding / RNA helicase activity / RNA helicase / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / nucleolus / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / RNA binding / nucleoplasm / ATP binding / identical protein binding / nucleus / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||
| 生物種 | ![]() synthetic construct (人工物) | ||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | ||||||
データ登録者 | Wan, R. / Yan, C. / Bai, R. / Wang, L. / Huang, M. / Wong, C.C. / Shi, Y. | ||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2016タイトル: The 3.8 Å structure of the U4/U6.U5 tri-snRNP: Insights into spliceosome assembly and catalysis. 著者: Ruixue Wan / Chuangye Yan / Rui Bai / Lin Wang / Min Huang / Catherine C L Wong / Yigong Shi / ![]() 要旨: Splicing of precursor messenger RNA is accomplished by a dynamic megacomplex known as the spliceosome. Assembly of a functional spliceosome requires a preassembled U4/U6.U5 tri-snRNP complex, which ...Splicing of precursor messenger RNA is accomplished by a dynamic megacomplex known as the spliceosome. Assembly of a functional spliceosome requires a preassembled U4/U6.U5 tri-snRNP complex, which comprises the U5 small nuclear ribonucleoprotein (snRNP), the U4 and U6 small nuclear RNA (snRNA) duplex, and a number of protein factors. Here we report the three-dimensional structure of a Saccharomyces cerevisiae U4/U6.U5 tri-snRNP at an overall resolution of 3.8 angstroms by single-particle electron cryomicroscopy. The local resolution for the core regions of the tri-snRNP reaches 3.0 to 3.5 angstroms, allowing construction of a refined atomic model. Our structure contains U5 snRNA, the extensively base-paired U4/U6 snRNA, and 30 proteins including Prp8 and Snu114, which amount to 8495 amino acids and 263 nucleotides with a combined molecular mass of ~1 megadalton. The catalytic nucleotide U80 from U6 snRNA exists in an inactive conformation, stabilized by its base-pairing interactions with U4 snRNA and protected by Prp3. Pre-messenger RNA is bound in the tri-snRNP through base-pairing interactions with U6 snRNA and loop I of U5 snRNA. This structure, together with that of the spliceosome, reveals the molecular choreography of the snRNAs in the activation process of the spliceosomal ribozyme. | ||||||
| 履歴 |
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| ムービー |
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|---|---|
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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| PDBx/mmCIF形式 | 3jcm.cif.gz | 1.6 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb3jcm.ent.gz | 1.2 MB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 3jcm.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/jc/3jcm ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/jc/3jcm | HTTPS FTP |
|---|
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 6561MC ![]() 6562MC ![]() 6563MC ![]() 6564MC ![]() 6565MC ![]() 6566MC ![]() 6567MC ![]() 6568MC ![]() 6569MC ![]() 6570MC ![]() 6571MC ![]() 6572MC ![]() 6573MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
-Pre-mRNA-splicing factor ... , 3種, 3分子 AGH
| #1: タンパク質 | 分子量: 279867.469 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: PRP8 / 株: S288c / 参照: UniProt: P33334 |
|---|---|
| #4: タンパク質 | 分子量: 104370.133 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: PRP6 / 株: S288c / 参照: UniProt: P19735 |
| #8: タンパク質 | 分子量: 114174.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: SNU114 / 株: S288c / 参照: UniProt: P36048 |
-U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 BK
| #2: タンパク質 | 分子量: 52506.984 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: PRP4 / 株: S288c / 参照: UniProt: P20053 |
|---|---|
| #5: タンパク質 | 分子量: 55974.320 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: PRP3 / 株: S288c / 参照: UniProt: Q03338 |
-タンパク質 , 5種, 6分子 ILMNSO
| #3: タンパク質 | 分子量: 56382.516 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: PRP31 / 株: S288c / 参照: UniProt: P49704 |
|---|---|
| #6: タンパク質 | 分子量: 16798.387 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: DIB1 / 株: S288c / 参照: UniProt: Q06819 |
| #7: タンパク質 | 分子量: 13582.855 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: SNU13 / 株: S288c / 参照: UniProt: P39990 |
| #9: タンパク質 | 分子量: 246470.266 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: BRR2 / 株: S288c / 参照: UniProt: P32639, RNA helicase |
| #11: タンパク質 | 分子量: 22426.990 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: SMB1 / 株: S288c / 参照: UniProt: P40018 |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 12分子 RJTPUQVYWZXa
| #10: タンパク質 | 分子量: 11240.139 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: SMD3 / 株: S288c / 参照: UniProt: P43321 #12: タンパク質 | 分子量: 16296.798 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: SMD1 / 株: S288c / 参照: UniProt: Q02260 #13: タンパク質 | 分子量: 12876.066 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: SMD2 / 株: S288c / 参照: UniProt: Q06217 #14: タンパク質 | 分子量: 10385.098 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: SME1 / 株: S288c / 参照: UniProt: Q12330 #15: タンパク質 | 分子量: 9669.945 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: SMX3 / 株: S288c / 参照: UniProt: P54999 #16: タンパク質 | 分子量: 8490.809 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: SMX2 / 株: S288c / 参照: UniProt: P40204 |
|---|
-U6 snRNA-associated Sm-like protein ... , 7種, 7分子 bcdefgh
| #17: タンパク質 | 分子量: 12403.378 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: LSM8 / 株: S288c / 参照: UniProt: P47093 |
|---|---|
| #18: タンパク質 | 分子量: 11177.888 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: LSM2 / 株: S288c / 参照: UniProt: P38203 |
| #19: タンパク質 | 分子量: 10039.262 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: LSM3 / 株: S288c / 参照: UniProt: P57743 |
| #20: タンパク質 | 分子量: 9406.579 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: LSM6 / 株: S288c / 参照: UniProt: Q06406 |
| #21: タンパク質 | 分子量: 10432.954 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: LSM5 / 株: S288c / 参照: UniProt: P40089 |
| #22: タンパク質 | 分子量: 13027.045 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: LSM7 / 株: S288c / 参照: UniProt: P53905 |
| #23: タンパク質 | 分子量: 21298.070 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 属: LSM4 / 株: S288c / 参照: UniProt: P40070 |
-RNA鎖 , 4種, 4分子 CDEF
| #24: RNA鎖 | 分子量: 6425.880 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
|---|---|
| #25: RNA鎖 | 分子量: 35883.176 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 株: S288c / 参照: GenBank: 831416131 |
| #26: RNA鎖 | 分子量: 51186.023 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 株: S288c / 参照: GenBank: 831416092 |
| #27: RNA鎖 | 分子量: 68643.344 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 株: S288c / 参照: GenBank: 831416109 |
-非ポリマー , 2種, 2分子 


| #28: 化合物 | ChemComp-GTP / |
|---|---|
| #29: 化合物 | ChemComp-M7M / |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-
試料調製
| 構成要素 | 名称: U4/U6.U5 tri-snRNP / タイプ: COMPLEX |
|---|---|
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE |
-
電子顕微鏡撮影
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN / 日付: 2015年8月8日 |
|---|---|
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
| 試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-
解析
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 3次元再構成 | 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 172134 / ピクセルサイズ(実測値): 1.32 Å / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
| 精密化ステップ | サイクル: LAST
|
ムービー
コントローラー
万見について






引用
UCSF Chimera


















PDBj




































