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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-23511 | |||||||||||||||||||||
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タイトル | DNA-PKcs, Ku, DNA and LigIV N-BRCT in the NHEJ Long-range synaptic complex | |||||||||||||||||||||
マップデータ | DNAPK-BRCT in the Long-range synaptic complex | |||||||||||||||||||||
試料 |
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生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.1 Å | |||||||||||||||||||||
データ登録者 | He Y / Chen S | |||||||||||||||||||||
資金援助 | 米国, 6件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2021 タイトル: Structural basis of long-range to short-range synaptic transition in NHEJ. 著者: Siyu Chen / Linda Lee / Tasmin Naila / Susan Fishbain / Annie Wang / Alan E Tomkinson / Susan P Lees-Miller / Yuan He / 要旨: DNA double-strand breaks (DSBs) are a highly cytotoxic form of DNA damage and the incorrect repair of DSBs is linked to carcinogenesis. The conserved error-prone non-homologous end joining (NHEJ) ...DNA double-strand breaks (DSBs) are a highly cytotoxic form of DNA damage and the incorrect repair of DSBs is linked to carcinogenesis. The conserved error-prone non-homologous end joining (NHEJ) pathway has a key role in determining the effects of DSB-inducing agents that are used to treat cancer as well as the generation of the diversity in antibodies and T cell receptors. Here we applied single-particle cryo-electron microscopy to visualize two key DNA-protein complexes that are formed by human NHEJ factors. The Ku70/80 heterodimer (Ku), the catalytic subunit of the DNA-dependent protein kinase (DNA-PKcs), DNA ligase IV (LigIV), XRCC4 and XLF form a long-range synaptic complex, in which the DNA ends are held approximately 115 Å apart. Two DNA end-bound subcomplexes comprising Ku and DNA-PKcs are linked by interactions between the DNA-PKcs subunits and a scaffold comprising LigIV, XRCC4, XLF, XRCC4 and LigIV. The relative orientation of the DNA-PKcs molecules suggests a mechanism for autophosphorylation in trans, which leads to the dissociation of DNA-PKcs and the transition into the short-range synaptic complex. Within this complex, the Ku-bound DNA ends are aligned for processing and ligation by the XLF-anchored scaffold, and a single catalytic domain of LigIV is stably associated with a nick between the two Ku molecules, which suggests that the joining of both strands of a DSB involves both LigIV molecules. | |||||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_23511.map.gz | 81.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-23511-v30.xml emd-23511.xml | 26 KB 26 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_23511_fsc.xml | 15.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_23511.png | 116 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23511 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23511 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_23511_validation.pdf.gz | 331.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_23511_full_validation.pdf.gz | 331.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_23511_validation.xml.gz | 13.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23511 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23511 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_23511.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 93 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | DNAPK-BRCT in the Long-range synaptic complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : DNAPK complex and LigIV N-BRCT in the Long-range synaptic complex...
全体 | 名称: DNAPK complex and LigIV N-BRCT in the Long-range synaptic complex of NHEJ |
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要素 |
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-超分子 #1: DNAPK complex and LigIV N-BRCT in the Long-range synaptic complex...
超分子 | 名称: DNAPK complex and LigIV N-BRCT in the Long-range synaptic complex of NHEJ タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#6 / 詳細: DNAPKcs, Ku, LigIV N-BRCT |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 630 KDa |
-分子 #1: XRCC6_HUMAN X-ray repair cross-complementing protein 6
分子 | 名称: XRCC6_HUMAN X-ray repair cross-complementing protein 6 タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: unidentified baculovirus (ウイルス) |
配列 | 文字列: MSGWESYYKT EGDEEAEEEQ EENLEASGDY KYSGRDSLIF LVDASKAMFE SQSEDELTPF DMSIQCIQS VYISKIISSD RDLLAVVFYG TEKDKNSVNF KNIYVLQELD NPGAKRILEL D QFKGQQGQ KRFQDMMGHG SDYSLSEVLW VCANLFSDVQ FKMSHKRIML ...文字列: MSGWESYYKT EGDEEAEEEQ EENLEASGDY KYSGRDSLIF LVDASKAMFE SQSEDELTPF DMSIQCIQS VYISKIISSD RDLLAVVFYG TEKDKNSVNF KNIYVLQELD NPGAKRILEL D QFKGQQGQ KRFQDMMGHG SDYSLSEVLW VCANLFSDVQ FKMSHKRIML FTNEDNPHGN DS AKASRAR TKAGDLRDTG IFLDLMHLKK PGGFDISLFY RDIISIAEDE DLRVHFEESS KLE DLLRKV RAKETRKRAL SRLKLKLNKD IVISVGIYNL VQKALKPPPI KLYRETNEPV KTKT RTFNT STGGLLLPSD TKRSQIYGSR QIILEKEETE ELKRFDDPGL MLMGFKPLVL LKKHH YLRP SLFVYPEESL VIGSSTLFSA LLIKCLEKEV AALCRYTPRR NIPPYFVALV PQEEEL DDQ KIQVTPPGFQ LVFLPFADDK RKMPFTEKIM ATPEQVGKMK AIVEKLRFTY RSDSFEN PV LQQHFRNLEA LALDLMEPEQ AVDLTLPKVE AMNKRLGSLV DEFKELVYPP DYNPEGKV T KRKHDNEGSG SKRPKVEYSE EELKTHISKG TLGKFTVPML KEACRAYGLK SGLKKQELL EALTKHFQD |
-分子 #2: XRCC5_HUMAN X-ray repair cross-complementing protein 5
分子 | 名称: XRCC5_HUMAN X-ray repair cross-complementing protein 5 タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: unidentified baculovirus (ウイルス) |
配列 | 文字列: MVRSGNKAAV VLCMDVGFTM SNSIPGIESP FEQAKKVITM FVQRQVFAEN KDEIALVLFG TDGTDNPLS GGDQYQNITV HRHLMLPDFD LLEDIESKIQ PGSQQADFLD ALIVSMDVIQ H ETIGKKFE KRHIEIFTDL SSRFSKSQLD IIIHSLKKCD ISLQFFLPFS ...文字列: MVRSGNKAAV VLCMDVGFTM SNSIPGIESP FEQAKKVITM FVQRQVFAEN KDEIALVLFG TDGTDNPLS GGDQYQNITV HRHLMLPDFD LLEDIESKIQ PGSQQADFLD ALIVSMDVIQ H ETIGKKFE KRHIEIFTDL SSRFSKSQLD IIIHSLKKCD ISLQFFLPFS LGKEDGSGDR GD GPFRLGG HGPSFPLKGI TEQQKEGLEI VKMVMISLEG EDGLDEIYSF SESLRKLCVF KKI ERHSIH WPCRLTIGSN LSIRIAAYKS ILQERVKKTW TVVDAKTLKK EDIQKETVYC LNDD DETEV LKEDIIQGFR YGSDIVPFSK VDEEQMKYKS EGKCFSVLGF CKSSQVQRRF FMGNQ VLKV FAARDDEAAA VALSSLIHAL DDLDMVAIVR YAYDKRANPQ VGVAFPHIKH NYECLV YVQ LPFMEDLRQY MFSSLKNSKK YAPTEAQLNA VDALIDSMSL AKKDEKTDTL EDLFPTT KI PNPRFQRLFQ CLLHRALHPR EPLPPIQQHI WNMLNPPAEV TTKSQIPLSK IKTLFPLI E AKKKDQVTAQ EIFQDNHEDG PTAKKLKTEQ GGAHFSVSSL AEGSVTSVGS VNPAENFRV LVKQKKASFE EASNQLINHI EQFLDTNETP YFMKSIDCIR AFREEAIKFS EEQRFNNFLK ALQEKVEIK QLNHFWEIVV QDGITLITKE EASGSSVTAE EAKKFLAPKD KPSGDTAAVF E EGGDVDDL LDMI |
-分子 #3: PRKDC_HUMAN DNA-dependent protein kinase catalytic subunit
分子 | 名称: PRKDC_HUMAN DNA-dependent protein kinase catalytic subunit タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: unidentified baculovirus (ウイルス) |
配列 | 文字列: MAGSGAGVRC SLLRLQETLS AADRCGAALA GHQLIRGLGQ ECVLSSSPAV LALQTSLVFS RDFGLLVFV RKSLNSIEFR ECREEILKFL CIFLEKMGQK IAPYSVEIKN TCTSVYTKDR A AKCKIPAL DLLIKLLQTF RSSRLMDEFK IGELFSKFYG ELALKKKIPD ...文字列: MAGSGAGVRC SLLRLQETLS AADRCGAALA GHQLIRGLGQ ECVLSSSPAV LALQTSLVFS RDFGLLVFV RKSLNSIEFR ECREEILKFL CIFLEKMGQK IAPYSVEIKN TCTSVYTKDR A AKCKIPAL DLLIKLLQTF RSSRLMDEFK IGELFSKFYG ELALKKKIPD TVLEKVYELL GL LGEVHPS EMINNAENLF RAFLGELKTQ MTSAVREPKL PVLAGCLKGL SSLLCNFTKS MEE DPQTSR EIFNFVLKAI RPQIDLKRYA VPSAGLRLFA LHASQFSTCL LDNYVSLFEV LLKW CAHTN VELKKAALSA LESFLKQVSN MVAKNAEMHK NKLQYFMEQF YGIIRNVDSN NKELS IAIR GYGLFAGPCK VINAKDVDFM YVELIQRCKQ MFLTQTDTGD DRVYQMPSFL QSVASV LLY LDTVPEVYTP VLEHLVVMQI DSFPQYSPKM QLVCCRAIVK VFLALAAKGP VLRNCIS TV VHQGLIRICS KPVVLPKGPE SESEDHRASG EVRTGKWKVP TYKDYVDLFR HLLSSDQM M DSILADEAFF SVNSSSESLN HLLYDEFVKS VLKIVEKLDL TLEIQTVGEQ ENGDEAPGV WMIPTSDPAA NLHPAKPKDF SAFINLVEFC REILPEKQAE FFEPWVYSFS YELILQSTRL PLISGFYKL LSITVRNAKK IKYFEGVSPK SLKHSPEDPE KYSCFALFVK FGKEVAVKMK Q YKDELLAS CLTFLLSLPH NIIELDVRAY VPALQMAFKL GLSYTPLAEV GLNALEEWSI YI DRHVMQP YYKDILPCLD GYLKTSALSD ETKNNWEVSA LSRAAQKGFN KVVLKHLKKT KNL SSNEAI SLEEIRIRVV QMLGSLGGQI NKNLLTVTSS DEMMKSYVAW DREKRLSFAV PFRE MKPVI FLDVFLPRVT ELALTASDRQ TKVAACELLH SMVMFMLGKA TQMPEGGQGA PPMYQ LYKR TFPVLLRLAC DVDQVTRQLY EPLVMQLIHW FTNNKKFESQ DTVALLEAIL DGIVDP VDS TLRDFCGRCI REFLKWSIKQ ITPQQQEKSP VNTKSLFKRL YSLALHPNAF KRLGASL AF NNIYREFREE ESLVEQFVFE ALVIYMESLA LAHADEKSLG TIQQCCDAID HLCRIIEK K HVSLNKAKKR RLPRGFPPSA SLCLLDLVKW LLAHCGRPQT ECRHKSIELF YKFVPLLPG NRSPNLWLKD VLKEEGVSFL INTFEGGGCG QPSGILAQPT LLYLRGPFSL QATLCWLDLL LAALECYNT FIGERTVGAL QVLGTEAQSS LLKAVAFFLE SIAMHDIIAA EKCFGTGAAG N RTSPQEGE RYNYSKCTVV VRIMEFTTTL LNTSPEGWKL LKKDLCNTHL MRVLVQTLCE PA SIGFNIG DVQVMAHLPD VCVNLMKALK MSPYKDILET HLREKITAQS IEELCAVNLY GPD AQVDRS RLAAVVSACK QLHRAGLLHN ILPSQSTDLH HSVGTELLSL VYKGIAPGDE RQCL PSLDL SCKQLASGLL ELAFAFGGLC ERLVSLLLNP AVLSTASLGS SQGSVIHFSH GEYFY SLFS ETINTELLKN LDLAVLELMQ SSVDNTKMVS AVLNGMLDQS FRERANQKHQ GLKLAT TIL QHWKKCDSWW AKDSPLETKM AVLALLAKIL QIDSSVSFNT SHGSFPEVFT TYISLLA DT KLDLHLKGQA VTLLPFFTSL TGGSLEELRR VLEQLIVAHF PMQSREFPPG TPRFNNYV D CMKKFLDALE LSQSPMLLEL MTEVLCREQQ HVMEELFQSS FRRIARRGSC VTQVGLLES VYEMFRKDDP RLSFTRQSFV DRSLLTLLWH CSLDALREFF STIVVDAIDV LKSRFTKLNE STFDTQITK KMGYYKILDV MYSRLPKDDV HAKESKINQV FHGSCITEGN ELTKTLIKLC Y DAFTENMA GENQLLERRR LYHCAAYNCA ISVICCVFNE LKFYQGFLFS EKPEKNLLIF EN LIDLKRR YNFPVEVEVP MERKKKYIEI RKEAREAANG DSDGPSYMSS LSYLADSTLS EEM SQFDFS TGVQSYSYSS QDPRPATGRF RRREQRDPTV HDDVLELEMD ELNRHECMAP LTAL VKHMH RSLGPPQGEE DSVPRDLPSW MKFLHGKLGN PIVPLNIRLF LAKLVINTEE VFRPY AKHW LSPLLQLAAS ENNGGEGIHY MVVEIVATIL SWTGLATPTG VPKDEVLANR LLNFLM KHV FHPKRAVFRH NLEIIKTLVE CWKDCLSIPY RLIFEKFSGK DPNSKDNSVG IQLLGIV MA NDLPPYDPQC GIQSSEYFQA LVNNMSFVRY KEVYAAAAEV LGLILRYVME RKNILEES L CELVAKQLKQ HQNTMEDKFI VCLNKVTKSF PPLADRFMNA VFFLLPKFHG VLKTLCLEV VLCRVEGMTE LYFQLKSKDF VQVMRHRDDE RQKVCLDIIY KMMPKLKPVE LRELLNPVVE FVSHPSTTC REQMYNILMW IHDNYRDPES ETDNDSQEIF KLAKDVLIQG LIDENPGLQL I IRNFWSHE TRLPSNTLDR LLALNSLYSP KIEVHFLSLA TNFLLEMTSM SPDYPNPMFE HP LSECEFQ EYTIDSDWRF RSTVLTPMFV ETQASQGTLQ TRTQEGSLSA RWPVAGQIRA TQQ QHDFTL TQTADGRSSF DWLTGSSTDP LVDHTSPSSD SLLFAHKRSE RLQRAPLKSV GPDF GKKRL GLPGDEVDNK VKGAAGRTDL LRLRRRFMRD QEKLSLMYAR KGVAEQKREK EIKSE LKMK QDAQVVLYRS YRHGDLPDIQ IKHSSLITPL QAVAQRDPII AKQLFSSLFS GILKEM DKF KTLSEKNNIT QKLLQDFNRF LNTTFSFFPP FVSCIQDISC QHAALLSLDP AAVSAGC LA SLQQPVGIRL LEEALLRLLP AELPAKRVRG KARLPPDVLR WVELAKLYRS IGEYDVLR G IFTSEIGTKQ ITQSALLAEA RSDYSEAAKQ YDEALNKQDW VDGEPTEAEK DFWELASLD CYNHLAEWKS LEYCSTASID SENPPDLNKI WSEPFYQETY LPYMIRSKLK LLLQGEADQS LLTFIDKAM HGELQKAILE LHYSQELSLL YLLQDDVDRA KYYIQNGIQS FMQNYSSIDV L LHQSRLTK LQSVQALTEI QEFISFISKQ GNLSSQVPLK RLLNTWTNRY PDAKMDPMNI WD DIITNRC FFLSKIEEKL TPLPEDNSMN VDQDGDPSDR MEVQEQEEDI SSLIRSCKFS MKM KMIDSA RKQNNFSLAM KLLKELHKES KTRDDWLVSW VQSYCRLSHC RSRSQGCSEQ VLTV LKTVS LLDENNVSSY LSKNILAFRD QNILLGTTYR IIANALSSEP ACLAEIEEDK ARRIL ELSG SSSEDSEKVI AGLYQRAFQH LSEAVQAAEE EAQPPSWSCG PAAGVIDAYM TLADFC DQQ LRKEEENASV IDSAELQAYP ALVVEKMLKA LKLNSNEARL KFPRLLQIIE RYPEETL SL MTKEISSVPC WQFISWISHM VALLDKDQAV AVQHSVEEIT DNYPQAIVYP FIISSESY S FKDTSTGHKN KEFVARIKSK LDQGGVIQDF INALDQLSNP ELLFKDWSND VRAELAKTP VNKKNIEKMY ERMYAALGDP KAPGLGAFRR KFIQTFGKEF DKHFGKGGSK LLRMKLSDFN DITNMLLLK MNKDSKPPGN LKECSPWMSD FKVEFLRNEL EIPGQYDGRG KPLPEYHVRI A GFDERVTV MASLRRPKRI IIRGHDEREH PFLVKGGEDL RQDQRVEQLF QVMNGILAQD SA CSQRALQ LRTYSVVPMT SRLGLIEWLE NTVTLKDLLL NTMSQEEKAA YLSDPRAPPC EYK DWLTKM SGKHDVGAYM LMYKGANRTE TVTSFRKRES KVPADLLKRA FVRMSTSPEA FLAL RSHFA SSHALICISH WILGIGDRHL NNFMVAMETG GVIGIDFGHA FGSATQFLPV PELMP FRLT RQFINLMLPM KETGLMYSIM VHALRAFRSD PGLLTNTMDV FVKEPSFDWK NFEQKM LKK GGSWIQEINV AEKNWYPRQK ICYAKRKLAG ANPAVITCDE LLLGHEKAPA FRDYVAV AR GSKDHNIRAQ EPESGLSEET QVKCLMDQAT DPNILGRTWE GWEPWM |
-分子 #6: DNLI4_HUMAN DNA ligase 4
分子 | 名称: DNLI4_HUMAN DNA ligase 4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: unidentified baculovirus (ウイルス) |
配列 | 文字列: SNIFEDVEFC VMSGTDSQPK PDLENRIAEF GGYIVQNPGP DTYCVIAGSE NIRVKNIILS NKHDV VKPA WLLECFKTKS FVPWQPRFMI HMCPSTKEHF AREYDCYGDS YFIDTDLNQL KEVFSGIKNS N |
-分子 #4: DNA (31-MER)
分子 | 名称: DNA (31-MER) / タイプ: dna / ID: 4 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: (DT)(DC)(DT)(DA)(DA)(DG)(DA)(DA)(DC)(DT) (DC)(DT)(DG)(DA)(DT)(DG)(DT)(DC)(DA)(DG) (DT)(DA)(DG)(DA)(DT)(DT)(DA)(DC)(DA) (DC)(DT) |
-分子 #5: DNA (30-MER)
分子 | 名称: DNA (30-MER) / タイプ: dna / ID: 5 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: (DG)(DT)(DG)(DT)(DA)(DA)(DT)(DC)(DT)(DA) (DC)(DT)(DG)(DA)(DC)(DA)(DT)(DC)(DA)(DG) (DA)(DG)(DT)(DT)(DC)(DT)(DT)(DA)(DG) (DA) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.9 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R3.5/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: GRAPHENE OXIDE / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 200.0 nm / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 101.325 kPa | |||||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 3200FS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - サイズ - 横: 3710 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3838 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-30 / 撮影したグリッド数: 4 / 実像数: 17114 / 平均露光時間: 0.3 sec. / 平均電子線量: 76.5 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: DARK FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 倍率(公称値): 30000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: JEOL / ホルダー冷却材: NITROGEN |