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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-22631 | |||||||||
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タイトル | PIKfyve/Fig4/Vac14 complex centered on Fig4 - map3 | |||||||||
マップデータ | PIKfyve complex density map centered on Fig4 | |||||||||
試料 |
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キーワード | Lipid kinase / Lipid phosphatase / protein complex / LIPID BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 phosphatidylinositol-3,5-bisphosphate 5-phosphatase activity / myelin assembly / Synthesis of PIPs at the late endosome membrane / Synthesis of PIPs at the early endosome membrane / negative regulation of myelination / phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase / phosphoinositide 5-phosphatase / phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase activity / Synthesis of PIPs at the Golgi membrane / phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 5-phosphatase activity ...phosphatidylinositol-3,5-bisphosphate 5-phosphatase activity / myelin assembly / Synthesis of PIPs at the late endosome membrane / Synthesis of PIPs at the early endosome membrane / negative regulation of myelination / phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase / phosphoinositide 5-phosphatase / phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase activity / Synthesis of PIPs at the Golgi membrane / phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 5-phosphatase activity / phosphatidylinositol dephosphorylation / vacuole organization / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 1価のリン酸エステル加水分解酵素 / phosphatidylinositol biosynthetic process / pigmentation / protein serine/threonine phosphatase activity / protein-serine/threonine phosphatase / neuron development / lipid droplet / locomotory behavior / late endosome membrane / early endosome membrane / endosome membrane / Golgi membrane / intracellular membrane-bounded organelle 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Lees JA / Reinisch KM | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2020 タイトル: Insights into Lysosomal PI(3,5)P Homeostasis from a Structural-Biochemical Analysis of the PIKfyve Lipid Kinase Complex. 著者: Joshua A Lees / PeiQi Li / Nikit Kumar / Lois S Weisman / Karin M Reinisch / 要旨: The phosphoinositide PI(3,5)P, generated exclusively by the PIKfyve lipid kinase complex, is key for lysosomal biology. Here, we explore how PI(3,5)P levels within cells are regulated. We find the ...The phosphoinositide PI(3,5)P, generated exclusively by the PIKfyve lipid kinase complex, is key for lysosomal biology. Here, we explore how PI(3,5)P levels within cells are regulated. We find the PIKfyve complex comprises five copies of the scaffolding protein Vac14 and one copy each of the lipid kinase PIKfyve, generating PI(3,5)P from PI3P and the lipid phosphatase Fig4, reversing the reaction. Fig4 is active as a lipid phosphatase in the ternary complex, whereas PIKfyve within the complex cannot access membrane-incorporated phosphoinositides due to steric constraints. We find further that the phosphoinositide-directed activities of both PIKfyve and Fig4 are regulated by protein-directed activities within the complex. PIKfyve autophosphorylation represses its lipid kinase activity and stimulates Fig4 lipid phosphatase activity. Further, Fig4 is also a protein phosphatase acting on PIKfyve to stimulate its lipid kinase activity, explaining why catalytically active Fig4 is required for maximal PI(3,5)P production by PIKfyve in vivo. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_22631.map.gz | 227.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-22631-v30.xml emd-22631.xml | 10.3 KB 10.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_22631.png | 77 KB | ||
Filedesc metadata | emd-22631.cif.gz | 5.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-22631 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-22631 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_22631_validation.pdf.gz | 565 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_22631_full_validation.pdf.gz | 564.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_22631_validation.xml.gz | 6.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_22631_validation.cif.gz | 7.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-22631 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-22631 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_22631.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | PIKfyve complex density map centered on Fig4 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.05 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : PIKfyve/Fig4/Vac14 complex
全体 | 名称: PIKfyve/Fig4/Vac14 complex |
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要素 |
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-超分子 #1: PIKfyve/Fig4/Vac14 complex
超分子 | 名称: PIKfyve/Fig4/Vac14 complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 4.28 MDa |
-分子 #1: Fig4 Sac homology model
分子 | 名称: Fig4 Sac homology model / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 105.144289 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MHHHHHHHHG SMPTAAAPII SSVQKLVLYE TRARYFLVGS NNAETKYRVL KIDRTEPKDL VIIDDRHVYT QQEVRELLGR LDLGNRTKM GQKGSSGLFR AVSAFGVVGF VRFLEGYYIV LITKRRKMAD IGGHAIYKVE DTNMIYIPND SVRVTHPDEA R YLRIFQNV ...文字列: MHHHHHHHHG SMPTAAAPII SSVQKLVLYE TRARYFLVGS NNAETKYRVL KIDRTEPKDL VIIDDRHVYT QQEVRELLGR LDLGNRTKM GQKGSSGLFR AVSAFGVVGF VRFLEGYYIV LITKRRKMAD IGGHAIYKVE DTNMIYIPND SVRVTHPDEA R YLRIFQNV DLSSNFYFSY SYDLSHSLQY NLTVLRMPLE MLKSEMTQNR QESFDIFEDE GLITQGGSGV FGICSEPYMK YV WNGELLD IIKSTVHRDW LLYIIHGFCG QSKLLIYGRP VYVTLIARRS SKFAGTRFLK RGANCEGDVA NEVETEQILC DAS VMSFTA GSYSSYVQVR GSVPLYWSQD ISTMMPKPPI TLDQADPFAH VAALHFDQMF QRFGSPIIIL NLVKEREKRK HERI LSEEL VAAVTYLNQF LPPEHTIVYI PWDMAKYTKS KLCNVLDRLN VIAESVVKKT GFFVNRPDSY CSILRPDEKW NELGG CVIP TGRLQTGILR TNCVDCLDRT NTAQFMVGKC ALAYQLYSLG LIDKPNLQFD TDAVRLFEEL YEDHGDTLSL QYGGSQ LVH RVKTYRKIAP WTQHSKDIMQ TLSRYYSNAF SDADRQDSIN LFLGVFHPTE GKPHLWELPT DFYLHHKNTM RLLPTRR SY TYWWTPEVIK HLPLPYDEVI CAVNLKKLIV KKFHKYEEEI DIHNEFFRPY ELSSFDDTFC LAMTSSARDF MPKTVGID P SPFTVRKPDE TGKSVLGNKS NREEAVLQRK TAASAPPPPS EEAVSSSSED DSGTDREEEG SVSQRSTPVK MTDAGDSAK VTENVVQPMK ELYGINLSDG LSEEDFSIYS RFVQLGQSQH KQDKNSQQPC SRCSDGVIKL TPISAFSQDN IYEVQPPRVD RKSTEIFQA HIQASQGIMQ PLGKEDSSMY REYIRNRYL |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 58.4 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 5.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 19998 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |