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- EMDB-12237: Subtomogram average reconstruction of humanVPS34 complex II bound... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-12237
タイトルSubtomogram average reconstruction of humanVPS34 complex II bound to Rab5a on a lipid membrane
マップデータA reconstruction of the VPS34 complex II bound to Rab5a on lipid vesicles created by subtomogram averaging. The map was sharpened with LAFTER and resampled onto the map from EMD-12214
試料
  • 複合体: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human Rab5a on lipid vesicles
    • タンパク質・ペプチド: UV radiation resistance-associated gene protein
    • タンパク質・ペプチド: Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3
    • タンパク質・ペプチド: Phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit 4
    • タンパク質・ペプチド: Beclin-1
    • タンパク質・ペプチド: Ras-related protein Rab-5A
機能・相同性
機能・相同性情報


lytic vacuole / maintenance of Golgi location / regulation of protein serine/threonine kinase activity / regulation of endosome size / postsynaptic early endosome / nucleus-vacuole junction / cellular response to aluminum ion / cytoplasmic side of early endosome membrane / Toll Like Receptor 9 (TLR9) Cascade / protein lipidation ...lytic vacuole / maintenance of Golgi location / regulation of protein serine/threonine kinase activity / regulation of endosome size / postsynaptic early endosome / nucleus-vacuole junction / cellular response to aluminum ion / cytoplasmic side of early endosome membrane / Toll Like Receptor 9 (TLR9) Cascade / protein lipidation / Synthesis of PIPs at the late endosome membrane / phosphatidylinositol 3-kinase complex, class III / Synthesis of PIPs at the early endosome membrane / synaptic vesicle recycling / phosphatidylinositol 3-kinase complex, class III, type II / positive regulation of stress granule assembly / cellular response to oxygen-glucose deprivation / phosphatidylinositol 3-kinase complex, class III, type I / response to mitochondrial depolarisation / positive regulation of attachment of mitotic spindle microtubules to kinetochore / amyloid-beta clearance by transcytosis / cytoplasmic side of mitochondrial outer membrane / negative regulation of lysosome organization / positive regulation by host of viral genome replication / modulation by host of viral process / Synthesis of PIPs at the Golgi membrane / regulation of autophagosome assembly / positive regulation of autophagosome assembly / negative regulation of autophagosome assembly / receptor catabolic process / engulfment of apoptotic cell / phosphatidylinositol kinase activity / protein localization to phagophore assembly site / regulation of filopodium assembly / suppression by virus of host autophagy / multivesicular body sorting pathway / RAB geranylgeranylation / protein targeting to lysosome / protein targeting to vacuole / early endosome to late endosome transport / late endosome to vacuole transport / cellular response to nitrogen starvation / SMAD protein signal transduction / RAB GEFs exchange GTP for GDP on RABs / double-strand break repair via classical nonhomologous end joining / early phagosome / retrograde vesicle-mediated transport, Golgi to endoplasmic reticulum / Translation of Replicase and Assembly of the Replication Transcription Complex / phagophore assembly site / negative regulation of programmed cell death / response to iron(II) ion / TBC/RABGAPs / centrosome cycle / positive regulation of autophagosome maturation / SNARE complex assembly / autolysosome / phosphatidylinositol 3-kinase / phosphatidylinositol-3-phosphate biosynthetic process / spindle organization / mitotic metaphase chromosome alignment / regulation of synaptic vesicle exocytosis / cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway / Macroautophagy / 1-phosphatidylinositol-3-kinase activity / RSV-host interactions / lysosome organization / positive regulation of cardiac muscle hypertrophy / p38MAPK cascade / positive regulation of exocytosis / axoneme / Synthesis of PIPs at the plasma membrane / phosphatidylinositol-mediated signaling / autophagosome membrane / Respiratory syncytial virus (RSV) attachment and entry / phosphatidylinositol phosphate biosynthetic process / mitophagy / chromosome, centromeric region / autophagosome maturation / autophagosome assembly / PI3K Cascade / RHO GTPases Activate NADPH Oxidases / negative regulation of reactive oxygen species metabolic process / neuron development / autophagosome / response to vitamin E / canonical Wnt signaling pathway / regulation of macroautophagy / amyloid-beta metabolic process / endomembrane system / cellular defense response / cellular response to glucose starvation / positive regulation of autophagy / phosphatidylinositol 3-kinase binding / phagocytosis / axon terminus / positive regulation of intrinsic apoptotic signaling pathway / JNK cascade / somatodendritic compartment / cellular response to epidermal growth factor stimulus / Prevention of phagosomal-lysosomal fusion
類似検索 - 分子機能
UV radiation resistance protein/autophagy-related protein 14 / Vacuolar sorting 38 and autophagy-related subunit 14 / Serine/threonine-protein kinase Vps15-like / Beclin-1, BH3 domain / Beclin-1 BH3 domain, Bcl-2-interacting / Atg6/Beclin / Atg6/Beclin C-terminal domain superfamily / Atg6, BARA domain / Atg6/beclin, coiled-coil domain / Apg6 BARA domain ...UV radiation resistance protein/autophagy-related protein 14 / Vacuolar sorting 38 and autophagy-related subunit 14 / Serine/threonine-protein kinase Vps15-like / Beclin-1, BH3 domain / Beclin-1 BH3 domain, Bcl-2-interacting / Atg6/Beclin / Atg6/Beclin C-terminal domain superfamily / Atg6, BARA domain / Atg6/beclin, coiled-coil domain / Apg6 BARA domain / Apg6 coiled-coil region / Phosphatidylinositol 3-kinase, Vps34 type / HEAT repeat profile. / HEAT, type 2 / small GTPase Rab1 family profile. / Phosphoinositide 3-kinase C2 / Phosphoinositide 3-kinase, region postulated to contain C2 domain / C2 phosphatidylinositol 3-kinase-type domain / C2 phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)-type domain profile. / Phosphoinositide 3-kinase, accessory (PIK) domain superfamily / Phosphoinositide 3-kinase family, accessory domain (PIK domain) / Phosphoinositide 3-kinase family, accessory domain (PIK domain) / Phosphoinositide 3-kinase, accessory (PIK) domain / Phosphatidylinositol kinase / PIK helical domain profile. / Protein kinase C conserved region 2 (CalB) / C2 domain / C2 domain profile. / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinases signature 1. / Phosphatidylinositol 3/4-kinase, conserved site / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinases signature 2. / Phosphatidylinositol 3-/4-kinase, catalytic domain superfamily / Phosphoinositide 3-kinase, catalytic domain / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinase / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinases catalytic domain profile. / Phosphatidylinositol 3-/4-kinase, catalytic domain / Ran (Ras-related nuclear proteins) /TC4 subfamily of small GTPases / C2 domain superfamily / Rho (Ras homology) subfamily of Ras-like small GTPases / Ras subfamily of RAS small GTPases / Small GTPase / Ras family / Rab subfamily of small GTPases / Armadillo-like helical / Small GTP-binding protein domain / Armadillo-type fold / Trp-Asp (WD) repeats signature. / Trp-Asp (WD) repeats profile. / Trp-Asp (WD) repeats circular profile. / WD domain, G-beta repeat / WD40 repeats / WD40 repeat / WD40-repeat-containing domain superfamily / Serine/threonine-protein kinase, active site / Serine/Threonine protein kinases active-site signature. / WD40/YVTN repeat-like-containing domain superfamily / Protein kinase domain / Serine/Threonine protein kinases, catalytic domain / Protein kinase domain profile. / Protein kinase domain / Protein kinase-like domain superfamily / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
Ras-related protein Rab-5A / Beclin-1 / Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3 / Phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit 4 / UV radiation resistance-associated gene protein
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 13.3 Å
データ登録者Tremel S / Ohashi Y / Morado DR / Bertram J / Perisic O / Brandt LTL / von Wrisberg M-K / Chen ZA / Maslen SL / Kovtun O ...Tremel S / Ohashi Y / Morado DR / Bertram J / Perisic O / Brandt LTL / von Wrisberg M-K / Chen ZA / Maslen SL / Kovtun O / Skehel M / Rappsilber J / Lang K / Munro S / Briggs JAG / Williams RL
資金援助 英国, ドイツ, 9件
OrganizationGrant number国
Medical Research Council (MRC, United Kingdom)MC_U105184308 英国
Medical Research Council (MRC, United Kingdom)MC_U10517878 英国
Medical Research Council (MRC, United Kingdom)MC_UP_1201/16 英国
Cancer Research UKC14801/A21211 英国
European Research Council (ERC)ERC-CoG-648432 英国
German Research Foundation (DFG)Sonderforschungsbereich 1035, project number 201302640, project B10 ドイツ
German Research Foundation (DFG)392923329 ドイツ
Wellcome Trust103139 英国
Wellcome Trust203149 英国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021
タイトル: Structural basis for VPS34 kinase activation by Rab1 and Rab5 on membranes.
著者: Shirley Tremel / Yohei Ohashi / Dustin R Morado / Jessie Bertram / Olga Perisic / Laura T L Brandt / Marie-Kristin von Wrisberg / Zhuo A Chen / Sarah L Maslen / Oleksiy Kovtun / Mark Skehel / ...著者: Shirley Tremel / Yohei Ohashi / Dustin R Morado / Jessie Bertram / Olga Perisic / Laura T L Brandt / Marie-Kristin von Wrisberg / Zhuo A Chen / Sarah L Maslen / Oleksiy Kovtun / Mark Skehel / Juri Rappsilber / Kathrin Lang / Sean Munro / John A G Briggs / Roger L Williams /
要旨: The lipid phosphatidylinositol-3-phosphate (PI3P) is a regulator of two fundamental but distinct cellular processes, endocytosis and autophagy, so its generation needs to be under precise temporal ...The lipid phosphatidylinositol-3-phosphate (PI3P) is a regulator of two fundamental but distinct cellular processes, endocytosis and autophagy, so its generation needs to be under precise temporal and spatial control. PI3P is generated by two complexes that both contain the lipid kinase VPS34: complex II on endosomes (VPS34/VPS15/Beclin 1/UVRAG), and complex I on autophagosomes (VPS34/VPS15/Beclin 1/ATG14L). The endosomal GTPase Rab5 binds complex II, but the mechanism of VPS34 activation by Rab5 has remained elusive, and no GTPase is known to bind complex I. Here we show that Rab5a-GTP recruits endocytic complex II to membranes and activates it by binding between the VPS34 C2 and VPS15 WD40 domains. Electron cryotomography of complex II on Rab5a-decorated vesicles shows that the VPS34 kinase domain is released from inhibition by VPS15 and hovers over the lipid bilayer, poised for catalysis. We also show that the GTPase Rab1a, which is known to be involved in autophagy, recruits and activates the autophagy-specific complex I, but not complex II. Both Rabs bind to the same VPS34 interface but in a manner unique for each. These findings reveal how VPS34 complexes are activated on membranes by specific Rab GTPases and how they are recruited to unique cellular locations.
履歴
登録2021年1月23日-
ヘッダ(付随情報) 公開2021年6月16日-
マップ公開2021年6月16日-
更新2021年6月16日-
現状2021年6月16日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.008
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（高さに従い着色）
  • 表面レベル: 0.008
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_12237.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_12237.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈A reconstruction of the VPS34 complex II bound to Rab5a on lipid vesicles created by subtomogram averaging. The map was sharpened with LAFTER and resampled onto the map from EMD-12214
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.0665 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.008 / ムービー #1: 0.008
最小 - 最大-0.08853249 - 0.12369968
平均 (標準偏差)2.3871984e-05 (±0.005715127)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ320320320
Spacing320320320
セルA=B=C: 341.27997 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.06651.06651.0665
M x/y/z320320320
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z341.280341.280341.280
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ696888
NX/NY/NZ828048
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS320320320
D min/max/mean-0.0890.1240.000

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添付データ

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ハーフマップ: A reconstruction of the VPS34 complex II bound...

ファイルemd_12237_half_map_1.map
注釈A reconstruction of the VPS34 complex II bound to Rab5a on lipid vesicles created by subtomogram averaging. The even half map, before LAFTER sharpening.
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: A reconstruction of the VPS34 complex II bound...

ファイルemd_12237_half_map_2.map
注釈A reconstruction of the VPS34 complex II bound to Rab5a on lipid vesicles created by subtomogram averaging. The odd half map, before LAFTER sharpening.
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human...

全体名称: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human Rab5a on lipid vesicles
要素
  • 複合体: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human Rab5a on lipid vesicles
    • タンパク質・ペプチド: UV radiation resistance-associated gene protein
    • タンパク質・ペプチド: Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3
    • タンパク質・ペプチド: Phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit 4
    • タンパク質・ペプチド: Beclin-1
    • タンパク質・ペプチド: Ras-related protein Rab-5A

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超分子 #1: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human...

超分子名称: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human Rab5a on lipid vesicles
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
詳細: The subunits were expressed using transient transfection in HEK293T cells. Cells were transfected with three plasmids: pYO1025 (encoding VPS34 and VPS15 in a pCAG backbone), pYO1124 (encoding ...詳細: The subunits were expressed using transient transfection in HEK293T cells. Cells were transfected with three plasmids: pYO1025 (encoding VPS34 and VPS15 in a pCAG backbone), pYO1124 (encoding UVGRAG 1-464 fused to the BATS of ATG14, residues 413-492 in pVAG) and pYO1006 (Beclin1 in pCAG)
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 392.16 KDa

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分子 #1: UV radiation resistance-associated gene protein

分子名称: UV radiation resistance-associated gene protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 詳細: Human UVRAG / 光学異性体: LEVO / EC番号: phosphatidylinositol 3-kinase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MSASASVGGP VPQPPPGPAA ALPPGSAARA LHVELPSQQR RLRHLRNIAA RNIVNRNGHQ LLDTYFTLHL CSTEKIYKEF YRSEVIKNS LNPTWRSLDF GIMPDRLDTS VSCFVVKIWG GKENIYQLLI EWKVCLDGLK YLGQQIHARN QNEIIFGLND G YYGAPFEH ...文字列:
MSASASVGGP VPQPPPGPAA ALPPGSAARA LHVELPSQQR RLRHLRNIAA RNIVNRNGHQ LLDTYFTLHL CSTEKIYKEF YRSEVIKNS LNPTWRSLDF GIMPDRLDTS VSCFVVKIWG GKENIYQLLI EWKVCLDGLK YLGQQIHARN QNEIIFGLND G YYGAPFEH KGYSNAQKTI LLQVDQNCVR NSYDVFSLLR LHRAQCAIKQ TQVTVQKIGK EIEEKLRLTS TSNELKKKSE CL QLKILVL QNELERQKKA LGREVALLHK QQIALQDKGS AFSAEHLKLQ LQKESLNELR KECTAKRELF LKTNAQLTIR CRQ LLSELS YIYPIDLNEH KDYFVCGVKL PNSEDFQAKD DGSIAVALGY TAHLVSMISF FLQVPLRYPI IHKGSRSTIK DNIN DKLTE KEREFPLYPK GGEKLQFDYG VYLLNKNIAQ LRYQHGLGTP DLRQTLPNLK NFMEHGLMVR CDRHHTSSAI PVPKR QSSI FGGADVGFSG GIPSPDKGHR KRASSENERL QYKTPPPSYN SALAQPVTTV PSMGETERKI TSLSSSLDTS LDFSKE NKK KGEDLVGSLN GGHANVHPSQ EQGEALSGHR ATVNGTLLPS EQAGSASVQL PGEFHPVSEA ELCCTVEQAE EIIGLEA TG FASGDQLEAF NCIPVDSAVA VECDEQVLGE FEEFSRRIYA LNENVSSFRR PRRSSDK

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分子 #2: Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3

分子名称: Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3
タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 詳細: human vps34 / 光学異性体: LEVO / EC番号: phosphatidylinositol 3-kinase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MGEAEKFHYI YSCDLDINVQ LKIGSLEGKR EQKSYKAVLE DPMLKFSGLY QETCSDLYVT CQVFAEGKPL ALPVRTSYKA FSTRWNWNE WLKLPVKYPD LPRNAQVALT IWDVYGPGKA VPVGGTTVSL FGKYGMFRQG MHDLKVWPNV EADGSEPTKT P GRTSSTLS ...文字列:
MGEAEKFHYI YSCDLDINVQ LKIGSLEGKR EQKSYKAVLE DPMLKFSGLY QETCSDLYVT CQVFAEGKPL ALPVRTSYKA FSTRWNWNE WLKLPVKYPD LPRNAQVALT IWDVYGPGKA VPVGGTTVSL FGKYGMFRQG MHDLKVWPNV EADGSEPTKT P GRTSSTLS EDQMSRLAKL TKAHRQGHMV KVDWLDRLTF REIEMINESE KRSSNFMYLM VEFRCVKCDD KEYGIVYYEK DG DESSPIL TSFELVKVPD PQMSMENLVE SKHHKLARSL RSGPSDHDLK PNAATRDQLN IIVSYPPTKQ LTYEEQDLVW KFR YYLTNQ EKALTKFLKC VNWDLPQEAK QALELLGKWK PMDVEDSLEL LSSHYTNPTV RRYAVARLRQ ADDEDLLMYL LQLV QALKY ENFDDIKNGL EPTKKDSQSS VSENVSNSGI NSAEIDSSQI ITSPLPSVSS PPPASKTKEV PDGENLEQDL CTFLI SRAC KNSTLANYLY WYVIVECEDQ DTQQRDPKTH EMYLNVMRRF SQALLKGDKS VRVMRSLLAA QQTFVDRLVH LMKAVQ RES GNRKKKNERL QALLGDNEKM NLSDVELIPL PLEPQVKIRG IIPETATLFK SALMPAQLFF KTEDGGKYPV IFKHGDD LR QDQLILQIIS LMDKLLRKEN LDLKLTPYKV LATSTKHGFM QFIQSVPVAE VLDTEGSIQN FFRKYAPSEN GPNGISAE V MDTYVKSCAG YCVITYILGV GDRHLDNLLL TKTGKLFHID FGYILGRDPK PLPPPMKLNK EMVEGMGGTQ SEQYQEFRK QCYTAFLHLR RYSNLILNLF SLMVDANIPD IALEPDKTVK KVQDKFRLDL SDEEAVHYMQ SLIDESVHAL FAAVVEQIHK FAQYWRK

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分子 #3: Phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit 4

分子名称: Phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit 4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MGNQLAGIAP SQILSVESYF SDIHDFEYDK SLGSTRFFKV ARAKHREGLV VVKVFAIQDP TLPLTSYKQE LEELKIRLNS AQNCLPFQK ASEKASEKAA MLFRQYVRDN LYDRISTRPF LNNIEKRWIA FQILTAVDQA HKSGVRHGDI KTENVMVTSW N WVLLTDFA ...文字列:
MGNQLAGIAP SQILSVESYF SDIHDFEYDK SLGSTRFFKV ARAKHREGLV VVKVFAIQDP TLPLTSYKQE LEELKIRLNS AQNCLPFQK ASEKASEKAA MLFRQYVRDN LYDRISTRPF LNNIEKRWIA FQILTAVDQA HKSGVRHGDI KTENVMVTSW N WVLLTDFA SFKPTYLPED NPADFNYFFD TSRRRTCYIA PERFVDGGMF ATELEYMRDP STPLVDLNSN QRTRGELKRA MD IFSAGCV IAELFTEGVP LFDLSQLLAY RNGHFFPEQV LNKIEDHSIR ELVTQMIHRE PDKRLEAEDY LKQQRGNAFP EIF YTFLQP YMAQFAKETF LSADERILVI RKDLGNIIHN LCGHDLPEKA EGEPKENGLV ILVSVITSCL QTLKYCDSKL AALE LILHL APRLSVEILL DRITPYLLHF SNDSVPRVRA EALRTLTKVL ALVKEVPRND INIYPEYILP GIAHLAQDDA TIVRL AYAE NIALLAETAL RFLELVQLKN LNMENDPNNE EIDEVTHPNG NYDTELQALH EMVQQKVVTL LSDPENIVKQ TLMENG ITR LCVFFGRQKA NDVLLSHMIT FLNDKNDWHL RGAFFDSIVG VAAYVGWQSS SILKPLLQQG LSDAEEFVIV KALYALT CM CQLGLLQKPH VYEFASDIAP FLCHPNLWIR YGAVGFITVV ARQISTADVY CKLMPYLDPY ITQPIIQIER KLVLLSVL K EPVSRSIFDY ALRSKDITSL FRHLHMRQKK RNGSLPDCPP PEDPAIAQLL KKLLSQGMTE EEEDKLLALK DFMMKSNKA KANIVDQSHL HDSSQKGVID LAALGITGRQ VDLVKTKQEP DDKRARKHVK QDSNVNEEWK SMFGSLDPPN MPQALPKGSD QEVIQTGKP PRSESSAGIC VPLSTSSQVP EVTTVQNKKP VIPVLSSTIL PSTYQIRITT CKTELQQLIQ QKREQCNAER I AKQMMENA EWESKPPPPG WRPKGLLVAH LHEHKSAVNR IRVSDEHSLF ATCSNDGTVK IWNSQKMEGK TTTTRSILTY SR IGGRVKT LTFCQGSHYL AIASDNGAVQ LLGIEASKLP KSPKIHPLQS RILDQKEDGC VVDMHHFNSG AQSVLAYATV NGS LVGWDL RSSSNAWTLK HDLKSGLITS FAVDIHQCWL CIGTSSGTMA CWDMRFQLPI SSHCHPSRAR IRRLSMHPLY QSWV IAAVQ GNNEVSMWDM ETGDRRFTLW ASSAPPLSEL QPSPHSVHGI YCSPADGNPI LLTAGSDMKI RFWDLAYPER SYVVA GSTS SPSVSYYRKI IEGTEVVQEI QNKQKVGPSD DTPRRGPESL PVGHHDIITD VATFQTTQGF IVTASRDGIV KVWKSR PTT ASENLYFQ

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分子 #4: Beclin-1

分子名称: Beclin-1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MEGSKTSNNS TMQVSFVCQR CSQPLKLDTS FKILDRVTIQ ELTAPLLTTA QAKPGETQEE ETNSGEEPFI ETPRQDGVSR RFIPPARMM STESANSFTL IGEASDGGTM ENLSRRLKVT GDLFDIMSGQ TDVDHPLCEE CTDTLLDQLD TQLNVTENEC Q NYKRCLEI ...文字列:
MEGSKTSNNS TMQVSFVCQR CSQPLKLDTS FKILDRVTIQ ELTAPLLTTA QAKPGETQEE ETNSGEEPFI ETPRQDGVSR RFIPPARMM STESANSFTL IGEASDGGTM ENLSRRLKVT GDLFDIMSGQ TDVDHPLCEE CTDTLLDQLD TQLNVTENEC Q NYKRCLEI LEQMNEDDSE QLQMELKELA LEEERLIQEL EDVEKNRKIV AENLEKVQAE AERLDQEEAQ YQREYSEFKR QQ LELDDEL KSVENQMRYA QTQLDKLKKT NVFNATFHIW HSGQFGTINN FRLGRLPSVP VEWNEINAAW GQTVLLLHAL ANK MGLKFQ RYRLVPYGNH SYLESLTDKS KELPLYCSGG LRFFWDNKFD HAMVAFLDCV QQFKEEVEKG ETRFCLPYRM DVEK GKIED TGGSGGSYSI KTQFNSEEQW TKALKFMLTN LKWGLAWVSS QFYNK

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分子 #5: Ras-related protein Rab-5A

分子名称: Ras-related protein Rab-5A / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / 光学異性体: LEVO / EC番号: small monomeric GTPase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
NKISQFKLVL LGESAVGKSS LVLRFVKGQF HEFQESTIGA AFLTQTVSLD DTTVKFEIWD TAGLERYHSL APMYYRGAQA AIVVYDITN EESFARAKNW VKELQRQASP NIVIALSGNK ADLANKRAVD FQEAQSYADD NSLLFMETSA KTSMNVNEIF M AIAKKLPK

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態3D array

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試料調製

濃度6.2 mg/mL
緩衝液pH: 8
構成要素:
濃度式名称
50.0 mMHEPESHEPES
200.0 mMNaClNaCl
0.5 mMTCEPTCEP
グリッドモデル: Quantifoil / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR / 詳細: Quorum SC7620
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 316 K / 装置: FEI VITROBOT MARK I / 詳細: blot force was 20, with a blot time of 6 s.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / デジタル化 - サイズ - 横: 6000 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4000 pixel / デジタル化 - サンプリング間隔: 5.0 µm / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 0.55 sec. / 平均電子線量: 2.99 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 5.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 倍率（公称値）: 81000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成使用したクラス数: 6 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 13.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) / 使用したサブトモグラム数: 26979
抽出トモグラム数: 105 / 使用した粒子像数: 191196
参照モデル: two gaussian-filtered elipsoids forming a V shape
詳細: To identify particles, subtomograms were aligned to an initial reference consisting of two gaussian-filtered ellipsoids forming a V-shape (Supplementary Fig. 6a, reference). After aligning ...詳細: To identify particles, subtomograms were aligned to an initial reference consisting of two gaussian-filtered ellipsoids forming a V-shape (Supplementary Fig. 6a, reference). After aligning against the V-shape, some subtomograms converged and formed clusters, which indicated the presence of a particle The subtomogram coordinates were cleaned by a minimal distance threshold (distance cut off 8 px, cluster size 2, cluster distance 2 px) and cross correlation cut-off so that 191,169 particles remained.
CTF補正ソフトウェア - 名称: NOVACTF (ver. 1.0.0)
最終 3次元分類クラス数: 20 / 平均メンバー数/クラス: 9600 / ソフトウェア - 名称: MATLAB (ver. R2016b)
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
Projection matching processing - Merit function: Correlation coefficient
ソフトウェア - 名称: MATLAB (ver. R2016b) / ソフトウェア - 詳細: Local MATLAB program SUBTOM
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデル
PDB IDChain

7bl1

chain_id: A

7bl1

chain_id: B

7bl1

chain_id: C

7bl1

chain_id: D

7bl1

chain_id: E

7bl1

chain_id: F
詳細The model in PDB 7BL1 was built and refined into the subtomogram averaged density map in EMD-12214. This map had the membrane portion of the reconstruction masked out. The reconstruction described in the final reconstruction described above includes the membrane that was masked out in EMD-12214. The final reconstruction was sharpened in LAFTER then resampled onto the density of EMD-12214, for ease of fitting the 7BL1 model.
精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 温度因子: 320 / 当てはまり具合の基準: Correlation coefficient

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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