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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-11827 | ||||||||||||||||||
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タイトル | Nonameric cytoplasmic domain of FlhA from Vibrio parahaemolyticus | ||||||||||||||||||
マップデータ | postprocessed map | ||||||||||||||||||
試料 |
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キーワード | T3SS / export apparatus / secretion / protein export / motility / PROTEIN TRANSPORT | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 bacterial-type flagellum assembly / protein secretion / membrane => GO:0016020 / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | Vibrio parahaemolyticus (腸炎ビブリオ) | ||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.75 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | Kuhlen L / Johnson S | ||||||||||||||||||
資金援助 | 英国, 5件
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引用 | ジャーナル: PLoS One / 年: 2021 タイトル: Nonameric structures of the cytoplasmic domain of FlhA and SctV in the context of the full-length protein. 著者: Lucas Kuhlen / Steven Johnson / Jerry Cao / Justin C Deme / Susan M Lea / 要旨: Type three secretion is the mechanism of protein secretion found in bacterial flagella and injectisomes. At its centre is the export apparatus (EA), a complex of five membrane proteins through which ...Type three secretion is the mechanism of protein secretion found in bacterial flagella and injectisomes. At its centre is the export apparatus (EA), a complex of five membrane proteins through which secretion substrates pass the inner membrane. While the complex formed by four of the EA proteins has been well characterised structurally, little is known about the structure of the membrane domain of the largest subunit, FlhA in flagella, SctV in injectisomes. Furthermore, the biologically relevant nonameric assembly of FlhA/SctV has been infrequently observed and differences in conformation of the cytoplasmic portion of FlhA/SctV between open and closed states have been suggested to reflect secretion system specific differences. FlhA has been shown to bind to chaperone-substrate complexes in an open state, but in previous assembled ring structures, SctV is in a closed state. Here, we identify FlhA and SctV homologues that can be recombinantly produced in the oligomeric state and study them using cryo-electron microscopy. The structures of the cytoplasmic domains from both FlhA and SctV are in the open state and we observe a conserved interaction between a short stretch of residues at the N-terminus of the cytoplasmic domain, known as FlhAL/SctVL, with a groove on the adjacent protomer's cytoplasmic domain, which stabilises the nonameric ring assembly. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_11827.map.gz | 265.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-11827-v30.xml emd-11827.xml | 15.4 KB 15.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_11827_fsc.xml | 15.1 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_11827.png | 191.2 KB | ||
マスクデータ | emd_11827_msk_1.map | 290.8 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-11827.cif.gz | 5.7 KB | ||
その他 | emd_11827_half_map_1.map.gz emd_11827_half_map_2.map.gz | 231.8 MB 231.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11827 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11827 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_11827_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_11827_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_11827_validation.xml.gz | 22.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_11827_validation.cif.gz | 29.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11827 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11827 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_11827.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 290.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | postprocessed map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.822 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_11827_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map 1
ファイル | emd_11827_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map 2
ファイル | emd_11827_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Nonamer of the FlhA cytoplasmic domain from Vibrio parahaemolyticus
全体 | 名称: Nonamer of the FlhA cytoplasmic domain from Vibrio parahaemolyticus |
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要素 |
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-超分子 #1: Nonamer of the FlhA cytoplasmic domain from Vibrio parahaemolyticus
超分子 | 名称: Nonamer of the FlhA cytoplasmic domain from Vibrio parahaemolyticus タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Vibrio parahaemolyticus (腸炎ビブリオ) |
分子量 | 理論値: 700 KDa |
-分子 #1: Flagellar biosynthesis protein FlhA
分子 | 名称: Flagellar biosynthesis protein FlhA / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 9 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Vibrio parahaemolyticus (腸炎ビブリオ) |
分子量 | 理論値: 76.55582 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: MLTRLKQLQT STKGYIGIPI VLLMILAMVI LPLPPLLLDA LFTFNIVLAI LVLLVSTTAK RPLDFSVFPT ILLVATLLRL TLNVASTRI VLLEGHNGGD AAGKVIQAFG EVVIGGNYVV GMVVFIILMI INFVVITKGG ERISEVSARF TLDALPGKQM A IDADLNAG ...文字列: MLTRLKQLQT STKGYIGIPI VLLMILAMVI LPLPPLLLDA LFTFNIVLAI LVLLVSTTAK RPLDFSVFPT ILLVATLLRL TLNVASTRI VLLEGHNGGD AAGKVIQAFG EVVIGGNYVV GMVVFIILMI INFVVITKGG ERISEVSARF TLDALPGKQM A IDADLNAG LIDQETARLR RKEVANEADF HGSMDGASKF VRGDAVAGLL ILFINIIGGI SIGVFEHGLP ASEAFKTYAL LT IGDGLVA QIPSLLLATA AAIIVTRIND SDNGMSETMQ KQLLATPATL FTVAGIMAVI GMVPGMPHLA FFAFAGALGF AGW RQSKKP VQDTQIEQVE ALSQAMQEED TPLTWDDIPH VHTLSLALGY RLVHLVNKDQ GAPLSQRIRG VRRNLSEQVG FLLP EVRIR DNLSLKPNQY TISLNGEVIE QGFIEPERLM AIAVGDTYGE IDGILGSDPA YQLPAVWIEH QDKAKALNMG YQVVD DGTV IATHISKIMK TNLAELFTHD DVEAMTQRLT QQAPKLAEAL AAALNPAQQL KVYRQLLLDQ VPLKDIRTIA NTMLES SEN TKDPILLAAD VRCALKRTLV NLIAGQKPEL NVYALSDELE QMLLTSLQQA QASGTVVLDS FPIEPNILGQ FQQNLPL IR QQLKQQGLPP ILLVMPQLRP LLARYARTFT QGLAVLSYNE IPENKQINVV GNLGENLYFQ UniProtKB: Flagellar biosynthesis protein FlhA |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 48.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |