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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1143 | |||||||||
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タイトル | Structure of the E. coli protein-conducting channel bound to a translating ribosome. | |||||||||
マップデータ | EM map of the E.coli proten-conducting channel bound to a translating ribosome | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein insertion into membrane from inner side / cell envelope Sec protein transport complex / protein transport by the Sec complex / intracellular protein transmembrane transport / protein-transporting ATPase activity / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane, translocation / signal sequence binding / stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding ...protein insertion into membrane from inner side / cell envelope Sec protein transport complex / protein transport by the Sec complex / intracellular protein transmembrane transport / protein-transporting ATPase activity / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane, translocation / signal sequence binding / stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / protein transmembrane transporter activity / RNA folding / protein secretion / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / protein targeting / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / membrane => GO:0016020 / translational termination / four-way junction DNA binding / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / positive regulation of RNA splicing / transcription elongation factor complex / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA endonuclease activity / response to reactive oxygen species / transcription antitermination / regulation of cell growth / DNA-templated transcription termination / intracellular protein transport / maintenance of translational fidelity / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome biogenesis / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / molecular adaptor activity / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / mRNA binding / protein homodimerization activity / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) / unidentified (未定義) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 14.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Mitra K / Schaffitzel C / Shaikh T / Tama F / Jenni S / Brooks III CL / Ban N / Frank J | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2005 タイトル: Structure of the E. coli protein-conducting channel bound to a translating ribosome. 著者: Kakoli Mitra / Christiane Schaffitzel / Tanvir Shaikh / Florence Tama / Simon Jenni / Charles L Brooks / Nenad Ban / Joachim Frank / 要旨: Secreted and membrane proteins are translocated across or into cell membranes through a protein-conducting channel (PCC). Here we present a cryo-electron microscopy reconstruction of the Escherichia ...Secreted and membrane proteins are translocated across or into cell membranes through a protein-conducting channel (PCC). Here we present a cryo-electron microscopy reconstruction of the Escherichia coli PCC, SecYEG, complexed with the ribosome and a nascent chain containing a signal anchor. This reconstruction shows a messenger RNA, three transfer RNAs, the nascent chain, and detailed features of both a translocating PCC and a second, non-translocating PCC bound to mRNA hairpins. The translocating PCC forms connections with ribosomal RNA hairpins on two sides and ribosomal proteins at the back, leaving a frontal opening. Normal mode-based flexible fitting of the archaeal SecYEbeta structure into the PCC electron microscopy densities favours a front-to-front arrangement of two SecYEG complexes in the PCC, and supports channel formation by the opening of two linked SecY halves during polypeptide translocation. On the basis of our observation in the translocating PCC of two segregated pores with different degrees of access to bulk lipid, we propose a model for co-translational protein translocation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1143.map.gz | 6.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1143-v30.xml emd-1143.xml | 14.3 KB 14.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 1143.gif | 67.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1143 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1143 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1143_validation.pdf.gz | 317.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1143_full_validation.pdf.gz | 317 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1143_validation.xml.gz | 5.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1143 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1143 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1143.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 6.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | EM map of the E.coli proten-conducting channel bound to a translating ribosome | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ |
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密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : co-translational E. coli 70S ribosome-nascent chain complexed wit...
全体 | 名称: co-translational E. coli 70S ribosome-nascent chain complexed with SecYEG |
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要素 |
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-超分子 #1000: co-translational E. coli 70S ribosome-nascent chain complexed wit...
超分子 | 名称: co-translational E. coli 70S ribosome-nascent chain complexed with SecYEG タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 8 |
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-超分子 #1: 30S
超分子 | 名称: 30S / タイプ: complex / ID: 1 / Name.synonym: small subunit / 組換発現: No / Ribosome-details: ribosome-prokaryote: SSU 30S |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-超分子 #2: 50S
超分子 | 名称: 50S / タイプ: complex / ID: 2 / Name.synonym: large subunit / 組換発現: No / Ribosome-details: ribosome-prokaryote: LSU 50S |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #1: A-site tRNA
分子 | 名称: A-site tRNA / タイプ: rna / ID: 1 / 分類: OTHER / Structure: DOUBLE HELIX / Synthetic?: No |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #2: P-site tRNA
分子 | 名称: P-site tRNA / タイプ: rna / ID: 2 / 分類: OTHER / Structure: DOUBLE HELIX / Synthetic?: No |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #3: E-site tRNA
分子 | 名称: E-site tRNA / タイプ: rna / ID: 3 / 分類: OTHER / Structure: DOUBLE HELIX / Synthetic?: No |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #4: mRNA
分子 | 名称: mRNA / タイプ: rna / ID: 4 / 分類: OTHER / Structure: SINGLE STRANDED / Synthetic?: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #5: protein-conducting channel
分子 | 名称: protein-conducting channel / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / Name.synonym: translocon, SecYEG / コピー数: 2 / 集合状態: dimer of heterotrimer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 別称: translocon / 細胞中の位置: inner membrane |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #6: nascent chain
分子 | 名称: nascent chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / 詳細: Strep-II-FtsQ-SecM construct / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: unidentified (未定義) / 別称: translocon |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER 詳細: Vitrification instrument: two sided blotting plunger 手法: Blot for 2 seconds before plunging |
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-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F30 |
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温度 | 平均: 93 K |
日付 | 2004年3月9日 |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 14 µm / 実像数: 385 / 平均電子線量: 11 e/Å2 / Od range: 1.2 / ビット/ピクセル: 12 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 39000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.26 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.3 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 39000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Cryo stage / 試料ホルダーモデル: OTHER |
実験機器 | モデル: Tecnai F30 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: defocus groups |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 14.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPIDER package 詳細: The falloff of Fourier amplitudes toward higher spatial frequencies was corrected using the x-ray solution scattering intensity distribution of 70S ribosomes from E. coli during each round of refinement 使用した粒子像数: 53325 |
最終 角度割当 | 詳細: SPIDER: theta 15 degrees, phi 15 degrees |
-原子モデル構築 1
詳細 | Protocol: normal mode-based flexible fitting. Fitting of SecYEG atomic model into isolated EM density of protein-conducting channels |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 当てはまり具合の基準: correlation coefficient |
得られたモデル | PDB-2akh: PDB-2aki: PDB-4v4w: |
-原子モデル構築 2
詳細 | Protocol: normal mode-based flexible fitting. Fitting of SecYEG atomic model into isolated EM density of protein-conducting channels |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 当てはまり具合の基準: correlation coefficient |
得られたモデル | PDB-2akh: PDB-2aki: PDB-4v4w: |
-原子モデル構築 3
ソフトウェア | 名称: RSR2000 |
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詳細 | Protocol: real space refinement |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 当てはまり具合の基準: R-factor |
得られたモデル | PDB-2akh: PDB-2aki: PDB-4v4w: |
-原子モデル構築 4
ソフトウェア | 名称: RSR2000 |
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詳細 | Protocol: real space refinement |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 当てはまり具合の基準: R-factor |
得られたモデル | PDB-2akh: PDB-2aki: PDB-4v4w: |