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タイトルStructural basis of RfaH-mediated transcription-translation coupling.
ジャーナル・号・ページNat Struct Mol Biol, Year 2024
掲載日2024年8月8日
著者Vadim Molodtsov / Chengyuan Wang / Jing Zhang / Jason T Kaelber / Gregor Blaha / Richard H Ebright /
PubMed 要旨The NusG paralog RfaH mediates bacterial transcription-translation coupling in genes that contain a DNA sequence element, termed an ops site, required for pausing RNA polymerase (RNAP) and for ...The NusG paralog RfaH mediates bacterial transcription-translation coupling in genes that contain a DNA sequence element, termed an ops site, required for pausing RNA polymerase (RNAP) and for loading RfaH onto the paused RNAP. Here, we report cryo-electron microscopy structures of transcription-translation complexes (TTCs) containing Escherichia coli RfaH. The results show that RfaH bridges RNAP and the ribosome, with the RfaH N-terminal domain interacting with RNAP and the RfaH C-terminal domain interacting with the ribosome. The results show that the distribution of translational and orientational positions of RNAP relative to the ribosome in RfaH-coupled TTCs is more restricted than in NusG-coupled TTCs because of the more restricted flexibility of the RfaH interdomain linker. The results further suggest that the structural organization of RfaH-coupled TTCs in the 'loading state', in which RNAP and RfaH are located at the ops site during formation of the TTC, is the same as the structural organization of RfaH-coupled TTCs in the 'loaded state', in which RNAP and RfaH are located at positions downstream of the ops site during function of the TTC. The results define the structural organization of RfaH-containing TTCs and set the stage for analysis of functions of RfaH during translation initiation and transcription-translation coupling.
リンクNat Struct Mol Biol / PubMed:39117885
手法EM (単粒子)
解像度3.1 - 6.6 Å
構造データ

EMDB-42453, PDB-8upo:
Escherichia coli transcription-translation coupled complex class A (TTC-A) containing RfaH bound to ops signal, mRNA with a 21 nt long spacer, and fMet-tRNAs in E-site and P-site of the ribosome
手法: EM (単粒子) / 解像度: 5.5 Å

EMDB-42454, PDB-8upr:
Escherichia coli transcription-translation coupled complex class A (TTC-A) containing RfaH bound to ops signal, mRNA with a 21 nt long spacer, and fMet-tRNAs in E-site and P-site of the ribosome
手法: EM (単粒子) / 解像度: 5.3 Å

EMDB-42473, PDB-8uql:
Escherichia coli transcription-translation coupled complex class B (TTC-B) containing RfaH in loaded state, mRNA with a 24 nt long spacer, and fMet-tRNAs in E-site and P-site of the ribosome
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

EMDB-42474, PDB-8uqm:
Escherichia coli transcription-translation coupled complex class B (TTC-B) containing RfaH in loaded state, NusA, mRNA with a 24 nt long spacer, and fMet-tRNAs in E-site and P-site of the ribosome
手法: EM (単粒子) / 解像度: 5.3 Å

EMDB-42477, PDB-8uqp:
Escherichia coli transcription-translation coupled complex class B (TTC-B) containing RfaH bound to ops signal, mRNA with a 24 nt long spacer, and fMet-tRNAs in E-site and P-site of the ribosome
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-42479, PDB-8ur0:
Escherichia coli transcription-translation coupled complex class B (TTC-B) containing RfaH bound to ops signal, NusA, mRNA with a 24 nt long spacer, and fMet-tRNAs in E-site and P-site of the ribosome
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.4 Å

EMDB-42492, PDB-8urh:
Escherichia coli transcription-translation coupled complex class B (TTC-B) containing RfaH bound to ops signal, mRNA with a 27 nt long spacer, and fMet-tRNAs in E-site and P-site of the ribosome
手法: EM (単粒子) / 解像度: 5.7 Å

EMDB-42493, PDB-8uri:
Escherichia coli transcription-translation coupled complex class B (TTC-B) containing RfaH bound to ops signal, NusA, mRNA with a 27 nt long spacer, and fMet-tRNAs in E-site and P-site of the ribosome
手法: EM (単粒子) / 解像度: 5.3 Å

EMDB-42503, PDB-8urx:
Escherichia coli transcription-translation coupled complex class B (TTC-B) containing RfaH bound to ops signal, mRNA with a 30 nt long spacer, and fMet-tRNAs in E-site and P-site of the ribosome
手法: EM (単粒子) / 解像度: 6.6 Å

EMDB-42504, PDB-8ury:
Escherichia coli transcription-translation coupled complex class B (TTC-B) containing RfaH bound to ops signal, NusA, mRNA with a 30 nt long spacer, and fMet-tRNA in E-site and P-site of the ribosome
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.1 Å

化合物

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-ZN:
Unknown entry

由来
  • escherichia coli (大腸菌)
  • synthetic construct (人工物)
キーワードTRANSCRIPTION / translation / RfaH / gene expression / regulation / ops / ribosome / coupling / expressome / NusA / RNA / RNA polymerase

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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