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タイトルStructural basis of closed groove scrambling by a TMEM16 protein.
ジャーナル・号・ページNat Struct Mol Biol, Vol. 31, Issue 10, Page 1468-1481, Year 2024
掲載日2024年4月29日
著者Zhang Feng / Omar E Alvarenga / Alessio Accardi /
PubMed 要旨Activation of Ca-dependent TMEM16 scramblases induces phosphatidylserine externalization, a key step in multiple signaling processes. Current models suggest that the TMEM16s scramble lipids by ...Activation of Ca-dependent TMEM16 scramblases induces phosphatidylserine externalization, a key step in multiple signaling processes. Current models suggest that the TMEM16s scramble lipids by deforming the membrane near a hydrophilic groove and that Ca dependence arises from the different association of lipids with an open or closed groove. However, the molecular rearrangements underlying groove opening and how lipids reorganize outside the closed groove remain unknown. Here we directly visualize how lipids associate at the closed groove of Ca-bound fungal nhTMEM16 in nanodiscs using cryo-EM. Functional experiments pinpoint lipid-protein interaction sites critical for closed groove scrambling. Structural and functional analyses suggest groove opening entails the sequential appearance of two π-helical turns in the groove-lining TM6 helix and identify critical rearrangements. Finally, we show that the choice of scaffold protein and lipids affects the conformations of nhTMEM16 and their distribution, highlighting a key role of these factors in cryo-EM structure determination.
リンクNat Struct Mol Biol / PubMed:38684930
手法EM (単粒子)
解像度2.64 - 4.07 Å
構造データ

EMDB-41453, PDB-8toi:
nhTMEM16 lipid scramblase in lipid nanodiscs with MSP1E3 scaffold protein in the presence of Ca2+ (closed state)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.64 Å

EMDB-41454, PDB-8tok:
nhTMEM16 lipid scramblase in lipid nanodiscs with MSP2N2 scaffold protein in the presence of Ca2+ (open state)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.84 Å

EMDB-41455, PDB-8tol:
nhTMEM16 lipid scramblase in lipid nanodiscs with MSP1E3 scaffold protein in the presence of Ca2+ (open state)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.85 Å

EMDB-41457: nhTMEM16 lipid scramblase in lipid nanodiscs with MSP1E3 scaffold protein in the presence of Ca2+ (closed state) (consensus map)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.64 Å

EMDB-41458: nhTMEM16 lipid scramblase in lipid nanodiscs with MSP1E3 scaffold protein in the presence of Ca2+ (closed state)(local refined monomer map)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.64 Å

EMDB-41477, PDB-8tpm:
nhTMEM16 lipid scramblase in lipid nanodiscs with MSP1E3 scaffold protein in the absence of Ca2+
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.93 Å

EMDB-41478, PDB-8tpn:
nhTMEM16 lipid scramblase in lipid nanodiscs with MSP2N2 scaffold protein in the presence of Ca2+ (intermediate state)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.07 Å

EMDB-41479, PDB-8tpo:
nhTMEM16 R432A mutant in lipid nanodiscs with MSP1E3 scaffold protein in the presence of Ca2+
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.59 Å

EMDB-41480, PDB-8tpp:
nhTMEM16 R432A mutant in lipid nanodiscs with MSP2N2 scaffold protein in the presence of Ca2+
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.64 Å

EMDB-41481, PDB-8tpq:
nhTMEM16 A444P mutant in lipid nanodiscs with MSP1E3 scaffold protein in the presence of Ca2+ (long TM6)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.35 Å

EMDB-41482, PDB-8tpr:
nhTMEM16 A444P mutant in lipid nanodiscs with MSP1E3 scaffold protein in the presence of Ca2+ (short TM6)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.85 Å

EMDB-41483, PDB-8tps:
nhTMEM16 A444P mutant in lipid nanodiscs with MSP1E3 scaffold protein in the presence of Ca2+ (bent TM6)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.97 Å

EMDB-41484, PDB-8tpt:
nhTMEM16 A444P mutant in lipid nanodiscs with MSP1E3 scaffold protein in the presence of Ca2+ (long TM6/short TM6)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.01 Å

化合物

ChemComp-CA:
Unknown entry / カルシウムジカチオン

ChemComp-PGW:
(1R)-2-{[(S)-{[(2S)-2,3-dihydroxypropyl]oxy}(hydroxy)phosphoryl]oxy}-1-[(hexadecanoyloxy)methyl]ethyl / POPG / リン脂質*YM

由来
  • fusarium vanettenii 77-13-4 (菌類)
  • fusarium vanettenii (菌類)
キーワードLIPID TRANSPORT / membrane protein / lipid scramblase / TMEM16

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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