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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-11029 | |||||||||
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タイトル | CryoEM structure of the interaction between Rubisco Activase small-subunit-like (SSUL) domain with Rubisco from Nostoc sp. (strain PCC7120) | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | beta barrel / PHOTOSYNTHESIS | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 photorespiration / carboxysome / ribulose-bisphosphate carboxylase / ribulose-bisphosphate carboxylase activity / reductive pentose-phosphate cycle / monooxygenase activity / magnesium ion binding / ATP hydrolysis activity / ATP binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Nostoc sp. PCC 7120 = FACHB-418 (バクテリア) / Nostoc sp. (strain PCC 7120 / SAG 25.82 / UTEX 2576) (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.2 Å | |||||||||
データ登録者 | Wang H / Bracher A | |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2020 タイトル: Dual Functions of a Rubisco Activase in Metabolic Repair and Recruitment to Carboxysomes. 著者: Mirkko Flecken / Huping Wang / Leonhard Popilka / F Ulrich Hartl / Andreas Bracher / Manajit Hayer-Hartl / 要旨: Rubisco, the key enzyme of CO fixation in photosynthesis, is prone to inactivation by inhibitory sugar phosphates. Inhibited Rubisco undergoes conformational repair by the hexameric AAA+ chaperone ...Rubisco, the key enzyme of CO fixation in photosynthesis, is prone to inactivation by inhibitory sugar phosphates. Inhibited Rubisco undergoes conformational repair by the hexameric AAA+ chaperone Rubisco activase (Rca) in a process that is not well understood. Here, we performed a structural and mechanistic analysis of cyanobacterial Rca, a close homolog of plant Rca. In the Rca:Rubisco complex, Rca is positioned over the Rubisco catalytic site under repair and pulls the N-terminal tail of the large Rubisco subunit (RbcL) into the hexamer pore. Simultaneous displacement of the C terminus of the adjacent RbcL opens the catalytic site for inhibitor release. An alternative interaction of Rca with Rubisco is mediated by C-terminal domains that resemble the small Rubisco subunit. These domains, together with the N-terminal AAA+ hexamer, ensure that Rca is packaged with Rubisco into carboxysomes. The cyanobacterial Rca is a dual-purpose protein with functions in Rubisco repair and carboxysome organization. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_11029.map.gz | 1.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-11029-v30.xml emd-11029.xml | 17 KB 17 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_11029_fsc.xml | 7.2 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_11029.png | 72.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-11029.cif.gz | 6.3 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11029 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11029 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_11029_validation.pdf.gz | 343.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_11029_full_validation.pdf.gz | 342.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_11029_validation.xml.gz | 9.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_11029_validation.cif.gz | 12.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11029 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11029 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_11029.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.885 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Complex between Rubisco Activase small-subunit-like domain with R...
全体 | 名称: Complex between Rubisco Activase small-subunit-like domain with Rubisco from Nostoc sp. (strain PCC7120) |
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要素 |
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-超分子 #1: Complex between Rubisco Activase small-subunit-like domain with R...
超分子 | 名称: Complex between Rubisco Activase small-subunit-like domain with Rubisco from Nostoc sp. (strain PCC7120) タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Nostoc sp. PCC 7120 = FACHB-418 (バクテリア) |
-超分子 #2: SSUL domain of Rca, part of the (Rca)6 hexamer
超分子 | 名称: SSUL domain of Rca, part of the (Rca)6 hexamer / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Nostoc sp. PCC 7120 = FACHB-418 (バクテリア) |
-超分子 #3: (RbcL)2(RbcS)2 unit of the (RbcL)8(RbcS)8 Rubisco complex
超分子 | 名称: (RbcL)2(RbcS)2 unit of the (RbcL)8(RbcS)8 Rubisco complex タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #2-#3 詳細: The (RbcL)8(RbcS)8 Rubisco complex has D4 symmetry. The (RbcL)2(RbcS)2 unit has two-fold roational symmetry. |
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由来(天然) | 生物種: Nostoc sp. PCC 7120 = FACHB-418 (バクテリア) |
-分子 #1: Ribulose bisphosphate carboxylase/oxygenase activase
分子 | 名称: Ribulose bisphosphate carboxylase/oxygenase activase タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Nostoc sp. (strain PCC 7120 / SAG 25.82 / UTEX 2576) (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 10.266549 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
配列 | 文字列: HLSLETQEQI RQILSQGHKI TFEHVDARRF RTGSWQSCGT LHIDAESDAI STLEACLVDY DGEYVRMVGI DPKGKRRVVE TIIQRPNGK N UniProtKB: Ribulose bisphosphate carboxylase/oxygenase activase |
-分子 #2: Ribulose bisphosphate carboxylase large chain
分子 | 名称: Ribulose bisphosphate carboxylase large chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ribulose-bisphosphate carboxylase |
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由来(天然) | 生物種: Nostoc sp. (strain PCC 7120 / SAG 25.82 / UTEX 2576) (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 53.112125 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MSYAQTKTQT KSGYKAGVQD YRLTYYTPDY TPKDTDILAA FRVTPQPGVP FEEAAAAVAA ESSTGTWTTV WTDLLTDLDR YKGRCYDIE PVPGEDNQFI AYIAYPLDLF EEGSITNVLT SIVGNVFGFK ALRALRLEDI RFPVAYIKTF QGPPHGIQVE R DKLNKYGR ...文字列: MSYAQTKTQT KSGYKAGVQD YRLTYYTPDY TPKDTDILAA FRVTPQPGVP FEEAAAAVAA ESSTGTWTTV WTDLLTDLDR YKGRCYDIE PVPGEDNQFI AYIAYPLDLF EEGSITNVLT SIVGNVFGFK ALRALRLEDI RFPVAYIKTF QGPPHGIQVE R DKLNKYGR PLLGCTIKPK LGLSAKNYGR AVYECLRGGL DFTKDDENIN SAPFQRWRDR FLFVADAITK AQAETGEIKG HY LNVTAPT CEEMLKRAEY AKELKQPIIM HDYLTAGFTA NTTLARWCRD NGVLLHIHRA MHAVIDRQKN HGIHFRVLAK ALR LSGGDH IHTGTVVGKL EGERGITMGF VDLLRENYVE QDKSRGIYFT QDWASLPGVM AVASGGIHVW HMPALVEIFG DDSV LQFGG GTLGHPWGNA PGATANRVAL EACVQARNEG RNLAREGNDV IREAAKWSPE LAVACELWKE IKFEFEAMDT V UniProtKB: Ribulose bisphosphate carboxylase large chain |
-分子 #3: Ribulose bisphosphate carboxylase small chain
分子 | 名称: Ribulose bisphosphate carboxylase small chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ribulose-bisphosphate carboxylase |
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由来(天然) | 生物種: Nostoc sp. (strain PCC 7120 / SAG 25.82 / UTEX 2576) (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 12.840725 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MQTLPKERRY ETLSYLPPLT DVQIEKQVQY ILSQGYIPAV EFNEVSEPTE LYWTLWKLPL FGAKTSREVL AEVQSCRSQY PGHYIRVVG FDNIKQCQIL SFIVHKPSRY UniProtKB: Ribulose bisphosphate carboxylase small subunit |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 4.9 mg/mL | |||||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8.4 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | |||||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 298 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV | |||||||||||||||||||||
詳細 | For Preparing the NosRca:Rubisco complex, NosRubisco (1.25 uM) was mixed with NosRca (15 uM). |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS GLACIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1570 / 平均露光時間: 12.0 sec. / 平均電子線量: 47.0 e/Å2 / 詳細: 40 frames per image |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: RIGID BODY FIT |
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得られたモデル | PDB-6z1g: |