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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6v1q | ||||||
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タイトル | Two-pore channel 3 | ||||||
要素 | Two pore channel 3 | ||||||
キーワード | MEMBRANE PROTEIN (膜タンパク質) / Voltag-gated ion channel / two-pore channel / TPC3 | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 sodium ion transmembrane transporter activity / voltage-gated sodium channel activity / 活動電位 / plasma membrane => GO:0005886 / sodium ion transmembrane transport / protein homodimerization activity 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Danio rerio (ゼブラフィッシュ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.11 Å | ||||||
データ登録者 | Dickinson, M.S. / Stroud, R.M. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2020 タイトル: Resting state structure of the hyperdepolarization activated two-pore channel 3. 著者: Miles Sasha Dickinson / Alexander Myasnikov / Jacob Eriksen / Nicole Poweleit / Robert M Stroud / 要旨: Voltage-gated ion channels endow membranes with excitability and the means to propagate action potentials that form the basis of all neuronal signaling. We determined the structure of a voltage-gated ...Voltage-gated ion channels endow membranes with excitability and the means to propagate action potentials that form the basis of all neuronal signaling. We determined the structure of a voltage-gated sodium channel, two-pore channel 3 (TPC3), which generates ultralong action potentials. TPC3 is distinguished by activation only at extreme membrane depolarization (V ∼ +75 mV), in contrast to other TPCs and Na channels that activate between -20 and 0 mV. We present electrophysiological evidence that TPC3 voltage activation depends only on voltage sensing domain 2 (VSD2) and that each of the three gating arginines in VSD2 reduces the activation threshold. The structure presents a chemical basis for sodium selectivity, and a constricted gate suggests a closed pore consistent with extreme voltage dependence. The structure, confirmed by our electrophysiology, illustrates the configuration of a bona fide resting state voltage sensor, observed without the need for any inhibitory ligand, and independent of any chemical or mutagenic alteration. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6v1q.cif.gz | 204.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6v1q.ent.gz | 162 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6v1q.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v1/6v1q ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v1/6v1q | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 88774.164 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Danio rerio (ゼブラフィッシュ) 遺伝子: tpcn3, gb:eh507706, TPC3 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: C4IXV6 #2: 化合物 | ChemComp-NA / | 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Dimer of two-pore channel 3 subunits / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT | ||||||||||||||||
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由来(天然) | 生物種: Danio rerio (ゼブラフィッシュ) | ||||||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.4 | ||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 283 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 92 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: C2 (2回回転対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.11 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 213328 / 対称性のタイプ: POINT |