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万見- EMDB-20039: Cryo-EM structure of mouse RAG1/2 NFC complex (DNA1) with C2 symmetry -
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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-20039 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of mouse RAG1/2 NFC complex (DNA1) with C2 symmetry | |||||||||
マップデータ | Mouse RAG1/2 NFC complex | |||||||||
試料 |
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生物種 | Mus musculus (ハツカネズミ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.44 Å | |||||||||
データ登録者 | Chen X / Cui Y / Zhou ZH / Yang W / Gellert M | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2020 タイトル: Cutting antiparallel DNA strands in a single active site. 著者: Xuemin Chen / Yanxiang Cui / Robert B Best / Huaibin Wang / Z Hong Zhou / Wei Yang / Martin Gellert / 要旨: A single enzyme active site that catalyzes multiple reactions is a well-established biochemical theme, but how one nuclease site cleaves both DNA strands of a double helix has not been well ...A single enzyme active site that catalyzes multiple reactions is a well-established biochemical theme, but how one nuclease site cleaves both DNA strands of a double helix has not been well understood. In analyzing site-specific DNA cleavage by the mammalian RAG1-RAG2 recombinase, which initiates V(D)J recombination, we find that the active site is reconfigured for the two consecutive reactions and the DNA double helix adopts drastically different structures. For initial nicking of the DNA, a locally unwound and unpaired DNA duplex forms a zipper via alternating interstrand base stacking, rather than melting as generally thought. The second strand cleavage and formation of a hairpin-DNA product requires a global scissor-like movement of protein and DNA, delivering the scissile phosphate into the rearranged active site. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_20039.map.gz | 5.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-20039-v30.xml emd-20039.xml | 10.7 KB 10.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_20039.png | 48.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20039 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20039 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_20039.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Mouse RAG1/2 NFC complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.07 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : RAG1/2 Nick-forming complex (DNA1)
全体 | 名称: RAG1/2 Nick-forming complex (DNA1) |
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要素 |
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-超分子 #1: RAG1/2 Nick-forming complex (DNA1)
超分子 | 名称: RAG1/2 Nick-forming complex (DNA1) / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#7 |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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グリッド | 詳細: unspecified |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
詳細 | mouse RAG1/2 NFC complex (DNA2) |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 42.0 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE |
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最終 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE |
最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.44 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 109388 |