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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 9b1e | ||||||||||||
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| タイトル | Cryo-EM structure of native SWR1 bound to nucleosome (composite structure) | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | GENE REGULATION / Chromatin Remodeler / Snf2 family ATPase / histone exchange / H2A.Z | ||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報ATP-dependent H2AZ histone chaperone activity / Interleukin-7 signaling / Chromatin modifying enzymes / Factors involved in megakaryocyte development and platelet production / RCAF complex / SIRT1 negatively regulates rRNA expression / NoRC negatively regulates rRNA expression / Activated PKN1 stimulates transcription of AR (androgen receptor) regulated genes KLK2 and KLK3 / Formation of the beta-catenin:TCF transactivating complex / PRC2 methylates histones and DNA ...ATP-dependent H2AZ histone chaperone activity / Interleukin-7 signaling / Chromatin modifying enzymes / Factors involved in megakaryocyte development and platelet production / RCAF complex / SIRT1 negatively regulates rRNA expression / NoRC negatively regulates rRNA expression / Activated PKN1 stimulates transcription of AR (androgen receptor) regulated genes KLK2 and KLK3 / Formation of the beta-catenin:TCF transactivating complex / PRC2 methylates histones and DNA / HDACs deacetylate histones / Negative Regulation of CDH1 Gene Transcription / MLL4 and MLL3 complexes regulate expression of PPARG target genes in adipogenesis and hepatic steatosis / RNA Polymerase I Promoter Escape / Regulation of endogenous retroelements by KRAB-ZFP proteins / RUNX1 regulates genes involved in megakaryocyte differentiation and platelet function / Senescence-Associated Secretory Phenotype (SASP) / Transcriptional regulation by small RNAs / Estrogen-dependent gene expression / HATs acetylate histones / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / Oxidative Stress Induced Senescence / TTT Hsp90 cochaperone complex / polytene chromosome / R2TP complex / protein targeting to vacuole / Swr1 complex / Ino80 complex / endoplasmic reticulum organization / box C/D snoRNP assembly / nucleosomal DNA binding / NuA4 histone acetyltransferase complex / 3'-5' DNA helicase activity / nucleosome binding / nuclear periphery / DNA helicase activity / rRNA processing / structural constituent of chromatin / nucleosome / nucleosome assembly / chromatin organization / histone binding / 5'-3' DNA helicase activity / DNA helicase / protein stabilization / chromatin remodeling / protein heterodimerization activity / DNA repair / regulation of DNA-templated transcription / regulation of transcription by RNA polymerase II / chromatin / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / DNA binding / zinc ion binding / ATP binding / nucleus / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
| 生物種 | ![]() ![]() ![]() synthetic construct (人工物) | ||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.4 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Louder, R.K. / Park, G. / Wu, C. | ||||||||||||
| 資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2024タイトル: Molecular basis of global promoter sensing and nucleosome capture by the SWR1 chromatin remodeler. 著者: Robert K Louder / Giho Park / Ziyang Ye / Justin S Cha / Anne M Gardner / Qin Lei / Anand Ranjan / Eva Höllmüller / Florian Stengel / B Franklin Pugh / Carl Wu / ![]() 要旨: The SWR1 chromatin remodeling complex is recruited to +1 nucleosomes downstream of transcription start sites of eukaryotic promoters, where it exchanges histone H2A for the specialized variant H2A.Z. ...The SWR1 chromatin remodeling complex is recruited to +1 nucleosomes downstream of transcription start sites of eukaryotic promoters, where it exchanges histone H2A for the specialized variant H2A.Z. Here, we use cryoelectron microscopy (cryo-EM) to resolve the structural basis of the SWR1 interaction with free DNA, revealing a distinct open conformation of the Swr1 ATPase that enables sliding from accessible DNA to nucleosomes. A complete structural model of the SWR1-nucleosome complex illustrates critical roles for Swc2 and Swc3 subunits in oriented nucleosome engagement by SWR1. Moreover, an extended DNA-binding α helix within the Swc3 subunit enables sensing of nucleosome linker length and is essential for SWR1-promoter-specific recruitment and activity. The previously unresolved N-SWR1 subcomplex forms a flexible extended structure, enabling multivalent recognition of acetylated histone tails by reader domains to further direct SWR1 toward the +1 nucleosome. Altogether, our findings provide a generalizable mechanism for promoter-specific targeting of chromatin and transcription complexes. | ||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 9b1e.cif.gz | 1.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb9b1e.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
| PDBx/mmJSON形式 | 9b1e.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/b1/9b1e ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/b1/9b1e | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 44075MC ![]() 9b1dC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
-タンパク質 , 7種, 11分子 ACKQSRTUWVX
| #1: タンパク質 | 分子量: 178058.172 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Fusion protein with C-terminal 3xFLAG 由来: (天然) ![]() Variant: W1558-4C / 参照: DNA helicase | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| #3: タンパク質 | 分子量: 50100.582 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() Variant: W1558-4C / 参照: UniProt: Q12509 | ||||||
| #7: タンパク質 | 分子量: 72648.656 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() Variant: W1558-4C / 参照: UniProt: P31376 | ||||||
| #8: タンパク質 | 分子量: 14013.177 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: HTA1, GI527_G0001155 / 発現宿主: ![]() #9: タンパク質 | 分子量: 14280.362 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: HTB1, GI527_G0001154 / 発現宿主: ![]() #10: タンパク質 | 分子量: 15421.101 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: His3, His3:CG31613, CG31613, His3:CG33803, CG33803, His3:CG33806, CG33806, His3:CG33809, CG33809, His3:CG33812, CG33812, His3:CG33815, CG33815, His3:CG33818, CG33818, His3:CG33821, ...遺伝子: His3, His3:CG31613, CG31613, His3:CG33803, CG33803, His3:CG33806, CG33806, His3:CG33809, CG33809, His3:CG33812, CG33812, His3:CG33815, CG33815, His3:CG33818, CG33818, His3:CG33821, CG33821, His3:CG33824, CG33824, His3:CG33827, CG33827, His3:CG33830, CG33830, His3:CG33833, CG33833, His3:CG33836, CG33836, His3:CG33839, CG33839, His3:CG33842, CG33842, His3:CG33845, CG33845, His3:CG33848, CG33848, His3:CG33851, CG33851, His3:CG33854, CG33854, His3:CG33857, CG33857, His3:CG33860, CG33860, His3:CG33863, CG33863, His3:CG33866, CG33866 発現宿主: ![]() #11: タンパク質 | 分子量: 11408.452 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: His4r, BcDNA:RH52884, CG3379, Dmel\CG3379, FBtr0082962, H4r, His4-88CD, His4R, CG3379, Dmel_CG3379 発現宿主: ![]() |
-Vacuolar protein sorting-associated protein ... , 2種, 2分子 BD
| #2: タンパク質 | 分子量: 90709.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() Variant: W1558-4C / 参照: UniProt: Q03388 |
|---|---|
| #4: タンパク質 | 分子量: 32073.479 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() Variant: W1558-4C / 参照: UniProt: Q03433 |
-RuvB-like protein ... , 2種, 6分子 EGIFHJ
| #5: タンパク質 | 分子量: 91413.242 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 詳細: Fusion protein with C-terminal maltose-binding protein 由来: (天然) ![]() Variant: W1558-4C / 参照: DNA helicase #6: タンパク質 | 分子量: 51673.488 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() Variant: W1558-4C / 参照: UniProt: Q12464, DNA helicase |
|---|
-DNA鎖 , 2種, 2分子 YZ
| #12: DNA鎖 | 分子量: 65672.789 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
|---|---|
| #13: DNA鎖 | 分子量: 66478.328 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
-非ポリマー , 4種, 20分子 






| #14: 化合物 | ChemComp-ADP / #15: 化合物 | #16: 化合物 | ChemComp-MG / #17: 化合物 | |
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-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
|---|---|
| Has protein modification | N |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 |
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| 分子量 |
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| 由来(天然) |
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| 緩衝液 | pH: 7.6 詳細: 80 nM SWR1, 160 nM nucleosomes, 1 mM ADP, 10 mM NaF, 8 mM BeCl2, 0.05% glutaraldehyde, 20 mM HEPES-KOH pH 7.6, 1.5 mM MgCl2, 0.25 mM TCEP, 0.01% IGEPAL CA-630, 1% glycerol | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液成分 |
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| 試料 | 濃度: 0.08 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K / 詳細: 3 second blot time and blot force of 10. |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(補正後): 48543 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3600 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 2000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE |
| 試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 撮影 | 平均露光時間: 4 sec. / 電子線照射量: 54 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 7260 詳細: Each micrograph was fractionated into 64 frames within a 4 second exposure. |
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解析
| EMソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.21_5207 / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
| 粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 525782 | ||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 4.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 16524 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | B value: 200 / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / Target criteria: Cross-correlation coefficient | ||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 |
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| 精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
| 原子変位パラメータ | Biso mean: 187.65 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
|
ムービー
コントローラー
万見について







米国, 3件
引用





















PDBj











































FIELD EMISSION GUN
